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钙对半夏生理特性及光合生理的影响被引量：10: 2018年; 分析不同钙浓度处理下半夏叶片生理特性、叶绿素荧光参数及光合生理参数的变化,找出适宜的钙肥施用浓度,为半夏的钙肥合理实施提供参考依据。在全苗期对半夏叶面喷施不同浓度的CaCl2,10d后测定半夏叶片生理生化指标,并测定半夏叶片叶绿素含量、光合作用参数及叶绿素荧光参数。结果表明:钙离子对半夏POD、CAT、SOD三种酶活性有促进作用,600mg/L浓度时三种酶活性最高,丙二醛含量随钙浓度升高而呈现先降后升趋势,在600mg/L浓度时到达最低;600mg/L浓度钙处理明显提高叶绿素含量,同时电子传递速率、光合量子产量、光化学猝灭系数呈先升后降的趋势,而非光化学猝灭系数却呈先降后升趋势;600mg/L Ca2+浓度处理显著提高叶片净光合速率、蒸腾速率,降低胞间二氧化碳浓度;因此,600mg/L Ca2+能提高生理酶活和叶绿素含量,进而促进新陈代谢,改善光合作用。; 汪雷马琛高海立徐涛; 关键词：半夏钙离子生理特性叶绿素荧光光合生理光合作用

降解组测序技术在植物miRNA研究中的应用被引量：15: 2013年; 目前,利用芯片技术和miRNA测序可快速、准确地检测到物种中所含有的miRNA。随着越来越多的miRNA被发现,miRNA靶基因的确定已成为研究miRNA生物学功能的关键。传统的miRNA靶基因的寻找主要依赖生物信息学预测、AGO蛋白免疫共沉淀和荧光素酶法等。随着高通量测序技术的持续革新,出现了一种新的miRNA靶基因的检测方法,即降解组测序(degradome sequencing)法,该方法拥有高通量测序技术、生物信息学分析和RACE验证三者的优势,并已成功应用于拟南芥(Arabidopsis thaliana)、水稻(Oryza sativa)和小立碗藓(Physcomitrella patens)等模式植物miRNA靶基因的检测。基于已发表的相关文献和联川生物降解组测序平台,该文对降解组测序技术应用于植物miRNA靶基因的研究进展及其实验原理进行了综述,同时对运用该技术可进行的更深入研究进行了讨论。; 董淼黄越陈文铎徐涛郎秋蕾; 关键词：高通量测序 MIRNA 靶基因

槲皮素-3-氧-酰基酯的合成及其生物活性: 2018年; 槲皮素是一种具有多种生物活性的黄酮类化合物。以槲皮素为先导物,选择性地对C环3位羟基进行结构修饰。以廉价的芦丁为原料,经苄基化保护、酸水解得到中间体1(7,3',4'-氧-三苄基槲皮素),中间体1与羧酸发生Steglich酯化反应,再经Pd/C催化加氢脱苄基得到7种槲皮素-3-氧-酰基酯,目标产物结构经红外光谱(IR)、1H核磁共振(NMR)、13C NMR、电喷雾-质谱(ESI-MS)确证。采用邻二氮菲法和DPPH法考查7种目标化合物的抗氧化活性,结果显示,槲皮素3位羟基以2~3个碳原子的羧酸取代能提高其抗氧化活性。采用MTT法初步评价了7种目标化合物对人食管癌细胞(EC109)、人食管鳞癌细胞(EC9706)、人胃癌细胞(MGC-803)和人前列腺癌细胞(PC-3)的抑制作用。结果表明,槲皮素3位羟基以7个碳原子以上羧酸取代能显著提高其对MGC-803细胞的抑制作用。; 汪雷马琛高海立徐涛; 关键词：槲皮素抗氧化活性抗肿瘤活性

三叶半夏凝集素C端结构域的可溶表达及其活性研究被引量：2: 2014年; 利用pET-32-SUMO表达载体在大肠杆菌中可溶表达三叶半夏凝集素C端结构域(P-D2),并研究其凝血活性、糖结合特异性以及肿瘤抑制活性。实验结果表明,P-D2蛋白的产量为5mg/L。该蛋白具有凝集小鼠红细胞的活性,可以被D-甘露聚糖抑制,但不能被D-乳糖、D-葡萄糖、D-麦芽糖抑制。P-D2蛋白的体外抗肿瘤活性实验表明其对肝癌细胞Bel-7404以及结肠癌细胞SW-620都有良好的抑制作用。凋亡现象观察实验发现P-D2蛋白可以诱导癌细胞Bel-7404的凋亡。这是首次在大肠杆菌表达系统中表达了可溶的半夏凝集素C端结构域,为其他凝集素的可溶表达提供了新的选择。; 许韶威刘冰颖周炜高永杨支力吕正兵徐涛; 关键词：凝血活性 SUMO 抗肿瘤活性

半夏快速繁殖及乙烯利对其增殖影响被引量：4: 2017年; 半夏快速繁殖培养基为MS+6-BA 3.5 mg·L^(-1);生根培养基为MS+6-BA 3.5 mg·L^(-1)+NAA0.5 mg·L^(-1);在生根培养基中,低强度光照利于半夏组培苗萌发幼芽;高强度光照有利于半夏组培苗幼叶的展开和生长;添加1 000倍商品用乙烯利有利于半夏块茎的膨大和增殖。; 李东海汪雷徐涛; 关键词：半夏快速繁殖乙烯利

pPIC3.5K/Thanatin-(G8S2)-PPA毕赤酵母表达载体的构建和表达被引量：1: 2012年; 将掌叶半夏凝集素和死亡素的融合基因thanatin-linker-ppa定向连接到pPIC3.5K,构建酵母表达载体pPIC3.5K/Thanatin-(G8S2)-PPA并进行序列分析,经SalI单酶切线性化后电转化到GS115毕赤酵母感受态细胞中,PCR鉴定后在含有G418抗性的YPD平板筛选高拷贝重组子。利用甲醇在BMMY培养基中诱导表达融合蛋白,经SDS-PAGE和Western bloting分析显示获得分子量约31kD的融合蛋白,融合蛋白经纯化后MTT分析其抗肿瘤活性,结果显示融合蛋白具有显著的抗肿瘤效果。; 刘学锋吕正兵汪波徐涛; 关键词：MTT

