国家高技术研究发展计划(2003AA223061)
- 作品数：11 被引量：110H指数：5
- 相关作者：许国旺杨凌江平李燕王永华更多>>
- 相关机构：中国科学院大连理工大学中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国科学院知识创新工程国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学理学医药卫生更多>>
- 毛细管电泳单细胞分析方法及应用进展被引量：4
- 2004年
- 本文对毛细管电泳用于单个细胞分析的方法及应用进行综述。较系统地论述了毛细管电泳分析时单个细胞取样、溶膜、衍生和检测的方法,以及应用新进展。
- 翁前锋许国旺
- 关键词：毛细管电泳
- 反相高效液相色谱法测定血浆中的辅酶Q_(10)被引量：4
- 2003年
- 建立了一种检测血浆中辅酶Q10含量的高效液相色谱法。血浆经甲醇脱脂蛋白后,以正己烷萃取,萃取液依次经硅胶柱净化、C18柱固相萃取,再进行高效液相色谱分析。色谱柱为HypersilODS2柱(5μm,150mm×4 6mmi d ),以异丙醇 甲醇(体积比为45∶55)溶液作流动相,辅酶Q9作内标,检测波长为275nm。在0 1～50 0mg/L质量浓度范围内,辅酶Q10与辅酶Q9的峰面积比与相应CoQ10的质量浓度呈良好的线性关系(r2=0 999),血浆中辅酶Q10的检测限为0 03mg/L(S/N=3),加标回收率为96%～98%,方法重现性好(RSD<3%)。用此法测定正常人血浆中辅酶Q10的含量水平,结果令人满意。
- 江平辛剑郑育芳吴美慧许国旺
- 关键词：反相高效液相色谱法血浆辅酶Q10固相萃取疾病诊断
- 细胞色素P450酶系的异源表达研究被引量：13
- 2006年
- 传统的药物代谢主要以实验动物为对象进行药物早期及临床研究,近几年来,结合生物化学与分子生物学的发展,药物早期代谢研究进入到药物体外代谢的研究阶段,主要围绕人肝内参与代谢的细胞色素P450家族展开.本文就近年来对此家族酶的异源表达及其在药物代谢中的应用进行了综述.
- 程婕龚毅杨凌
- 关键词：异源表达药物筛选
- 代谢组学及其应用被引量：66
- 2005年
- 对代谢组学的概念、特性、发展历史做了简要介绍 ,综述了当前代谢组学研究中的数据采集、数据分析中采用的技术 ,及代谢组学在疾病诊断、药物毒性研究、植物和微生物等领域的应用 ,并对代谢组学的发展作了展望。
- 杨军宋硕林Jose Castro PerezRobert S.Plumb许国旺
- 关键词：代谢组学指纹分析
- 生物制药研究中的多维色谱被引量：6
- 2005年
- 对全二维气相色谱(GC×GC)、全二维液相色谱(HPLC×HPLC)、多维毛细管电泳等多维分离技术在生物制药研究中的应用进行了综述,其中对作者所在研究组在全二维气相色谱应用于中药及固相萃取 液相色谱联用分析系统等方面的工作做了重点介绍。由所综述的生物制药研究得出结论:多维分离方法以其高分辨、快速、自动化等特点已经在生物制药领域显示出它的巨大优势,并将发挥更大的作用。
- 田晶路鑫杨军孔宏伟王媛赵欣捷唐平苑广志许国旺
- 关键词：色谱联用技术制药
- 基于3D-药效团的P糖蛋白和细胞色素P4503A4的协同作用机理研究被引量：4
- 2006年
- P糖蛋白(P-glycoprotein,Pgp)和细胞色素P4503A4(CYP3A4)是决定药物ADME性质的两个重要蛋白,目前还无法通过实验方法,从分子水平清晰阐明这两个蛋白采取怎样的互补作用机理来降低外来药物的生物利用度.通过3D-药效团模建方法,提取Pgp和CYP3A4的共同底物的特征阐明这两个蛋白可能的协同作用模式.所得的药效团有助于理解药物分子同这两个蛋白的作用模式,同时该模型可以指导新药设计和改造,从而提高药物的生物利用度.
- 李燕王永华杨凌张述伟刘长厚
- 关键词：药效团P-GLYCOPROTEINCYP3A4
- 人细胞色素P450氧化还原酶的克隆表达和抗体的制备
- 2006年
- 细胞色素P450还原酶(CPR)是人细胞色素P450酶系的电子供给者,对后者活性的发挥起到重要作用.本研究将从人胚胎cDNA文库中得到的人CPR的编码基因,连接入pT7450表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达并纯化.每升发酵液可得到纯化蛋白49 mg,占总蛋白含量的10%,以细胞色素C为底物检测酶活性,比活为65 u/mg.利用纯化的CPR作为抗原,常规免疫纯系大耳家兔,获得高效价、高特异性的抗血清,抗体滴度为1∶200 000(ELISA法),纯化后抗体应用于不同组织中CPR含量的评价,证明重组CPR及其抗体可用于细胞色素P450的体外药物代谢及细胞色素P450与CPR作用机理的研究.
- 程婕龚毅陈悦杨凌
- 关键词：克隆抗体药物代谢
- 氨基酸残基延展态可及表面积的预测
- 2007年
- 氨基酸残基的延展态可及表面积(ASA)对预测蛋白质结构和功能起着至关重要的作用.采用偏最小二乘法和多元回归法成功构建了具有较高准确率的预测氨基酸延展态ASA的模型.所得模型具有良好的预测性和可重复性,在模型中,训练集的最优Rt2r可以达到0.998 3,而测试集的Rt2e最优可以达到0.999 2.
- 李艳红王永华李燕杨胜利杨凌
- 关键词：氨基酸偏最小二乘法
- 血浆辅酶Q_(10)的高效液相色谱快速测定被引量：8
- 2006年
- 建立了一种简单快速测定血浆辅酶Q10（CoQ10）的反相高效液相色谱方法。血浆经正丙醇萃取，上层清液直接进样分析。色谱柱为Hypersil ODS2 5μm，150mm×4．6mmi．d．，以异丙醇-甲醇（体积比1：9）作流动相，275nm作检测波长；外标法定量。在0．05—20mg／L范围内，峰高与质量浓度呈良好的线性关系（r=0．9998），血浆中辅酶Q10的检出限为0．03mg／L（S／N=3）。该方法简单、快速、精密度高（RSD〈5％），适宜于血浆辅酶Q10含量的检测。
- 江平何代平许国旺
- 关键词：血浆辅酶Q10高效液相色谱
- 反相高效液相色谱法测定化妆品中辅酶Q_(10)的含量被引量：6
- 2004年
- 建立一种测定化妆品中辅酶Q10含量的反相高效液相色谱方法。样品用异丙醇振荡萃取后,经C18固相萃取小柱净化。以HypersilODS2(5μm,150mm×4.6mmi.d)作分析柱,以辅酶Q9为内标,异丙醇 甲醇(V(异丙醇)∶V(甲醇)=2∶3)作流动相,在波长275nm处进行检测。在0.5～100mg L范围内,峰高比与质量浓度比呈良好的线性关系,化妆品中辅酶Q10的检出限为0.76ng。方法的RSD<5%。
- 江平辛剑郑育芳许国旺
- 关键词：化妆品辅酶Q10反相高效液相色谱
