吉林省科技发展计划基金(20120723)
- 作品数：6 被引量：1H指数：1
- 相关作者：徐忠信莽靖王姣琦何金婷崔杨更多>>
- 相关机构：吉林大学中日联谊医院吉林省人民医院吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省产业技术研究与开发项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Nodal信号网络参与脑缺血损伤研究进展被引量：1
- 2015年
- Nodal是转化生长因子β（transforming growth factor-β,TGF-β）超家族成员,TGF-β/Nodal信号已经被证实为维持人类胚胎干细胞多潜能的重要因素,在动物器官形成、胚胎发育、上皮组织增生、细胞外基质合成及组织稳态等方面都发挥着重要作用[1,2]。
- 崔杨莽靖徐忠信
- 关键词：脑缺血损伤NODAL人类胚胎干细胞受体功能超家族
- 磷酸化Smad3在神经元样细胞氧糖剥夺中的表达变化
- 2015年
- 目的探讨磷酸化Smad3蛋白在神经元样PC12细胞氧糖剥夺中的表达变化。方法利用鼠神经生长因子(NGF)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)向神经元样细胞转化,应用无糖DMEM培养液联合连二亚硫酸钠(Na2S2O4)构建氧糖剥夺模型(oxygen-glucose deprivation,OGD),体外模拟神经元缺血性损伤。MTT检测神经元样细胞OGD 0,3,6和12h存活率,Western blot检测OGD前后磷酸化Smad3蛋白表达。结果成功建立神经元样PC12细胞的OGD模型;OGD 3h后细胞存活率显著下降,至OGD 12h降至最低54.7%;细胞内磷酸化Smad3表达在OGD 3、6h与OGD 0h组相比略升高,至OGD 12h时明显降低。结论磷酸化Smad3参与在神经元样细胞OGD早期ActA/Smads通路的活化。
- 徐仲航王一鸣王勇涛王姣琦何金婷莽靖邵延坤徐忠信
- 关键词：OGD
- Smad4介导Activin A信号在PC12细胞OGD损伤中作用研究
- 2015年
- 目的明确OGD损伤诱导的PC12细胞激活素A(Activin A,ActA)信号在细胞内基于Smad4的转导模式及作用。方法使用鼠神经生长因子(NGF,50ng/ml)诱导大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞向神经元样转化,利用无糖DMEM培养液联合连二亚硫酸钠(1mmol/L)构建神经元氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型,体外模拟神经元缺血性损伤。OGD 0、3h、6h、12h后Realtime-PCR检测ActA mRNA表达水平;激光共聚焦观察免疫荧光染色后的Smad4质核分布情况。结果 NGF诱导后PC12细胞贴壁并伸出较长的突触,向神经元样转化。细胞OGD处理3h后ActA mRNA表达水平较0h显著升高,6h开始下降;OGD3h后Smad4在细胞核内的分布较OGD 0h明显增加,6小时开始下降。结论 OGD损伤可诱导神经元样PC12细胞ActA信号激活,Smad4可通过质核移位介导ActA信号在受体水平下游的信号转导,且随时间延长呈动态变化。
- 尤如芹王姣琦刘洪雨崔杨何金婷纪秋野刘永峰莽靖徐忠信
- 关键词：脑缺血损伤激活素ASMAD4
- HSP70蛋白在神经元样PC12细胞氧糖剥夺后的表达变化
- 2013年
- 目的探讨神经细胞氧糖剥夺(OGD)造模后PC12细胞凋亡和热休克蛋白(HSP)70水平,评价OGD模型。方法利用PC12细胞,经NGF刺激诱导向神经细胞分化,利用OGD建立神经细胞OGD模型;利用MTT法、共聚焦显微镜鉴定PC12细胞转化为神经元样细胞及OGD模型的建立,Western印迹检测OGD后HSP70蛋白的表达。结果应用终浓度50 ng/ml NGF的DMEM完全培养基培养PC12细胞,随培养时间的增加细胞呈典型的神经元形态。微管相关蛋白(MAP)2免疫荧光细胞化学染色呈强阳性;建立OGD后神经元出现不同程度的损伤、坏死及凋亡,随OGD时间延长存活率逐渐降低、凋亡率升高、HSP70蛋白表达增加。结论 NGF有效地诱导PC12细胞转化为神经细胞,OGD可以有效诱导HSP70表达。
- 何金婷莽靖胥桂华杨乐王姣琦包晓群徐忠信
- 关键词：PC12细胞氧糖剥夺HSP70蛋白
- 突触蛋白Synapsin在氧糖剥夺模型中的表达及意义
- 2014年
- 目的探讨Synapsin蛋白在氧糖剥夺模型中的表达变化及意义。方法 PC12细胞进行氧糖剥夺处理,建立缺血性脑损伤模型,Western blot方法检测氧糖剥夺模型细胞中Synapsin蛋白的表达。结果应用终浓度50ng/ml NGF的DMEM完全培养基培养PC12细胞,对PC12细胞进行氧糖剥夺处理,与对照组相比,氧糖剥夺(OGD)时间越长,Synapsin蛋白表达水平越低,蛋白表达的条带越淡。结论 Synapsin蛋白对PC12细胞的突出增长有促增殖作用,随氧糖剥夺时间的延长,神经细胞的神经元特性、突触功能逐渐减低。
- 刘洪雨莽靖杨乐胥桂华李宗树王娇琦何金婷徐忠信
- 关键词：PC12细胞
- siRNA靶向沉默Smad7对PC12细胞氧糖剥夺敏感性的影响
- 2014年
- 目的探讨siRNA靶向沉默Smad7基因对PC12细胞氧糖剥夺(OGD)损伤的影响及其相关机制。方法体外建立PC12细胞OGD模型,利用RNA干扰技术,沉默Smad7基因表达,实时RT-PCR及Western印迹检测Smad7基因的表达,Hoechst33342染色检测细胞凋亡情况,实时RT-PCR检测Smad3基因mRNA的表达变化。结果 siRNA转染下调Smad7基因mRNA及蛋白的表达,靶向沉默Smad7联合OGD 16 h组细胞凋亡较OGD 16 h组明显减少;Smad7低表达的PC12细胞内Smad3 mRNA的表达明显增加。结论 Smad7基因沉默降低PC12细胞对OGD损伤的敏感性,提高Smad3基因在转录水平上的表达。
- 王一鸣程也付丹阳王勇涛王姣琦梅春丽莽靖徐忠信
- 关键词：SMAD7SIRNA氧糖剥夺
