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欧洲葡萄体胚诱导及农杆菌介导的遗传转化研究被引量：1: 2012年; 以欧洲葡萄(Vitis vinifera L.)品种"无核白"(‘Thompson Seedless’)、"佳利酿"(‘Carignane’)、"红地球"(‘Red Globe’)的雄蕊、雌蕊和花蕾为外植体,对花器官体细胞胚诱导及农杆菌介导的转芪合成酶基因进行研究。结果表明:所采用的5种胚性愈伤组织诱导培养基中,MC培养基较适于雄蕊胚性愈伤组织的诱导,"无核白"、"佳利酿"和"红地球"雄蕊的胚性愈伤组织诱导率分别为1.7%、0.3%和11.8%;PIV培养基可诱导"无核白"和"佳利酿"雌蕊胚性愈伤组织形成,诱导率分别为4.0%和3.2%,而"红地球"雌蕊在MC培养基上诱导率最高,达5.6%;仅"红地球"的花蕾在MS1培养基上可诱导产生胚性愈伤组织,诱导率为0.5%。改良X6液体培养基较有利于次生胚的诱导;B培养基有利于体细胞胚萌发成苗。转基因材料经抗性筛选和植株再生,获得了2株"无核白"抗性苗,经PCR和PCR-Southern检测表明,目的基因被整合到转基因植株中。; 谭超张剑侠王跃进; 关键词：葡萄花器官体细胞胚植株再生转基因

中国野生华东葡萄芪合成酶基因启动子转化番茄的研究: 2013年; 中国野生华东葡萄"白河-35-1"中的芪合成酶基因启动子被证明具有病原菌和胁迫诱导表达活性。现将芪合成酶基因置于增添不同增强子的该启动子下,构建4个植物表达载体,通过农杆菌介导法进行了转化番茄的研究,并对转基因株系抗番茄灰霉病表现及其白藜芦醇含量变化进行了测定。结果表明:经PCR-Southern鉴定,获得转基因株系4个共54株;不同载体转化的番茄株系对灰霉病抗性均高于野生型,但抗性存在差异;添加增强元件enhancer启动子启动的芪合成酶基因表达的番茄株系,可使白藜芦醇含量提高4.4倍。; 肖宇张剑侠周起谢晓青朱自果王跃进; 关键词：中国野生葡萄启动子增强子转基因番茄

葡萄花器官体细胞胚的诱导和植株再生被引量：7: 2011年; 通过探索感病葡萄体细胞胚发生途径建立再生体系,为葡萄抗病基因转化提供受体材料与理论依据。通过对小孢子显微观察确定最佳取样时期,取雌蕊、雄蕊和小花蕾作为外植体,用2种消毒方法消毒后,对比污染率,接种于4种不同的愈伤诱导培养基中,将诱导出的愈伤全部转移到体胚诱导培养基中,对体胚的不同发育时期进行观察,并比较4种不同培养基对次生胚诱导的效果。将体细胞胚置于成苗培养基中,在强光和弱光2种条件下培养,统计成苗率。结果表明,培养基PIV和培养基MSI有利于愈伤诱导,X6培养基是体细胞胚和次生胚诱导最适合培养基,WPM+0.15 mg.L-1 IBA最适合体细胞胚成苗,暗光培养3 d能提高成苗率。; 肖宇张朝红支玉玺徐炎李志谦王跃进; 关键词：葡萄花器官体细胞胚植株再生

华东野生葡萄果皮中白藜芦醇的提取及其抗氧化活性分析被引量：3: 2011年; 目的:分析中国野生华东葡萄(V.pseudoreticulata)白河-35-1株系成熟果皮中白藜芦醇含量及其抗氧化活性。方法:采用超声波法提取样品中的白藜芦醇,HPLC法检测其中反式结构物质的浓度,并分析其对DPPH·、·OH、O2-·3种自由基的清除能力和Res抗ONOO-断裂DNA的能力。结果:成熟果皮中白藜芦醇含量为138.4μg/g。在一定浓度范围内,其抗氧化能力随浓度的增加而加强。结论:多次重复超声处理有助于提取果皮中的白藜芦醇。此野生葡萄株系成熟果皮中白藜芦醇含量相对其它鲜食和酿酒葡萄明显偏高,抗氧化活性强,具有极高的开发应用价值。; 刘林丽王跃进; 关键词：白藜芦醇抗氧化活性

中国野生华东葡萄抗白粉病相关基因(VpUSP)克隆及表达分析被引量：3: 2011年; 根据从本课题组前期构建的中国野生葡萄华东葡萄株系白河-35-1在白粉病诱导下的cDNA文库中获得的1条与抗白粉病相关的EST序列,设计特异引物,结合RACE(Rapid-amplrfication of cDNA ends)技术克隆了中国野生华东葡萄白河-35-1广泛逆境蛋白基因(Universal stress protein,USP)全长序列。该基因全长836 bp,编码175个氨基酸,GenBank登录号为GU946975。进一步研究该基因在白粉菌诱导下的相对表达水平,我们通过半定量RT-PCR技术,研究了VpUSP在中国野生华东葡萄抗病、感病株系中的表达变化,结果表明,广泛逆境蛋白在中国野生华东葡萄感病株系中,接种白粉病前后均有表达,但表达量变化不明显;然而,抗病的中国野生华东葡萄株系在接种白粉病后VpUSP基因表达量呈明显的增加趋势,初步表明中国野生华东葡萄VpUSP基因在与白粉病菌互作过程中具有表达活性。; 赵莘朱自果徐炎张朝红王跃进; 关键词：中国野生葡萄葡萄白粉病

中国野生毛葡萄芪合成酶基因克隆及表达分析被引量：3: 2012年; 采用RT-PCR技术克隆中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因,命名为VqDSTS1,并进行序列及表达模式分析.结果表明:VqDSTS1基因cDNA编码区全长为1 179bp,GenBank登录号为JQ342086,编码392个氨基酸;氨基酸序列分析表明,VqDSTS1含有芪合成酶基因家簇的特征识别序列‘IPNSAGAIAGN’和‘GVLFGFG-PGLT’;序列比对显示,VqDSTS1与其他葡萄种质的芪合成酶氨基酸序列一致性在95.2%～98.7%之间;半定量RT-PCR分析表明,VqDSTS1受白粉病诱导表达,呈双峰模式.为进一步研究中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因家族的表达及功能分析提供了基础.; 曹江玲贺明阳朱自果王跃进; 关键词：白藜芦醇

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国家自然科学基金(30971972)