深圳市科技计划项目(201202097)
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
- 相关作者：杨淋清庄志雄吴德生刘建军周丽更多>>
- 相关机构：深圳市疾病预防控制中心福建医科大学中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 长期低剂量甲醛染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE部分癌症相关基因启动子区甲基化的影响
- 目的探讨低剂量甲醛长期染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE癌症相关基因启动子区甲基化水平的影响。方法 16HBE细胞每周染毒甲醛10μmol·L24 h,连续24周,分别于染毒3,6,9,12,15,18,21和24周...
- 杨淋清吴德生刘庆成龚春梅张文娟胡恭华周丽黄新凤刘建军庄志雄
- 关键词：甲醛亚甲基四氢叶酸还原酶基因
- 文献传递
- 双酚A对胚胎干细胞及其向乳腺上皮细胞早期分化的影响
- 目的 探讨双酚A(BPA)尤其在其低剂量条件下对胚胎干细胞及其定向分化为乳腺上皮细胞过程的影响，为全面评价BPA安全性提供实验基础。方法 本研究应用小鼠胚胎干细胞(mESC)和人类胚胎干细胞为研究对象，体外实验观察BPA...
- 杨淋清罗凌凤龚春梅吴德生黄海燕刘建军张文昌庄志雄
- 关键词：双酚A胚胎干细胞乳腺上皮细胞乳腺癌
- Hedgehog信号通路在乳腺癌化学致癌进展中的作用被引量：2
- 2015年
- 逐渐增多的研究表明,人们生活中经常接触到的一些化学物质是导致乳腺癌发生的危险因素;同时一些研究证实,Hedgehog(Hh)信号通路在乳腺癌患者组织中存在异常激活,参与乳腺癌的发生、调节乳腺癌干细胞生物学特性、促进肿瘤组织血管新生和乳腺癌细胞侵袭转移等生物学过程。本文通过对化学物质与Hh信号通路在乳腺癌发生、发展研究的最新进展进行综述,为进一步阐述乳腺癌发病机制和乳腺癌的预防及控制提供科学线索。
- 崔栋杨淋清何云庄志雄
- 关键词：HEDGEHOG信号通路化学物乳腺癌
- 应用胚胎干细胞试验(EST)评价邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的胚胎毒性被引量：4
- 2015年
- 目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的胚胎毒性。方法采用悬滴悬浮法培养小鼠胚胎干细胞(m ESCs),观察受试物对m ESCs分化能力的影响,结合CCK-8法判断受试物对m ESCs及小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)的细胞毒性结果,预测受试物的胚胎毒性。用已知强胚胎毒性化合物5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)、无胚胎毒性化合物青霉素-G(P-G)对模型进行有效性验证,并将经过验证的EST模型用于评价受试物DEHP的胚胎毒性。结果利用建立的EST模型对5-FU、P-G胚胎毒性进行评价,结果表明5-FU为强胚胎毒性,P-G为无胚胎毒性,与文献报道一致;DEHP对m ESCs和3T3的半数抑制浓度分别为IC50m ESCs=315μmol/L(126μg/ml),IC503T3=307μmol/L(122.8μg/ml),m ESCs的半数抑制分化浓度为ID50m ESCs=323μmol/L(129.2μg/ml),经EST模型判断公式计算得出该化合物为弱胚胎毒性化合物。结论建立的EST模型的有效性验证结果与ECVAM的结论一致,可用于胚胎毒性的筛选和评价;经EST模型评价DEHP的胚胎毒性为弱胚胎毒性。
- 崔栋杨淋清罗凌凤黄海燕吴德生夏菠周丽黄新凤刘建军徐新云庄志雄何云
- 关键词：胚胎毒性
- 双酚A对小鼠胚胎干细胞分化潜能的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨双酚A(BPA)对胚胎干细胞(ESC)分化潜能的影响,为合理评价BPA的安全性提供实验基础。方法制备及培养的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和小鼠ESC,用BPA 0.1,1,10,100和1000μmol·L-1持续培养8 d,CCK-8法检测MEF和ESC细胞存活率并计算IC50;通过实时荧光定量PCR检测ESC中α肌球蛋白重链m RNA表达并计算其半数最大分化抑制浓度(ID50)。悬滴悬浮法培养的拟胚体,用BPA 0.001,0.01,0.1和1μmol·L-1持续培养10 d,实时荧光定量PCR检测拟胚体各胚层标志基因表达的变化。结果 BPA对小鼠ESC的IC50为5.22×10-4mol·L-1,对MEF的IC50为6.25×10-4mol·L-1,对小鼠ESC体外心肌细胞定向分化的ID50为7.0×10-7mol·L-1。BPA 0.001和0.01μmol·L-1可以上调拟胚体的中胚层标志基因胎肝激酶1和球蛋白转录因子1的表达。结论 BPA属于强胚胎毒性化合物。低浓度BPA对小鼠ESC分化为中胚层细胞有促进分化的作用。
- 罗凌凤崔栋龚春梅吴德生黄海燕刘建军张文昌庄志雄杨淋清
- 关键词：双酚A胚胎干细胞药物毒性
