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可降解大豆过敏原蛋白酶的纯化与酶学性质被引量：1: 2016年; 将前期筛选获得的芽孢杆菌Bacillus sp.BBE201108发酵培养后,以其发酵上清液作为蛋白酶的粗酶液,经硫酸铵分级沉淀、透析除盐、Q FF阴离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析,蛋白酶的比酶活达到2 575.45 U/mg,纯化倍数为10.55,回收率为6.48%,经SDS-PAGE电泳显示为单一条带,该蛋白酶的表观相对分子质量约为46 000。该酶与大豆分离蛋白在p H8.0,50℃下反应30 min,可有效降解β-伴大豆球蛋白的α亚基和α＇亚基。在p H 7.0-9.0以及30-40℃下的稳定较好;Ca2＋存在的情况下,酶活提高了5%左右,而Mn2＋、Fe2＋和Cu2＋在不同程度上对该蛋白酶有抑制作用;苯甲基磺酰氟（PMSF）对该蛋白酶的抑制作用较为显著。酶学性质分析表明,该蛋白酶的Km为4.19 g/L,Vmax为4.04 g/（L·s）,Kcat为107.73 s-1,Kcat/Km为25.71 L/（g·s）。; 付欧张娟堵国成陈坚; 关键词：芽孢杆菌蛋白酶分离纯化酶学性质

大豆主要过敏原Gly m Bd 30K抗原决定簇表征预测研究被引量：6: 2012年; 本文应用生物信息学技术,通过使用三种软件SOPMA、Swiss-model和DNAStar来预测大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的抗原表位,结果发现80-85、103-106、217-220、355-360这四段氨基酸残基序列是可能的抗原表位,为后续的蛋白表位实验提供了依据,大大提高了工作效率。; 单晓红孙秀兰管露张银志尤继明李红梅; 关键词：GLY M BD 抗原表位生物信息学

牛奶α-乳白蛋白基因实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3: 2015年; 采用Taqman探针技术,建立食品中牛奶过敏原α-乳白蛋白基因的实时荧光定量PCR检测方法。根据α-乳白蛋白基因序列设计特异性引物及Taqman探针进行PCR扩增,构建质粒,经酶切鉴定测序后,建立拷贝数（copies）-Ct标准曲线。成功克隆α-乳白蛋白目的基因,建立的标准曲线在1.12×10^3-1.12×10^8 copies范围内线性关系良好,灵敏度高,液体样品检测限达到1 000copies/mL,特异性强,稳定性好。该法可用于实际商品中牛奶过敏原α-乳白蛋白组分的定量检测。; 贾敏张亦凡张银志孙秀兰; 关键词：牛奶 Α-乳白蛋白

食品中牛奶过敏原成分LAMP检测方法的建立被引量：5: 2014年; 目的建立食品过敏原牛奶成分LAMP(loop-mediated isothermal amplification)检测方法,并与实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法比对。方法针对牛线粒体细胞色素b(cyt-b)基因设计LAMP引物并建立反应体系,在特异性和灵敏度方面与real-time PCR检测方法比对。结果本研究建立的LAMP方法检测9份不同品牌的牛奶和羊奶及其加工制品,没有出现交叉反应,具有良好的特异性。该方法的检测灵敏度为0.5%,与real-time PCR方法检测灵敏度相当。检测了69份实际样品,检测结果与real-time PCR检测结果一致。结论本研究建立的食品过敏原牛奶成分LAMP检测方法简单经济,检测结果可靠,可有效缩短检测时间,适用于过敏原牛奶成分的检测,具有良好的应用前景。; 程晋霞曾静马丹魏海燕张海予; 关键词：牛奶实时荧光PCR

LAMP法检测食品中开心果过敏原成分被引量：15: 2013年; 为建立食品中开心果过敏原成分的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,根据GenBank中公布的开心果过敏原2S种子贮存蛋白基因序列设计合成LAMP引物,筛选最佳引物并对其内引物浓度进行优化。以开心果、腰果、胡桃等坚果类以及大米、玉米、大豆等常见农产品验证该方法的特异性,将开心果DNA进行梯度稀释以验证方法的检测低限,并以小麦为基质配制模拟添加样品测试方法的相对灵敏度。结果表明:该方法能够特异性检测食品中的开心果成分,对开心果基因组DNA的检测限为0.2ng,食品中开心果成分相对检测灵敏度低于0.1%(m/m),通过在反应终产物中加入SYBR GreenⅠ,可用肉眼判断检测结果,LAMP检测时间不超过60min。该方法快速准确,不依赖复杂昂贵的检测仪器,可应用于过敏原开心果成分的快速检测。; 刘昊黄文胜邓婷婷傅凯鞠兴荣陈颖; 关键词：开心果环介导等温扩增

