国家高技术研究发展计划(2007AA10Z330)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 源于鸡蛋清溶菌酶ACE抑制肽的分离纯化及结构鉴定
- 2012年
- 利用胃肠消化酶系水解疏水性氨基酸含量高的蛋清溶菌酶蛋白,筛选能抗胃肠消化的高活性ACE抑制肽。通过超滤、制备型反相高效液相色谱(RP-HPLC)、分析型RP-HPLC纯化、氨基酸组成分析及基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF-MS),从胃肠消化水解液中分离鉴定出两种ACE抑制肽Lys-Val-Phe(KVF)和Trp-Ile-Arg(WIR),化学合成该两种三肽后,ACE抑制活性测定结果显示其IC50值分别为14μmol/L与88.5μmol/L。研究结果表明,蛋清溶菌酶蛋白来源的ACE抑制肽有望用于高血压的预防与治疗。
- 饶胜其刘锋锋居涛徐雯琪杨严俊
- 关键词：溶菌酶ACE抑制肽分离纯化质谱
- 降血压肽前体的设计和克隆及其在大肠埃希菌中的表达被引量：3
- 2010年
- 目的降血压肽(antihypertensive peptide,AP)是一类能降低人体血压的小分子肽,是血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin convering enzyme inhibitor,ACEI),可通过抑制体内血管紧张素Ⅱ的生成达到降低血压的目的。AP通常含有少数几个氨基酸残基,难以直接表达,因此文中设计含多种降压活性肽段的AP前体(antihypertensive peptide precursor,APP),构建原核表达载体,并在所构建的基因工程菌进行表达。方法筛选多种已报道的具有高体内降压活性的AP,经胃肠消化酶酶切位点串联成APP。基于大肠埃希菌偏爱密码子,人工合成相应的多肽基因(app),PCR扩增,克隆至表达载体pET-22b,转化E.coliBL21感受态细胞。重组质粒经双酶切和DNA测序鉴定,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(sopropylβ-D-1-thiogalactopyr-anoside,IPTG)诱导表达重组APP。结果 APP基因正确克隆至表达载体pET-22b中。诱导表达产物经SDS-PAGE分析,显示在相对分子质量11000处出现条带,与预期的重组APP大小相符。结论人工设计的APP在大肠埃希菌中获得成功表达,为AP的工业化制备打下基础。
- 饶胜其徐珍珍杨严俊
- 关键词：高血压降血压肽
