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河南省自然科学基金(0411034100)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
代常波
胡根海
王清连
郭敏敏
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相关机构:
河南师范大学
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银染
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MRNA差异...
机构
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郭敏敏
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代常波
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河南农业科学
年份
1篇
2008
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棉花银染mRNA差异显示体系优化研究
被引量:1
2008年
mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)是分离差异表达基因的有效方法。以陆地棉组织培养过程中不同时期愈伤组织为材料,对RNA提取、PCR反应体系、银染条件等影响mRNA差异显示的关键因素进行优化试验,建立了一套适合棉花组织培养的mRNA差异显示体系。最终确定了优化体系(50μL)为:随机引物0.4μmol/L,锚定引物0.4μmol/L,dNTP 250μmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,Taq酶1.5 U,退火温度为39.3℃。利用优化后的体系对材料进行扩增,扩增产物特异性好、条带清晰、背景干净。该体系简便、快捷、灵敏、高效,可用于分离差异表达基因。
代常波
王清连
胡根海
郭敏敏
关键词:
棉花
愈伤组织
MRNA差异显示
银染
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