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国家自然科学基金(30971944)

作品数：5 被引量：14H指数：3
相关作者：钟国华刘海远姜春来陈永高璐更多>>
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相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 5篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 4篇生物学
  • 4篇农业科学

主题

  • 3篇基因
  • 3篇MICROR...
  • 2篇夜蛾
  • 2篇印楝
  • 2篇印楝素
  • 2篇楝素
  • 2篇斜纹夜蛾
  • 2篇昆虫
  • 2篇果蝇
  • 2篇黑腹
  • 2篇黑腹果蝇
  • 2篇RNAI
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白功能
  • 1篇凋亡
  • 1篇信号
  • 1篇信号转导
  • 1篇亚基
  • 1篇影响因素
  • 1篇原核

机构

  • 8篇华南农业大学

作者

  • 7篇钟国华
  • 4篇刘海远
  • 4篇左洪亮
  • 4篇高璐
  • 3篇李海怡
  • 2篇姜春来
  • 2篇陈永
  • 1篇戚晓娴
  • 1篇任太军
  • 1篇胡美英
  • 1篇赖先文
  • 1篇刘婕
  • 1篇黄劲飞
  • 1篇李晓梅
  • 1篇李良德

传媒

  • 2篇昆虫学报
  • 2篇华南农业大学...
  • 1篇生物技术通报
  • 1篇首届“全国青...

