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国家自然科学基金(21005088)

作品数：5 被引量：25H指数：3
相关作者：周国华邹秉杰宋沁馨杨贤殷竹君更多>>
相关机构：中国药科大学南京医科大学江苏出入境检验检疫局更多>>
发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 1篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 2篇内切
  • 2篇内切酶
  • 2篇高灵敏
  • 1篇等温
  • 1篇乙肝
  • 1篇乙肝病毒
  • 1篇乙肝病毒DN...
  • 1篇质谱
  • 1篇质谱分析
  • 1篇质谱分析法
  • 1篇松材
  • 1篇松材线虫
  • 1篇尿药排泄
  • 1篇排泄
  • 1篇限制性内切酶
  • 1篇线虫
  • 1篇灵敏度
  • 1篇酶链反应
  • 1篇敏度
  • 1篇聚合酶

机构

  • 3篇中国药科大学
  • 2篇南京医科大学
  • 1篇南京军区南京...
  • 1篇天津市儿童医...
  • 1篇江苏出入境检...

作者

  • 4篇周国华
  • 3篇邹秉杰
  • 2篇宋沁馨
  • 1篇丁黎
  • 1篇佟若菲
  • 1篇马寅姣
  • 1篇王建平
  • 1篇殷竹君
  • 1篇齐谢敏
  • 1篇杨贤
  • 1篇马雪萍
  • 1篇王璐茜

传媒

  • 3篇现代生物医学...
  • 1篇天津医药
  • 1篇微生物学杂志

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2012
  • 3篇2011
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
基于核酸侵入反应的生物分子检测技术的研究进展被引量：3
2011年
核酸侵入反应是由5'核酸内切酶或flap内切酶催化的,能够识别切割核酸片段形成的特异性结构的一类反应。近年来发展了很多基于该反应的生物大分子检测技术,能够对DNA、RNA、miRNA及蛋白质进行高灵敏、高特异性的测定。这些技术大都无需扩增待测靶标,极大地降低了扩增产物交叉污染的风险,在临床检测中具有很大的应用前景。本文对这些检测技术的原理及应用作简要综述。
马寅姣邹秉杰王建平周国华
PCR防污染技术的研究进展被引量：4
2011年
聚合酶链式反应(PCR)是一种高灵敏核酸扩增技术,广泛应用于核酸检测中。但在实际应用过程中,扩增产物及其他核酸片段的污染会导致假阳性的结果,制约了PCR在临床检测中的应用。为了解决这一问题,建立了许多PCR防污染的方法,除了早期建立的并已得到广泛应用的物理隔绝法、光照法及水解法外,近年来还发展了酶消化法、化学修饰法及DEAE纤维素法。本文对PCR防污染技术的原理、应用及进展进行了综述。
王璐茜邹秉杰周国华
关键词：PCR防污染DNASEI限制性内切酶
健康人群口服复方二甲双胍格列吡嗪片尿药排泄研究被引量：3
2012年
目的:建立二甲双胍和格列吡嗪尿药浓度的测定方法,研究健康人群口服二甲双胍格列吡嗪片后二甲双胍和格列吡嗪的尿药排泄特征。方法:二甲双胍尿液样品用流动相稀释,经涡旋高速离心后,采用LichrospherODS色谱柱分离,流动相为乙腈-3mmol.L-1十二烷基硫酸钠(25:75),用紫外检测器检测,波长为232nm。格列吡嗪尿液样品经盐酸酸化后用乙酸乙酯提取,采用LichrospherODS色谱柱分离,流动相为乙腈-0.1%的乙酸水溶液(55:45),质谱采用电喷雾离子源和选择性离子检测方式。10名健康受试者单次口服二甲双胍格列吡嗪片2片后,测定给药前及给药后0～2、2～4、4～6、6～8、8～10、10～12、12～16、16～24h各时间段的二甲双胍及格列吡嗪尿药浓度。结果:高、中、低浓度的批间与批内精密度(RSD)相对标准差均小于10%。10名健康受试者单次口服二甲双胍格列吡嗪片后,24h内尿液中二甲双胍及格列吡嗪的累积排泄量分别为(102.5±27.3)mg和(452.2±191.4)μg,平均累积排泄率分别为(26.27±7.00)%和(9.04±3.83)%。结论:建立的人尿样中格列吡嗪的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)测定方法和二甲双胍的高效液相色谱(HPLC)测定方法准确、灵敏,适用于尿药排泄检测。
佟若菲齐谢敏丁黎宋沁馨
关键词：二甲双胍格列吡嗪复方合剂质谱分析法
高灵敏可视化核酸试纸条法快速检测HBV DNA被引量：12
2011年
目的:本研究旨在建立一种基于试纸条的快速、灵敏及可视化检测乙型肝炎病毒核酸的方法。方法:利用聚合酶链反应扩增乙肝病毒的保守区,其中上、下游引物的5'端分别修饰异硫氰酸荧光素和生物素。核酸试纸条上的胶体金以及检测线处分别标记有链霉亲和素以及抗荧光素抗体。将扩增产物与展开液混合后点样,10 min后即可用肉眼判读结果。在优化了展开液成分、上样体积以及上样浓度之后,对该方法的灵敏度进行了评价。最后收集15例阴性样本及33例HBsAg阳性样本,按血清标志物结果进行分类后使用核酸试纸条进行检测,并与实时荧光PCR的结果进行了比较。结果:试纸条检测乙肝病毒核酸的灵敏度为250copies/mL。在临床样本的测定中,该方法与实时荧光定量PCR的特异性均为100%。且两种方法检测不同血清标志物类型的阳性检出率无差异。结论:核酸试纸条技术能够用于乙肝病毒核酸的可视化检测,与实时荧光PCR相比检测速度快,具有较好的灵敏度和特异性,适合流行病学调查以及在基层医院体检使用。
杨贤黄欢殷竹君武海萍周国华
关键词：聚合酶链反应乙肝病毒DNA
用于高灵敏可视化检测松材线虫的闭管等温扩增法被引量：3
2014年
建立了一种基于环介导等温核酸扩增技术(LAMP)的松材线虫高灵敏可视化闭管检测方法。针对松材线虫核糖体DNA的序列保守区域设计LAMP引物,通过优化LAMP体系中的Mg2+、甜菜碱浓度和反应温度等因素,建立了环介导等温扩增法;并结合蜡封反应管对产物进行检测,检测结果可直接通过肉眼观察SYBR Green I荧光显色进行判定。结果表明,本方法可检测到低至10拷贝/管的松材线虫核酸片段,可对单条线虫进行检测,并且具有很高的特异性,能区分检测松材线虫与拟松材线虫。由于整个反应恒温进行,无需热循环仪;闭管检测极大地降低了扩增产物交叉污染的风险;检测速度快,整个检测过程只需40 min,为松材线虫的现场快速筛检提供了一种简便、高灵敏、高特异的工具。
马雪萍成思佳武海萍宋沁馨邹秉杰周国华
关键词：松材线虫环介导等温扩增高灵敏度
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