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黑蚂蚁纤溶活性蛋白的分离纯化及其性质研究被引量：5: 2015年; 通过硫酸铵分段盐析、DEAE-52离子交换和Sephacryl S-100分子筛层析从黑蚂蚁（Polyrhachis vicina Roger）中纯化到一种纤溶活性蛋白,再通过SDS-PAGE凝胶电泳测定其分子质量,Braford法测定蛋白浓度,蒽酮硫酸法测定其含糖量,纤维蛋白平板法测定其酶活性。并研究温度、pH改变及不同金属离子对其活性的影响。结果显示,分离得到的活性蛋白具有纤溶活性,其分子质量约为25 kD,蛋白浓度为2.8041 mg/mL,糖含量为8.171 4%,酶活力为67.455 2 U/g。研究表明,该活性蛋白最适温度为45℃,最适pH为3.0,pH在4.0-8.0基本稳定,Na^＋、K^＋对其酶活性影响较小,Mg^2＋对该酶纤溶活性有强烈的激活作用,而Zn^2＋、Ba^2＋、Mn^2＋、Ca^2＋等对此酶活力有没明显的抑制作用。; 冼永权谭竹钧韩雅莉; 关键词：分离纯化纤溶活性

薇甘菊叶的总黄酮提取及抑菌活性研究被引量：3: 2014年; 以总黄酮提取率为考察指标,采用超声波辅助提取薇甘菊叶中的总黄酮,并采用正交设计试验优化薇甘菊叶的总黄酮提取工艺.通过体外抑菌实验,利用打孔法和试管法分别测定了其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺菌这4种常见细菌的抑菌活性和最低抑菌浓度(MIC).结果表明,叶中总黄酮最佳提取条件为乙醇体积分数50%、料液比1∶30、超声功率50 W、超声时间50 min,此条件下黄酮得率为10.62%;薇甘菊叶的黄酮提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺菌均有良好的抑菌活性,其最低抑菌浓度分别为1.562 5、1.562 5、3.125 0、3.125 0 mg/mL(以黄酮质量浓度计).; 张敏韩雅莉; 关键词：超声波辅助提取抑菌活性

地鳖虫活性蛋白对人舌癌细胞Tea-8113的抑制作用被引量：11: 2009年; 目的研究地鳖虫蛋白对人舌癌细胞Tea-8113增殖的抑制作用,探索地鳖虫蛋白质的抗肿瘤活性。方法采用MTT法测定地鳖虫蛋白质对人舌癌细胞Tea-8113增殖的抑制效果。结果地鳖虫蛋白质在体外能显著抑制人舌癌细胞Tea-8113的增殖,药物浓度0.0902 g.ml-1,药物作用72 h抑制率最高,达到92.96%,并呈现明显的药物剂量依赖关系。结论地鳖虫蛋白质有较强的体外抗肿瘤活性。; 张东梅李穗晶韩雅莉; 关键词：MTT法抗肿瘤活性

黄黑小斑蝥纤溶活性蛋白分离纯化及性质研究被引量：1: 2012年; 目的以药用斑蝥(Mylabris)为原料,从其中分离纯化得到一种具有纤溶性的蛋白MFP(Fibrinolyric Protein of Myla-bris)。方法采用硫酸铵分段盐分、透析和DEAE-32纤维素离子交换层析等纯化方法进行分离纯化,SDS-PAGE电泳测定其分子量,纤维蛋白平板法测定其纤溶活性。结果该目的蛋白相对分子质量约为95.5 kD,其水解纤维蛋白的相对比活力为14.7 u/mg;该成分在35℃下最稳定,65℃及以上活性丧失,金属离子K+,Na+对其活力无影响,Mn2+,Ca2+对其有明显抑制作用,最适pH为6.0。结论研究分离出的斑蝥活性蛋白确为一种具有纤溶性的蛋白组分,并证明其纤溶作用机理为纤溶酶原激活;体外溶栓实验表明,其对血栓的溶解具有一定作用;溶血实验结果表明,该纤溶活性蛋白溶液无溶血反应。; 汪威韩雅莉吴艳玲谭竹钧孙建平代春迎; 关键词：斑蝥分离纯化

地鳖虫纤溶活性蛋白组分的提取及对肿瘤细胞的抑制作用被引量：17: 2007年; 目的探讨地鳖虫纤溶活性蛋白组分的提取及对肿瘤细胞的抑制作用。方法使用硫酸铵沉淀、DEAE离子交换层析和SephadexG75凝胶层析的方法，从地鳖虫体内提取出纤溶活性蛋白并检测其活性，研究其体外抗肿瘤的作用；并通过噻唑蓝（MTT）法和流式细胞术检测地鳖虫纤溶活性蛋白对2种肿瘤细胞（人食管癌细胞株Eca109和人宫颈癌细胞株HeLa）的增殖抑制及周期的影响。结果（1）地鳖虫体内存在具有纤溶活性的纤溶活性蛋白；（2）地鳖虫纤溶活性蛋白对肿瘤细胞的增殖抑制率与剂量和时间密切相关；（3）随着地鳖虫纤溶活性蛋白浓度的增加，G1期细胞数量明显减少，G2／M期的细胞数量有所增加。结论地鳖虫纤溶活性蛋白具有体外抑制肿瘤细胞的作用。; 林静华吴映娥蔡应木李兴暖韩雅莉; 关键词：蜚蠊目蛋白质类抗肿瘤药