年份

  • 5篇2012
  • 1篇2011
  • 2篇2010
共 5 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
斜纹夜蛾蜕皮响应基因E75D的克隆、原核表达分析及microRNA作用位点预测被引量：3
2012年
E75是昆虫蜕皮级联反应中的早期转录因子之一。本研究运用RT-PCR和RACE技术,首次获得了斜纹夜蛾Spodoptera lituraE75D基因,命名为Sli-E75D(GenBank登录号:JQ266225),其开放阅读框全长1836bp,编码611个氨基酸残基,3'非翻译区全长为358bp,同时获得其5'非翻译区共341bp。经核苷酸序列比对分析,E75在鳞翅目昆虫间保守性较高,尤其3'非翻译区具有高保守性,但由于启动子不同,E75异构体mRNA5'端序列存在差异;经氨基酸序列比对,Sli-E75D与棉贪夜蛾Spodoptera littoralis、烟草天蛾Manduca sexta、家蚕Bombyx mori E75D的一致性分别为98.4%,79.3%和76.5%。基于E753'非翻译区的高保守性,利用PITA和RNAhybird程序预测了最有可能调控鳞翅目昆虫E75基因的3种miRNAs:miR-14,miR-33和miR-87。构建pET28a-Sli-E75D表达载体,分别转化BL21(DE3)和Transetta(DE3)菌株,检测大肠杆菌Escherichia coli稀有密码子对E75D原核表达的影响,SDS-PAGE结果显示,转化Transetta(DE3)菌株的pET28a-Sli-E75D可高效表达大小约74.79kD(含预测的67.19kDSli-E75D,7.6kDT7·Tag和His·Tag)的重组蛋白,与其理论分子质量基本吻合,而转化BL21(DE3)菌株的pET28a-Sli-E75D质粒只见微量重组蛋白表达。由于Transetta(DE3)菌株可补充大肠杆菌6种稀有密码子的tRNA,较BL21(DE3)更适合于E75D的外源表达。qPCR检测了斜纹夜蛾从末龄幼虫到成虫发育过程中各时间点Sli-E75的相对表达水平:Sli-E75在6龄幼虫期的表达量较低,从预蛹开始,表达量急剧升高,并在蛹中期达到最高峰,之后迅速下降,但成虫期表达水平又出现回升。这些结果有助于深入研究E75在昆虫蜕皮级联反应中的作用。
高璐左洪亮姜春来刘海远钟国华
关键词：斜纹夜蛾克隆MICRORNA
昆虫microRNAs功能研究进展
microRNAs是小分子非编码的调控RNA,被认为是基因表达转录后水平上的潜在调控者。在黑腹果蝇中,microRNAs已被证实能够在各个阶段调控多个器官组织的发生和发育,如细胞凋亡、生殖干细胞分化和胚胎形成、信号转导、...
李海怡高璐左洪亮钟国华
关键词：MICRORNA昆虫
文献传递
昆虫RNAi效率的影响因素研究进展被引量：8
2012年
RNA干扰(RNAi)是一种在动植物中广泛存在的、由双链RNA诱发的、导致mRNA特异性沉默的过程。简单总结昆虫RNAi的研究现状,从理论和实践两个方面重点介绍昆虫RNAi效率影响因素的研究进展,最后对昆虫RNAi应用于害虫防治的前景进行展望。
李良德刘婕姜春来赖先文
关键词：RNAI影响因素
RNA加尾和引物延伸法检测黑腹果蝇3种microRNA表达量被引量：3
2011年
采用RNA加尾和引物延伸real time PCR法实时定量检测了黑腹果蝇Drosophila melanogaster的bantam、mir-14、mir-2a共3种microRNA（miRNA）在各发育阶段组织中的相对表达情况,发现3种miRNA在不同发育时期的表达差异明显,其表达变化规律与文献报道基本一致,验证了该法的可靠性.这种＂加尾和引物延伸＂方法,仅需1~10 ng总RNA或等同物,检测范围可达7个数量级,为昆虫miRNA研究提供了可靠的定量检测方法.
戚晓娴李晓梅陈永钟国华
关键词：黑腹果蝇MICRORNA
斜纹夜蛾铁硫亚基蛋白的表达及功能鉴定
2012年
铁硫亚基蛋白(rieske iron-sulfur protein,RISP)是线粒体复合物Ⅲ的关键蛋白亚基之一,在呼吸链电子传递过程中起到重要作用。本研究通过RT-PCR克隆得到斜纹夜蛾Spodoptera litura RISP基因SlitRISP的ORF,构建了pET32a-SlitRISP原核表达载体,SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,SlitRISP原核表达蛋白以包涵体的形式存在于菌体沉淀中,且RISP抗体可成功用于该蛋白的免疫印迹检测。为了进一步鉴定SlitRISP在斜纹夜蛾离体细胞系SL-1中的功能,通过向细胞内转染siRNA,利用RNAi技术沉默SL-1中的SlitRISP。qRT-PCR结果表明,分别经50nmol/L和100nmol/L siRNA处理48h后,SL-1中SlitRISP的表达均几乎完全被抑制;Western blot结果显示,SL-1中SlitRISP含量显著低于CK。当SL-1SlitRISP被成功沉默后,通过检测SL-1线粒体膜电位、细胞ATP含量和细胞增殖抑制率鉴定RISP在线粒体电子传递过程中的重要作用。流式细胞仪测定结果表明,经50nmol/L和100nmol/LsiRNA处理24h后,SL-1线粒体膜电位相对于CK分别降低23.52%和11.32%,而处理48h后,SL-1线粒体膜电位则分别升高5.58%和27.66%;siRNA处理24h和48h后,SL-1ATP含量相对于CK分别降低82.71%和84.50%,最终导致SL-1细胞增殖抑制率分别为53.64%和67.94%。这些结果表明SlitRISP在SL-1中参与线粒体膜电位的形成和细胞ATP的合成。介于RISP在线粒体电子传递链中的重要作用,其可能成为新型杀虫作用靶标,这可为研制新型呼吸抑制剂提供参考。
左洪亮陈永高璐刘海远钟国华
关键词：斜纹夜蛾原核表达蛋白功能
RNAi作用机制及其在害虫防治领域的应用前景
RNA干扰（RNA interference,RNAi）是近几年得到迅速发展的一项抑制基因表达的技术。RNAi能够切割特定信使RNA引起转录后基因沉默,从而抑制特定基因的表达,成为基因功能研究的新方法。近年来,RNAi导...
左洪亮李海怡高璐钟国华
关键词：RNAI基因沉默害虫防治
文献传递
印楝素诱导黑腹果蝇复眼发育异常的形态学研究
2012年
将果蝇置于含印楝素2 mg/kg的昆虫培养基中产卵,待卵孵化发育至不同虫态,运用光学显微镜及扫描电镜研究果蝇新羽化成虫复眼外观,发现复眼明显萎缩并呈现不规则状,表面粗糙,出现异常凹陷,刚毛缺失或增生,排列不规则或弯曲;运用透射电镜研究复眼超微结构,结果表明,3龄末期幼虫复眼组织细胞中染色质高度聚集成小体、小体分散,吞噬泡数量明显增多,核膜皱缩、界限模糊,蛹和新羽化成虫复眼中感光细胞丢失.这些结果确证了印楝素诱导果蝇复眼发育异常,为寻找新型昆虫生长发育调节剂提供了可能的新靶标.
李海怡任太军刘海远钟国华
关键词：印楝素黑腹果蝇复眼发育异常
印楝素诱导Sf-9细胞凋亡的线粒体信号途径研究
线粒体是动物细胞生成ATP的主要细胞器,大量研究表明,线粒体途径是细胞凋亡信号转导的核心途径。但其调控机制在昆虫与哺乳动物之间,甚至在不同类属昆虫之间(果蝇属和鳞翅目昆虫)都存在很大的差异,凋亡体的形成是否依赖线粒体释放...
黄劲飞刘海远胡美英钟国华
关键词：印楝素喜树碱细胞凋亡信号转导线粒体
文献传递
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