浙江省自然科学基金(Y3090503)
- 作品数：4 被引量：27H指数：3
- 相关作者：刘明启戴贤君关荣发白兰芳陈文伟更多>>
- 相关机构：中国计量学院浙江省畜牧技术服务中心上海师范大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省教育厅科研计划杭州市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 黑曲霉内切聚半乳糖醛酸酶A基因在大肠杆菌中的表达及产物酶学性质研究被引量：2
- 2012年
- 采用Trizol法提取黑曲霉(Aspergillus niger JL-15)的总RNA,RT-PCR扩增到黑曲霉内切聚半乳糖醛酸酶A基因(pgaA),pgaA全长1113bp,编码370个氨基酸残基.pgaA经EcoRI和NotI双酶切,定向插入到表达载体pET-32a(+)中,并转化Escherichia coli Rosetta-gami B(DE3),重组子经IPTG诱导,其表达产物(rePGA)果胶酶活性最高为637.0U/mg.酶学性质研究表明,rePGA的最适温度为60℃,热稳定性较差,最适pH为pH 5.0;Ca2+对其活性具有显著促进作用,而Fe3+和Mg2+对其活性具有显著抑制作用;SDS-PGAE结果表明,rePGA的相对分子质量约为40 500Da;rePGA的米氏常数(Km)和最大反应速度(Vmax)分别为4.05mg/mL和39.37μmol/(mL.min),rePGA能快速降低果胶溶液的粘度,符合其内切作用模式特点.
- 刘明启戴贤君白兰芳
- 关键词：黑曲霉克隆酶学性质
- 产果胶酶枯草芽孢杆菌的鉴定、发酵条件优化及产物酶学性质的研究被引量：10
- 2011年
- 以果胶为唯一碳源筛选到1株产果胶酶的菌株JLSP-13,通过菌落形态观察、生理生化指标试验和16SrDNA保守序列分析,鉴定JLSP-13为枯草芽孢杆菌,命名为Bacillus subtilis JLSP-13。采用响应面法(RSM)优化其产酶条件,并系统研究产物酶学性质。结果表明:B.subtilis JLSP-13的最佳发酵时间为25.02 h,添加可溶性淀粉和果胶的最佳浓度分为0.61%和0.042%,B.subtilis JLSP-13果胶酶(BpgA)活性最大预测值达38.8 U/mL,验证值为37.6 U/mL,是基础培养基的2.6倍。BpgA的最适温度为60℃,Tm为82.9℃,其热稳定性较好;最适pH为6.0,在pH 6.0～8.0范围内较稳定;Km和Vmax分别为5.128 mg/mL、12.92 mg(/mL.min),BpgA能快速降低果胶底物的黏度。
- 白兰芳高慧刘明启戴贤君关荣发
- 关键词：果胶酶枯草芽孢杆菌响应面法酶学性质
- 优化米曲霉固体发酵产果胶酶及产物酶学性质被引量：5
- 2010年
- 以麸皮为基质,橘皮粉添加量、氮源、培养基初始含水量和发酵时间为因子,采用响应面法的中心组合设计,对影响米曲霉(Aspergillus oryzaeJL14)固体发酵产果胶酶的条件进行了优化.结果表明,橘皮粉、硫酸铵的最适添加量分别为13.2%和2.3%,初始含水量为63.5%,发酵时间为77.0 h,米曲霉果胶酶产量最大预测值达316.4 U/g发酵产物,实验验证值为310.7 U/g发酵产物,是基础培养基酶产量的3.3倍.该米曲霉果胶酶(PG)的最适温度为50℃,Tm为55.9℃,其热稳定性较差;最适pH为4.0,属于嗜酸性果胶酶,在pH 5.0~8.0范围内稳定性较好,处理1 h后残余酶活均在80%以上.PG的Km和Vmax分别为7.06 mg/mL和62.5μmol-1.min.mL-1.PG能快速降低果胶溶液的黏度.该研究为提高橘皮利用率和酶法生产高品质果胶低聚糖奠定基础.
- 刘明启刘光富戴贤君胡安雨
- 关键词：果胶酶响应面法酶学性质橘皮
