国家自然科学基金(30971939)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位的影响及其与钠通道的关系被引量：2
- 2010年
- 目的 研究脱氧鬼臼毒素（deoxypodophyllotoxin,DOP）对美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位的影响及其与钠通道的关系.方法 分别用终浓度为1、5、25、125μmol/L的DOP作用于荧光染料DiBAC4（3）标记的美洲大蠊背侧不成对中间神经元,在激光共聚焦显微镜上检测神经元膜电位的实时动态变化,并观察钠通道阻断剂河豚毒素（tetrodotoxin,TTX）对DOP膜电位效应的影响.结果 加入DOP后美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位呈去极化改变,5 min后达到最大水平,8 min内趋于稳定.1、5、25、125 μmol/L的DOP作用5 min后,所测得的荧光强度值分别为69.6±3.0、72.1±2.7、77.8±3.6、86.2±3.1,DOP处理组和空白对照组相比,差异均有统计学意义（P＜0.01）.1μmol/L TTX与美洲大蠊背侧不成对中间神经元共孵育20 min后再加入25 μmol/L DOP,神经元内荧光强度与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,说明钠通道是DOP的作用靶标,DOP的膜电位效应可被TFX完全抑制.结论 DOP可引起美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位去极化,且其效应在1～125 μmol/L范围内随浓度增加而增大,钠通道可能参与了这一过程.
- 孙芹许鹏王立山胡凡程洁肖杭高蓉
- 关键词：中间神经元膜电位钠通道
- 脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊乙酰胆碱受体信号通路分子mRNA表达水平的影响
- 目的 探讨脱氧鬼臼毒素(DOP)对美洲大蠊Periplaneta americana神经系统乙酰胆碱受体信号通路的影响.方法 从美洲大蠊头部克隆乙酰胆碱受体信号通路上的关键信号分子nAChRα6亚基、CaM和CaMK Ⅱ...
- 李艳王立山刘景丽王军肖杭高蓉
- 关键词：美洲大蠊实时荧光定量PCR信号分子
- 脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊乙酰胆碱受体信号通路分子mRNA表达水平的影响
- 2013年
- 【目的】探讨脱氧鬼臼毒素（deoxyopodophyllotoxin， DOP）对美洲大蠊Periplaneta americana神经系统乙酰胆碱受体信号通路的影响。【方法】从美洲大蠊头部克隆乙酰胆碱受体信号通路上的关键信号分子nAChR α6亚基、 CaM和 CaMKⅡ的部分mRNA， 并测定其序列。应用荧光定量PCR技术分别观察注射不同浓度（10， 45， 80， 115和150 μg/μL） DOP 24和48 h后上述3种基因表达水平的变化。【结果】测序结果显示， 克隆出的美洲大蠊nAChR基因部分序列（539 bp）与赤拟谷盗Tribolium castaneum nAChR α6亚基基因的核苷酸序列一致性为84%； 美洲大蠊CaM基因（435 bp）与雕叶蝉Graphocephala atropunctata CaM基因的核苷酸序列一致性为85%； 美洲大蠊CaMKⅡ基因（513 bp）与黑腹果蝇Drosophila melanogaster CaMKⅡ基因的核苷酸一致性为77%。实时定量荧光PCR实验表明： DOP处理48 h后对美洲大蠊nAChR α6亚基、 CaM和CaMKII基因表达水平大体表现出低剂量激活， 高剂量抑制的特点。45~80 μg/μL DOP浓度范围内3种基因表达水平达到高峰， 80~150 μg/μL 浓度范围内表现为抑制作用， 基因表达水平呈下降趋势。【结论】DOP需要在美洲大蠊体内蓄积一定时间才有明显的作用， 能与nAChR结合引起CaM-CaMKⅡ级联反应， 使3种基因的表达在低浓度组上调、 高浓度组被抑制， 进而对美洲大蠊产生潜在的毒杀作用。
- 李艳王立山刘景丽王军程洁高聪芬肖杭高蓉
- 关键词：美洲大蠊实时荧光定量PCR信号分子