基于高通量测序的半夏变异珠芽转录组分析被引量：1: 2018年; 基于三叶半夏叶基部长珠芽与不长珠芽两个组织转录组测序数据的基础上,筛选和分析出差异表达的基因(differential expressed gene,DEG)。利用高通量测序技术,借助RPKM(reads per kilo base of exon model per million mapped reads)方法计算半夏转录组测序获得的unigene在半夏叶基部长珠芽和不长珠芽中的表达量,根据叶基部长珠芽和不长珠芽之间RPKM的log2倍数绝对值大于1且错误发现率小于0.05筛选DEGs,比对至NR、GO、KEGG等数据库注释,找出参与半夏珠芽激素合成和信号传导过程的DEGs。结果表明,筛选出符合条件的DEG共13 656条,包括6 139条表达上调的DEG和7 517条表达下调的DEG。比对到GO和KEGG数据库,分别获得了4 595和3 551条注释信息。涵盖GO数据库的50个功能亚类和KEGG数据库的239条代谢途径。在挖掘到的31个与半夏珠芽激素合成和信号传导过程的DEG中,6个为上调表达基因,11个为下调表达基因。本文通过转录组测序数据较全面地提供了半夏叶基部长珠芽和不长珠芽基因的差异表达情况,为半夏珠芽功能基因的克隆和功能分析等提供了研究基础和理论依据。; 马琛汪雷叶德徐涛; 关键词：半夏珠芽转录组差异表达基因激素

半夏总蛋白提取及其动态变化研究被引量：4: 2012年; 目的优选出半夏总蛋白提取的最适方法并研究不同生长时期总蛋白量及成分的变化,为半夏药用成分的监控及合理采收提供科学依据。方法采用丙酮沉淀法、95%(NH4)2SO4盐析法、TCA-丙酮法和Tris-饱和酚法提取半夏总蛋白,筛选半夏总蛋白提取的最佳方法。分别于半夏出芽期、全苗期、珠芽期、佛焰苞期及倒苗期采集样品,分为新鲜组和干燥处理组,提取样品总蛋白,进行SDS-PAGE电泳检测及Bradford浓度测定。结果丙酮沉淀法、95%(NH4)2SO4盐析法、TCA-丙酮法和Tris-饱和酚法提取的半夏总蛋白量分别为0.369、0.678、1.082、0.493 mg/mL;新鲜半夏5个不同生长时期总蛋白量占块茎的质量分数分别为出芽期4.53 mg/g、全苗期2.28 mg/g、珠芽期2.79 mg/g、佛焰苞期7.61 mg/g、倒苗期10.21 mg/g;干燥半夏5个不同生长时期总蛋白量占块茎的质量分数分别为出芽期31.85 mg/g、全苗期18.52 mg/g、珠芽期42.08 mg/g、佛焰苞期28.56 mg/g、倒苗期56.84 mg/g;新鲜半夏块茎中蛋白含有15条蛋白带,干燥处理半夏块茎中蛋白含有5条蛋白带。结论 TCA-丙酮法是半夏总蛋白提取的最佳方法,不同生长时期的半夏块茎中蛋白成分各异,倒苗期总蛋白量最高。; 冯瑞娟陈文铎董淼徐涛; 关键词：雷公藤甲素 SGC-7901细胞细胞周期

基于高通量测序半夏珠芽转录组研究被引量：6: 2017年; 利用高通量测序技术,对半夏珠芽和茎进行测序分析,共获得6.5Gb原始数据,122 282 962条有效reads,平均长度为103.84bp。经Denovo组装,获得90 175条unigenes,平均长度为751bp。对长度分布、GC含量、表达水平等方面的评价显示,测序数据质量好且可信度高。将unigenes比对到NR、KOG和GO数据库,分别获得了55 197、46 237和31 622条注释信息。通过分析半夏珠芽和茎的基因表达量,共筛选出19个与玉米素、吲哚乙酸、茉莉酸、脱落酸和赤霉素代谢相关的差异表达基因。基因差异表达分析结果表明:玉米素、生长素、茉莉酸、脱落酸4种激素合成代谢相关基因在半夏珠芽中的表达水平高于茎中,而赤霉素则相反。; 叶德杨支力李东海徐涛; 关键词：半夏珠芽转录组激素

脱病毒半夏中半夏蛋白的含量测定被引量：8: 2011年; 目的测定脱病毒半夏块茎及种植半夏中总蛋白的含量。方法采用Folin-酚法测定半夏块茎中总蛋白含量。结果于波长750 nm处比色,标准曲线线性良好,线性方程为Y=0.001 47 X+0.011 08r,=0.999 4,脱病毒半夏蛋白含量为2.86%。结论 Folin-酚法简便、快速、灵敏度高,可以用于半夏块茎中总蛋白含量的测定。; 田晖冯瑞娟章伟标徐涛; 关键词：蛋白含量

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国家自然科学基金(30772712)

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