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天然棕色棉葡萄糖苷转移酶基因Gh3GT的克隆与表达分析被引量：7: 2010年; 本研究以发育18d的天然棕色棉及相同发育时期的白色棉近等基因系纤维细胞为材料,采用抑制性差减杂交结合RACE技术分离得到了一个葡萄糖苷转移酶基因的全长cDNA,命名为Gh3GT(GenBank登录号eu921265)。序列分析发现:该基因编码一条有450个氨基酸残基组成的多肽,含有葡萄糖苷转移酶C-端所特有的保守的信号序列PSPG基序,属于植物中特有PSPG基序的UGT家族成员。推断的Gh3GT编码产物与其它糖苷转移酶同源性比对和系统发生分析表明:该糖苷转移酶与玫瑰Rh3GT(Rosa hybrida)、矮牵牛(Petunia hybrida)PhF3GT以及葡萄VvUFGT(Vitis vinifera)的相似性分别为51.30%、46.94%和45.85%,而与已知的陆地棉糖苷转移酶基因GhUGT1和GhUGT2一致性较低,仅为25.37%和12.14%。半定量RT-PCR分析表明:该基因在棕色棉纤维中的表达量明显高于其它组织及其近等基因系白色棉品种,且其在纤维中的表达规律与棕色棉的色素形成过程一致。; 李明月李艳军张新宇杨会娜孙杰; 关键词：棕色棉

天然棕色棉查尔酮合成酶基因(GhCHS1)的克隆和实时定量表达分析被引量：9: 2010年; 根据植物查尔酮合成酶基因保守区序列设计引物,以发育18d的天然棕色棉纤维为材料,用RT-PCR结合RACE技术分离得到了一个查尔酮合成酶基因的全长cDNA(GenBank登录号:EU921263),将该基因命名为GhCHS1。实时荧光定量PCR检测显示,GhCHS1基因在棕色棉纤维细胞中优先表达,且在棕色棉纤维中的表达量远高于其近等基因系白色棉,但是该基因在绿色棉中几乎检测不到。这些试验结果暗示,该基因可能在棕色棉纤维色素形成中发挥重要作用。; 杨会娜田新惠李艳军李明月冯鸿杰孙杰; 关键词：查尔酮合成酶天然彩色棉

绿色棉新彩棉7号体细胞胚胎发生及其植株再生被引量：6: 2013年; 以绿色棉新彩棉7号的子叶、下胚轴为外植体,MSB(MS培养基附加B5维生素)基本培养基附加不同激素组合,诱导愈伤组织及调控分化,通过体细胞胚胎发生方式获得再生植株。结果表明:0.1 mg.L-1KT(Kinetin,激动素)+0.1 mg.L-12,4-D(2,4-dichlorophenoxyacetic,2,4-二氯苯氧乙酸)为诱导愈伤组织的最适植物激素组合,不同外植体处理出愈率均达到100%,但下胚轴纵切面背向培养基放置培养更有利于诱导愈伤组织形成;分化调控阶段的最佳植物激素组合为0.15 mg.L-1KT+0.3 mg.L-1IBA(Indole-3-butyric acid,吲哚丁酸),胚性愈伤分化率可达23.33%;MSB中去除NH4NO3同时KNO3加倍,附加0.5 g.L-1Asn(Asparagine,天冬酰胺)和1g.L-1Gln(Glutamine,谷氨酰胺),胚性愈伤可进一步分化获得体细胞胚,将成熟的子叶胚接种于1/2MS获得完整的再生植株。本研究通过体细胞胚发生途径获得了新彩棉7号的再生植株,为天然彩色棉基因工程研究奠定了一定基础。; 朱华国王红娟李鹏飞张新宇李艳军孙杰; 关键词：绿色棉体细胞胚胎发生植株再生

