公共文化服务平台

雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶基因克隆、分析及叶绿体表达载体构建被引量：2: 2007年; β-胡萝卜素酮化酶(BKT)是雨生红球藻虾青素合成途径中的关键酶。根据GenBank中所收录的雨生红球藻BKT的cDNA序列设计特异性引物,以高光照处理的雨生红球藻细胞的总RNA为模板,采用RT-PCR的方法克隆出了β-胡萝卜素酮化酶基因(bkt)。序列测定结果表明,bkt全长960bp编码320个氨基酸。克隆的bkt序列与GenBank收录的BKT的cDNA(AY603347)序列只相差一个碱基。并对其编码的氨基酸进行了二级结构的预测和疏水性分析。同时将所克隆的bkt构建入衣藻叶绿体表达载体p64Dbkt,为基因的进一步表达研究及探索其作用机制奠定了基础。; 檀琮萍梁成伟苏忠亮秦松; 关键词：雨生红球藻

多管藻中具有PTP1B酶抑制活性的新化合物被引量：2: 2006年; 应用正相硅胶、凝胶SephadexLH20柱色谱和反相HPLC等方法,从多管藻(Polysiphoniaurceolata)中分离得到6个溴酚类化合物,通过IR、MS、1D和2DNMR等波谱技术分析鉴定,发现一个有明显的PTP1B抑制活性(IC50=4·9μg/mL)的新化合物:3-溴-4-[3-溴-4,5-二羟基苯基]甲基-5-羟甲基-1,2-二苯酚(1)。另5个已知化合物分别为3-溴-4,5-二羟基苄基乙基醚(2)、3-溴-4,5-二羟基苯甲醇(3)、3-溴-4,5-二羟基苯甲醛(4)、3,5-二溴-4-羟基苯甲醛(5)、3,5-二溴-4-羟基苯甲醇(6)。; 柳全文徐慧张婷范晓韩丽君; 关键词：红藻

裙带菜配子体基因工程选择标记的研究被引量：5: 2007年; 研究了裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体对除草剂草丁膦的敏感性以及温度对草丁膦处理效果的影响。结果表明,裙带菜配子体对草丁膦敏感;统计学分析得出了草丁膦在不同温度条件下处理裙带菜配子体的半致死浓度(LD50)及95%可信限;温差达到10℃时,相同处理时间各组内不同处理温度样品的LD50之间呈现显著差异,第6天的LD50由10℃组的15.78 mg/L降为20℃组的11.56 mg/L和25℃组的10.33 mg/L。研究发现可以尝试采用草丁膦作为裙带菜配子体遗传转化的选择试剂。; 张亦陈高江涛张喆姜鹏秦松; 关键词：配子体

乳糖诱导重组别藻蓝蛋白基因在大肠杆菌中的表达被引量：5: 2005年; 以重组别藻蓝蛋白表达工程菌JM109(DE3)/pET28-APC作为研究对象,对于JM109(DE3)菌株在乳糖诱导下表达重组蛋白的规律进行了研究。比较分析了不同生长阶段进行诱导,最佳乳糖浓度、诱导持续时间和诱导温度等参数对重组蛋白表达的影响。实验结果表明,采用JM109(DE3)为宿主菌,经过条件优化,乳糖诱导重组蛋白的表达量可以达到IPTG诱导的水平;较低的诱导培养温度能有效提高可溶性重组蛋白的表达。最后在摇瓶发酵结果的基础上,实现了乳糖诱导工程菌的5L全自动发酵罐培养。研究结果为在大肠杆菌大规模发酵中,运用廉价、无毒的乳糖作为诱导剂提供了一定的借鉴。; 林凡秦松; 关键词：乳糖别藻蓝蛋白大肠杆菌

雨生红球藻cDNA表达文库的构建与初步分析被引量：1: 2006年; 为了筛选雨生红球藻虾青素合成过程中的关键酶基因的反式调节因子基因,以雨生红球藻的绿细胞为材料,提取了高质量的总RNA,并分离纯化了mRNA,经过反转录后的得到cDNA,构建了以λ-ZAPExpress为载体的表达型cDNA文库。经检测,所构建的文库的滴度为5.1×105,重组率为100%。用PCR方法对文库的质量进行了鉴定,文库的平均插入片断的大小为1.7kb。雨生红球藻cDNA表达文库的构建为研究虾青素的代谢工程奠定了基础。; 梁成伟李友训孟春晓赵方庆杨庆利秦松; 关键词：雨生红球藻 CDNA表达文库

草丁膦抗性基因（bar）在海带配子体中的稳定表达被引量：8: 2006年; 为把海带配子体作为转基因海洋生物反应器,研究了其对除草剂草丁膦的敏感性以及温度对草丁膦处理效果的影响.结果表明：海带配子体对草丁膦敏感;统计学分析得出了草丁膦在不同温度条件下处理海带配子体的半致死浓度（LD50）及95%可信限;温差达到10℃时,相同处理时间各组内不同处理温度样品的LD50之间呈现显著差异.构建了SV40启动子驱动草丁膦抗性基因bar的表达载体pSVB,应用基因枪法转化海带配子体细胞,经40mg/L草丁膦液体培养基筛选出抗性转化子,Southern blotting结果表明bar基因已经整合到海带配子体基因组中.结论：以草丁膦作为筛选压力可以实现外源基因在海带配子体中的稳定表达.; 张亦陈高江涛张喆姜鹏秦松; 关键词：海带配子体草丁膦 BAR基因

雨生红球藻八氢番茄红素合成酶基因的克隆及表征(英文)被引量：9: 2006年; 雨生红球藻是一种单细胞绿藻,在多种逆境胁迫条件下能够大量合成并迅速积累虾青素,其积累量最高可达细胞干重的4%,从而成为目前最理想的天然虾青素合成工具.八氢番茄红素合成酶(PSY)是虾青素合成途径中第一个限速酶.分离了八氢番茄红素合成酶基因(psy)的全长cDNA及基因组DNA.其全长cDNA包括1200个碱基,编码400个氨基酸,基因组DNA包括5个外显子,4个内含子.系统发育分析结果显示,绿藻的八氢番茄红素合成酶基因形成一个进化枝,它们与高等植物的psy亲缘关系比较近.通过GenomeWalking的方法,分离了psy基因约1kb的5′侧翼序列.将含有TATA-box和CAAT-box的297bp的序列与LacZ报告基因构成嵌合的表达载体,用基因枪法转化雨生红球藻.lacZ的瞬间表达检测结果表明,这段上游序列能够驱动lacZ表达,具有启动子活性.; 梁成伟赵方庆秦松檀琮萍魏炜孟春晓; 关键词：雨生红球藻八氢番茄红素合成酶系统发育分析启动子

裙带菜基因工程选择标记的研究被引量：16: 2003年; 研究了裙带菜幼孢子体对10种选择试剂的敏感性。结果发现裙带菜幼孢子体对氯霉素、潮霉素敏感,对除草剂草丁膦极敏感(2天的LD50为8.57mg/L)。根据统计学的要求得出了这3种选择试剂对裙带菜幼孢子体的半致死剂量和95％可信限。本文的结果能为裙带菜基因工程选择标记的建立提供依据。; 于道展杨玲玲姜鹏秦松曾呈奎; 关键词：裙带菜基因工程氯霉素潮霉素草丁膦

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

中国科学院知识创新工程(KZCX3-SW-215)