不同酶处理对鸡蛋清中卵白蛋白致敏性的影响被引量：4: 2012年; 选取了木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和动物蛋白水解酶,并利用单因素实验,以水解度为指标,确定各种蛋白酶对蛋清蛋白最佳的酶解工艺参数。在此基础上,对蛋清蛋白进行水解,通过SDS-PAGE和间接竞争ELISA检测各蛋白酶蛋清水解液,比较各蛋白酶对蛋清中卵白蛋白抗原性降低效果。SDS-PAGE结果显示木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和动物水解蛋白酶对卵白蛋白的降解效果较明显,胰蛋白酶和风味蛋白酶的降解效果不明显;间接竞争ELISA检测结果表明,木瓜蛋白酶和中性蛋白酶对卵白蛋白抗原性的降低作用更有效,分别达到了57.8%和49.6%,其他几种酶都在30%左右。因此可以选用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶对研究开发脱敏鸡蛋食品做进一步研究。; 毕井辉汪何雅钱和黄颖; 关键词：蛋白酶水解鸡蛋清卵白蛋白间接竞争ELISA

蛋白质标准物质的制备概况被引量：3: 2014年; 标准物质一直是国内外标准化组织研究的重要内容,本文主要根据国际标准化组织ISO导则35及JJF 1006-1994《一级标准物质技术规范》简述了蛋白质标准物质的制备流程。蛋白质标准物质的特殊性在于,其生物学特性易受环境影响,故其理化性质及生物学性质都需要进行表征。本文概述了目前常用的蛋白质标准物质性质表征方法和技术体系。此外,通过对蛋白质标准物质的均匀性和稳定性评价,以及对蛋白质标准物质进行定值,并评估其不确定度,方可实现蛋白质检测数据的可溯源性。; 邱昌将周桐吴志华李雯莹周煌连君廖志勇陈红兵; 关键词：蛋白质标准物质

食物蛋白致敏成分检测技术研究进展被引量：7: 2014年; 食物过敏是指所摄入的食物中某种组成成分(主要为蛋白质)作为抗原诱导机体产生免疫应答而发生的一种变态反应疾病。食物致敏蛋白的快速高效检出已成为目前食品行业关注的重点。本文介绍了食物致敏原致敏机制,体内、体内检测技术的最新研究进展,并对各种检测技术的优缺点进行了深入分析。在此基础上,对食物蛋白致敏成分检测技术的发展趋势进行了展望,以期为致敏蛋白的深入研究提供参考。; 诸葛洁婧潘家荣; 关键词：食物过敏致敏蛋白免疫学检测

静电纺丝技术制备聚苯乙烯/石墨烯复合纳米纤维被引量：7: 2012年; 通过静电纺丝技术制备了聚苯乙烯/石墨烯复合纳米纤维膜,利用扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱、粉末X-射线衍射和激光拉曼光谱等技术对所制备的纤维膜结构和组成进行表征,并通过电化学法考察该复合纳米纤维膜的电活性。结果表明,石墨烯已掺杂到聚苯乙烯纤维中。与聚苯乙烯纤维膜相比,聚苯乙烯/石墨烯复合纳米纤维膜导电性能增强,表明本实验成功实现了对聚苯乙烯纤维的改性。; 庞月红李朝霞沈晓芳钱和; 关键词：静电纺丝石墨烯聚苯乙烯纳米纤维电化学传感

基于生物技术控制大豆过敏原的研究进展被引量：7: 2014年; 大豆富含优质的蛋白质,具有很高的营养价值;同时,大豆也是公认的八大主要过敏食物之一。大豆中的主要过敏原包括大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白以及7S球蛋白组分中两个低丰度蛋白Gly m Bd 28K和Gly m Bd 30K等。迄今为止,生物育种、酶法改性和微生物发酵等生物技术是控制大豆过敏原致敏性的重要手段,同时这些方法还能改善大豆及其制品的功能特性。其中,生物育种是一种从根源上去除大豆过敏原蛋白的方法;酶法改性操作简便、条件温和,具有非常广泛的研究前景;而微生物发酵则是一种较为成熟的生产脱敏大豆蛋白制品的方法。; 龚育清杨安树陈红兵祖琴琴; 关键词：生物育种技术酶法改性微生物发酵

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国家科技支撑计划(2011BAK10B03)

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