中国博士后科学基金(20080431249)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：商澎李京宝骞爱荣张维何刚更多>>
- 相关机构：西北工业大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 失重环境下的细胞外基质被引量：1
- 2009年
- 细胞外基质是机体细胞生命代谢活动的产物,同时又构成和提供了机体组织细胞生存与功能活动的直接微环境。细胞外基质中的一些蛋白质还可通过与其受体整合素的结合参与细胞力学信号转导。失重环境通过干扰细胞外基质与整合素的相互作用,可影响整合素下游的信号通路,最终导致细胞结构、功能及细胞命运的改变。此外,细胞外基质自身结构及其组成蛋白的表达等也受到失重环境影响。由于其本身复杂的功能和在失重条件下的适应性变化,细胞外基质蛋白作为揭示人在空间所面临生理病理变化机制的潜在目标分子,在空间生物学研究领域备受关注。
- 李京宝续惠云骞爱荣商澎
- 关键词：细胞外基质失重整合素失巢凋亡
- 比色法监测细胞培养基酸度被引量：1
- 2009年
- 基于酚红在不同酸度下显色不同的原理,建立了利用比色法检测CO2非依赖培养基L-15pH值的方法.结果表明,L-15培养基的pH值在6.8到8.5范围内,与560nm处吸光度有良好的线性关系(R2=0.9934),依此可通过测量培养基560nm处吸光度计算pH值.还研究了温度和空气接触对该方法的影响,并使用该法成功地监测了L-15培养基培养MG-63细胞过程中酸度的变化.
- 李京宝何刚高翔商澎
- 关键词：PH值比色法细胞培养
- 人骨肉瘤MG-63细胞自分泌可溶性纤连蛋白参与细胞形态维持被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨MG-63细胞自分泌可溶性纤连蛋白(FN)在细胞形态维持中的作用。方法:将培养24 h MG-63细胞随机分成对照组、更换新鲜培养基组(不含自分泌可溶性FN)、更换培养MG-63细胞24 h的条件培养基组(含自分泌可溶性FN)和更换添加FN的新鲜培养基组(添加FN),在0.5 h、1 h和2 h观察细胞形态;采用ELISA法检测新鲜和条件培养基中可溶性FN含量;采用免疫荧光方法观察细胞微丝骨架和不溶性FN的分布变化。结果:检测新鲜和条件培养基可溶性FN浓度结果表明,条件培养基中可溶性FN含量明显高于新鲜培养基(P<0.01);与对照组相比,不含自分泌可溶性FN组细胞0.5 h时回缩明显,由梭形变成圆形,1 h时开始重新铺展,2 h时形态恢复明显;含自分泌可溶性FN组和添加FN组细胞形态没有明显变化;观察细胞微丝骨架和不溶性FN分布发现,与对照组相比,不含自分泌可溶性FN组细胞0.5 h时应力纤维解聚,细胞外纤丝状FN明显减少。结论:细胞自分泌可溶性FN可能通过参与调节不溶性FN和微丝骨架的重构,参与细胞形态调节。
- 罗明志李京宝李胜胜曹建平孟芮张维商澎
- 关键词：MG-63细胞微丝
- In-Cell Western检测细胞纤连蛋白
- 2009年
- 目的:利用In-Cell Western技术建立检测细胞纤连白(cFN)的方法.方法:对微孔培养的成骨样细胞进行固定封闭后,使用单克隆抗体对FN进行标记,经红外荧光二抗育后使用Odysssey系统对细胞进行扫描成像和数据分析.在此基础之上优化了固定剂、通透化、封闭剂和一抗浓度.果:免疫印迹法证实了In-Cell Western方法检测的特异性,当MG-63细胞密度低于90%汇合度(细胞数约1.6×104/孔)时,信号与细胞密度呈现较好的线性关系,最低每孔4×103个MG-63细胞的cFN可被检出.结论:成功地建立了一种快速、经济且高通量的cFN检测方法并将其应用于细胞外基质研究.
- 李京宝胡丽芳张维骞爱荣商澎
- 关键词：WESTERN纤连蛋白细胞外基质
