陕西省自然科学基金(200900277)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 相关作者:黄勇梅其炳崔猛牛银波刘广兴更多>>
- 相关机构:第四军医大学西北工业大学中国科学院更多>>
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- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 大肠杆菌YggG与结合蛋白Era的相互作用研究被引量:1
- 2009年
- Era是细菌生长必须的一高度保守的GTPase。yggG是从大肠杆菌全基因组文库中钓取并克隆的Era结合蛋白基因,进一步的研究表明该基因在大肠杆菌中的表达与环境应激相关,提示yggG基因产物参与细菌的应激调控。为了阐明YggG蛋白与Era蛋白间的相互关系,利用所构建的双启动子表达载体pDH2-YggG-Ptac-Era在同一细胞中同时表达YggG与Era蛋白,并通过免疫共沉淀实验检测细菌裂解产物YggG与Era蛋白间的相互作用;在此基础上,构建并表达纯化了GST融合的Era蛋白氨基端截短肽和Era羧基端截短肽,通过GSTPull-down检测了Era不同功能区域与YggG蛋白间的相互作用。结果显示,Era/YggG复合物仅存在于同时过表达Era和YggG蛋白的细菌细胞内,不诱导Era或者不诱导YggG蛋白过表达,均检测不到Era/YggG复合物存在;纯化的GST不能Pull-down YggG蛋白,而纯化的GST融合的Era蛋白、Era氨基端截短肽及Era羧基端截短肽均可以Pull-down YggG蛋白;GST融合Era氨基端截短肽和GST融合的Era蛋白对YggG蛋白结合作用明显高于GST融合的Era蛋白羧基端截短肽。上述结果说明,YggG是一大肠杆菌Era结合蛋白,YggG与Era的氨基端和羧基端的结合活性存在差异。
- 黄勇陈苏民黄庆生梅其炳
- 关键词:大肠杆菌ERA
- 氯化锂对尾吊大鼠骨丢失的防护作用被引量:1
- 2010年
- 目的研究GSK3特异性抑制剂氯化锂(lithium chloride,LiCl)对尾吊大鼠骨密度的影响。方法 SD雄性大鼠18只,分为3组:正常对照组(Control)、尾吊对照组、尾吊LiCl组,每组6只。尾吊LiCl组大鼠每日灌胃给予LiCl20mg/(kg.d)。分别于第1天和第15天使用双能X线骨密度测量仪测定大鼠左股骨骨密度(bone mineral density,BMD);第15天处死大鼠取左胫骨近心端进行组织包埋切片,HE染色,进行骨组织计量学测量,包括骨小梁面积百分率(Tb.Ar%)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁平均厚度(Tb.Th);对大鼠右股骨进行三点弯曲实验,测量骨力学指标。采用Western blot观察骨组织中β-catenin蛋白的表达。结果实验结束后,尾吊对照组和尾吊LiCl组大鼠BMD均低于正常对照组(P<0.05),而尾吊对照组大鼠BMD明显低于尾吊LiCl组(P<0.01);骨组织计量学结果 ,尾吊对照组大鼠骨小梁平均厚度低于正常对照组(P<0.05),骨小梁面积百分率、骨小梁数量明显低于正常对照组(P<0.01),而尾吊LiCl组大鼠三项参数均高于尾吊对照组(P<0.05);骨力学测试结果 ,尾吊对照组大鼠股骨弹性模量低于正常对照组(P<0.05),刚性系数明显低于正常对照组(P<0.01),而尾吊LiCl组大鼠股骨弹性模量高于尾吊对照组(P<0.05),刚性系数明显高于尾吊对照组(P<0.01)。Western blot结果显示,尾吊对照组β-catenin蛋白表达量明显低于正常对照组,而尾吊LiCl组β-catenin蛋白表达量明显高于尾吊对照组。结论尾部悬吊能够造成大鼠废用性骨丢失,而LiCl能有效地预防尾吊所导致的骨质疏松。
- 崔猛牛银波刘广兴王婷梅黄勇梅其炳
- 关键词:失重模拟氯化锂骨密度