绿色棉苯丙氨酸解氨酶基因GhPAL1的克隆和实时定量表达分析被引量：1: 2012年; 本研究以拟南芥(Arabidopsis thaliana)苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因cDNA序列(AAC18870.1)为探针,在GenBank中与棉花EST进行tBLASTn比对,将同源性高的EST序列拼接后获得一条棉花PAL全长cDNA基因序列,以此序列为模板设计引物,通过RT-PCR扩增从绿色棉纤维分离出了一个绿色棉PAL基因全长cDNA序列,将该基因命名为GhPAL1(GenBank登录号:JN032297)。序列分析表明,该cDNA全长2347bp,含有一个编码721个氨基酸的开放阅读框。实时荧光定量PCR分析发现:该基因在绿色棉纤维中的表达模式与白色棉纤维相似,但两者在同一时期的表达量差异显著,其在花后6d绿色棉纤维细胞中的表达量是同期白色棉的6倍以上,从该基因的表达特征推测GhPAL1基因可能在绿色棉纤维色素合成过程中发挥重要作用。; 赵伟涛李艳军张新宇吴莉孙杰; 关键词：绿色棉苯丙氨酸解氨酶实时荧光定量PCR

天然绿色棉纤维色素理化性质研究被引量：1: 2011年; 【目的】以天然绿色棉成熟纤维为材料,对纤维色素提取液进行理化性质及稳定性研究。【方法】采用溶剂、光照、pH值调节、金属离子和氧化及还原剂对色素进行处理。【结果】自然光照射致色素提取液颜色随时间变化变浅。常温下色素易溶于极性小的有机溶剂,难溶于极性大的溶剂。色素在pH5～9颜色稳定,Al3+、Fe3+、Cu2+、Fe2+、Ca2+离子导致色素颜色变化。耐氧化性和耐还原性处理前后色素溶液光谱扫描曲线均有明显变化。【结论】光照、pH值、部分金属离子、还原剂及氧化剂影响色素稳定性,且为脂溶性色素。; 张小均冯鸿杰李艳军张新宇孙杰; 关键词：绿色棉色素稳定性光谱

基于UV光谱扫描天然彩色棉色素定量测定方法研究被引量：2: 2009年; 【目的】测定彩色棉色素含量。【方法】对不同浓度天然彩色棉纤维色素粗提液扫描分析。【结果】绿色棉纤维色素提取液在252 nm附近吸收峰随色素浓度减小向短波长方向小幅度移动,棕色棉纤维色素吸收峰随浓度减小向紫外短波长方向移动幅度较大。对色素粗提液200~700 nm所有吸收值与相对浓度的相关系数进行筛选,选择最大相关系数对应波长为定量分析特征波长,确定绿色棉纤维提取液定量分析特征波长为417 nm,棕色棉纤维提取液定量分析特征波长为613 nm,并且建立直线回归方程,回归方程分别为：C绿=0.0535A,R2=0.9965;C棕=0.0217A,R2=0.9878。相关系数均达到0.99以上。【结论】彩色棉纤维色素吸收值对相对浓度的回归方程有明确意义。; 田琴张小均张新宇孙杰; 关键词：天然彩色棉色素 UV光谱

利用抑制差减杂交技术分离棕色棉纤维特异表达基因被引量：6: 2009年; 采用棕色棉新彩棉5号为Tester,其白色近等基因系NIL-C5为Driver,通过抑制差减杂交法(suppressive subtractive hybridization,SSH)构建了一个棕色棉纤维色素差异表达基因差减文库。从文库中随机挑选400个克隆,将这些克隆的PCR产物点膜进行反向Northern杂交检测,挑选20个差异明显的克隆进行序列分析,结果表明:有5个cDNA片段与已知的功能基因序列相似,其中1个cDNA片段与合成色素的重要酶基因4-香豆酸:CoA连接酶(4CL)基因有较高的同源性,其它cDNA片段在数据库中未找到同源序列。; 李艳军张新宇杨会娜田新惠孙杰; 关键词：彩棉差异基因

棕色棉纤维四种类黄酮化合物HPLC测定方法的研究被引量：3: 2010年; 利用高效液相色谱技术,建立一种同时检测棕色棉纤维细胞杨梅素、槲皮素、柑橘素、山奈酚等四种类黄酮成分含量的方法。实验结果显示,四种类黄酮成分达到完全分离,样品在10 h内稳定性较好,加样回收率在96.3%～99.3%。以鲜重计,棕色棉纤维中杨梅素、槲皮素、柑橘素、山奈酚的含量分别为44.68、28.2、47.2、64.6ng·g-1。; 田新惠李艳军张新宇孙杰; 关键词：棕色棉杨梅素槲皮素山奈酚

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国家重点基础研究发展计划(2007CB116210)