丙烯酸、丙烯醇、乙烯基咪唑三元共聚物的合成被引量：1: 2012年; 通过沉淀聚合的方法,采用偶氮二异丁基腈为引发剂,将乙烯基咪唑、丙烯酸、丙烯醇三元共聚,制备了一种具有类似于纤溶酶生物活性的新型高分子。探讨了合成条件对聚合过程、黏度及分子量的影响,并对利用红外光谱(IR)和核磁共振(NMR)对该共聚物进行了结构表征。纤维蛋白平板实验证实该共聚物能溶解血栓。; 余磊韩雅莉张卫丽; 关键词：丙烯酸丙烯醇三元共聚物

地鳖虫纤溶酶的三维结构模拟与序列分析被引量：3: 2014年; 为了研究地鳖虫(Eupolyphage sinensis Walker)纤溶酶的溶栓机理,根据地鳖虫纤溶酶成熟肽编码序列,利用生物信息学方法,对地鳖虫纤溶酶进行了结构分析,用Biosun软件的同源模建技术,模拟了其三维结构。利用GOLDKEY软件,对地鳖虫纤溶酶的氨基酸序列进行了分析,讨论了其等电点、亲水性、柔性与催化活性之间的关系。结果表明,地鳖虫纤溶酶的活性中心是组氨酸、丝氨酸和天冬氨酸3个氨基酸残基,位于球蛋白中心凹穴处,底物结合部位是丝氨酸、天冬氨酸和甘氨酸,该类酶水解纤维蛋白的机理是催化精氨酸-赖氨酸之间的肽键水解。; 余磊韩雅莉; 关键词：SINENSIS 纤溶酶

地鳖纤溶蛋白对荷S_(180)和H_(22)小鼠的抑瘤作用研究被引量：8: 2010年; 目的研究地鳖虫纤溶活性先导蛋白(EFP)对荷S180和H22小鼠肿瘤的抑制作用。方法通过体外实验,构建荷瘤小鼠模型,药物实验分为阳性对照组(环磷酰胺),阴性对照组(生理盐水),药物高浓度组、中浓度组和低浓度组。实体瘤通过瘤重计算抑瘤率,腹水瘤通过细胞浓度计算抑瘤率。结果 EFP对S180腹水瘤有较好的抑制率,药剂量为2.90mg/kg的抑制率为69.56%,明显高于环磷酰胺(20mg/kg)的51.75%的抑制率;EFP对S180实体瘤有较好抑制作用,药剂浓度为1.45g/kg时,抑制率为37.48%,高于环磷酰胺(20mg/kg)的35.59%的抑制率,并呈现一定的药物剂量依赖性;药剂浓度为0.73mg/kg时,对H22实体瘤抑瘤率为41%,高于环磷酰胺(20mg/kg)的37%的抑制率。结论 EFP对荷S180和H22小鼠肿瘤有较好的抑制作用。; 刘浩韩雅莉丁鸿黎子蔚; 关键词：S180细胞 H22细胞抑瘤作用

地鳖纤溶蛋白对人脐静脉内皮细胞、肺癌、乳腺癌细胞VEGF和bFGF表达的影响被引量：8: 2011年; 目的研究地鳖纤溶蛋白(EFP)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人肺癌(A549)、乳腺癌(MCF-7)细胞分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法采用含药血清体外培养人脐静脉内皮细胞、肺癌、乳腺癌细胞,通过MTT法和双抗夹心酶联免疫吸附分析法(ELISA)观察地鳖纤溶蛋白对细胞的体外增殖和分泌VEGF和bFGF的影响。结果 EFP含药血清对人脐静脉内皮细胞、肺癌、乳腺癌细胞有显著抑制作用,ELISA法检测结果表明EFP含药血清对人脐静脉内皮细胞、肺癌、乳腺癌细胞的VEGF和bFGF表达均有抑制作用。结论 EFP可抑制肿瘤细胞VEGF和bFGF表达。; 曹付春韩雅莉陈冰黄明星丁鸿余磊叶韵; 关键词：A549细胞 MCF-7细胞 VEGF BFGF

黄粉虫纤溶活性蛋白免疫原性与抗血栓作用的研究被引量：6: 2015年; 为了研究黄粉虫纤溶活性蛋白(Tenebrio Fibrinolytic Proteins,TFP)的免疫原性及其抗血栓作用,本研究将纯化的TFP经皮下注射免疫小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中的抗体含量及抗体效价;小鼠灌胃TFP后,取血浆检测凝血酶时间(thrombin time,TT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,t-PA)和其抑制物(plasminogen activator inhibitor,PAI),角叉菜胶使小鼠尾部形成血栓,测量血栓形成长度.结果显示,TFP免疫小鼠后产生特异性抗体且随着免疫次数的增加,抗体含量逐渐升高,末次免疫后产生的抗体效价为1∶640;TFP可以显著延长TT,增强t-PA的活性,抑制PAI的活性,同时显著抑制由角叉菜胶引起的小鼠尾部血栓的形成.这说明TFP具有良好的免疫原性且具有一定的抗血栓作用.; 张冰谭竹钧; 关键词：黄粉虫免疫原性抗血栓

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