- 长期低剂量甲醛染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE部分癌症相关基因启动子区甲基化的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨低剂量甲醛长期染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE癌症相关基因启动子区甲基化水平的影响。方法 16HBE细胞每周染毒甲醛10μmol·L-1 24h,连续24周,分别于染毒3,6,9,12,15,18,21和24周提取RNA或DNA,应用DNA甲基化相关酶消化结合荧光定量PCR的方法观察24个癌症相关基因启动子区甲基化水平的变化;应用荧光定量PCR的方法观察染毒对亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)和成对盒基因(PAX5)基因表达的时间-效应关系。结果与正常对照组16HBE细胞相比,甲醛染毒细胞4个基因甲基化水平显著改变,2个基因甲基化程度升高,2个基因甲基化程度降低;而在阳性对照人非小细胞癌上皮细胞A549细胞中有9个基因甲基化水平发生显著变化,其中3个基因甲基化水平升高,6个基因甲基化水平降低;甲醛染毒16HBE细胞和A549细胞MTHFR基因均发生高甲基化改变,PAX5基因均出现低甲基化改变。与正常对照组相比,甲醛染毒24周的细胞中,MTHFR基因启动子区甲基化水平升高,非甲基化DNA含量降低58.2%,而PAX5基因启动子区甲基化水平降低,非甲基化DNA含量升高27.1%;随着甲醛染毒时间延长,MTHFR基因表达逐渐降低,而PAX5基因表达逐渐升高。结论低剂量甲醛长期染毒可以使MTHFR基因和PAX5基因启动子区甲基化水平异常,进而引起基因表达水平改变。
- 杨淋清吴德生刘庆成龚春梅张文娟胡恭华周丽黄新凤刘建军庄志雄
- 关键词：甲醛亚甲基四氢叶酸还原酶基因
- 低剂量双酚A及其与苯并芘联合染毒对人乳腺上皮细胞MDM2基因的影响
- 2014年
- 目的观察BPA与B[a]P联合作用对3种乳腺上皮细胞MDM2及TP53基因表达的影响。方法采用细胞增殖荧光法检测环境相关剂量BPA对3种乳腺上皮细胞S期细胞比例的影响,采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹的方法分别检测环境相关剂量水平(10-9、10-7mol/L)BPA及其与10-6mol/L B[a]P联合作用对3种乳腺上皮细胞中MDM2和TP53基因及其编码的蛋白表达水平的影响。结果环境相关剂量的BPA可以引起MCF-7细胞S期细胞比例增高;环境相关剂量的BPA单独作用对3种类型乳腺上皮细胞MDM2和TP53基因表达水平无显著影响;B[a]P单独作用可以引起MCF-10A细胞中MDM2基因表达水平的轻微增加及MCF-7细胞中MDM2基因表达的显著增加;在MCF-7细胞中BPA与B[a]P联合作用可明显增加B[a]P所引起的MDM2基因表达上调,而在HMEC和MCF-10A细胞未发现该现象,蛋白水平与mRNA水平的改变基本一致,同时p53/mdm2比值降低。结论环境相关剂量的BPA与B[a]P联合作用可以在雌激素受体表达阳性的MCF-7细胞中引起MDM2基因及其蛋白产物表达水平的显著上调,提示环境暴露剂量的BPA可能通过雌激素受体依赖的作用途径增加化学致癌物致乳腺癌发生风险。
- 杨淋清罗凌凤黄海燕吴德生崔栋周丽林晓阳刘建军张文昌庄志雄
- 关键词：双酚AMDM2TP53
- 双酚A与苯并[a]芘联合作用对三种乳腺上皮细胞的DNA损伤效应被引量：3
- 2012年
- [目的]观察双酚A(BPA)与苯并[a]芘(BaP)联合作用对三种乳腺上皮细胞DNA损伤的影响。[方法]采用对DNA双链断裂标志pH2AX免疫荧光检测的方法,观察环境相关剂量水平(10-9,10-7mol/L)BPA、10-9mol/L17-β-雌二醇(雌激素对照)及其与10-6mol/L BaP联合作用对人乳腺上皮细胞(HMEC)、人永生化乳腺上皮细胞MCF-10A(CRL-10317)和人乳腺上皮肿瘤细胞MCF-7三种乳腺上皮细胞的DNA损伤效应(以二甲基亚砜作为溶剂对照),并应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测三种细胞雌激素受体α和雌激素受体β的基因ESR1、ESR2mRNA水平的相对表达量。[结果]BPA对三种类型乳腺上皮细胞pH2AX阳性率均无明显影响。BaP可明显增加HMEC和MCF-7两种乳腺上皮细胞pH2AX阳性率:单独染毒时两种细胞pH2AX阳性率分别由(34.7±2.2)%和(3.1±0.3)%增至(63.6±1.2)%和(13.3±0.4)%;与10-7mol/L BPA、10-9mol/L 17-β-雌二醇分别联合作用可使MCF-7的pH2AX阳性率增至(15.1±0.2)%、(17.5±1.0)%,与单独染毒组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。三种细胞内ESR1、ESR2基因表达有差异,其中ESR1基因表达差异明显,在MCF-7中的表达水平最高,为HMEC的1080倍、MCF-10A的5222倍。[结论]BPA与BaP联合作用与BaP单独作用相比,可引起MCF-7的DNA双链断裂损伤加剧,该作用可能与雌激素受体表达水平相关。
- 杨淋清龚春梅吴德生周明罗凌凤周丽黄新凤刘建军庄志雄
- 关键词：双酚A苯并[A]芘DNA损伤雌激素受体
