国家自然科学基金(30271362)
- 作品数：8 被引量：50H指数：5
- 相关作者：林其德乔宠张弘尚涛王春晖更多>>
- 相关机构：上海第二医科大学附属仁济医院中国医科大学上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
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- 子痫前期患者滋养细胞浸润相关基因mRNA及蛋白表达的研究被引量：15
- 2006年
- 目的研究子痫前期患者胎盘滋养细胞基质金属蛋白酶(MMP)9、2及其组织抑制物(TIMP)1、2,肿瘤转移抑制基因KiSS-1 mRNA、蛋白的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR、免疫印迹(western blot)法对30例正常足月妊娠妇女(正常妊娠组)和10例妊娠期高血压患者(高血压组)及27例子痫前期(子痫前期组)患者胎盘滋养细胞中MMP-9、MMP-2、KiSS-1、TIMP-1和TIMP-2基因mRNA及蛋白表达水平[均以相对吸光度(A)表示]进行检测;应用明胶酶谱分析法,检测3组妇女胎盘孵育液MMP-9、MMP-2活性。结果(1)胎盘滋养细胞浸润相关基因mRNA表达水平:子痫前期组MMP-9、MMP-2 mRNA表达水平分别为0．39±0．05和0．71±0．16,均明显低于正常妊娠组的0．78±0．11和1．63±0．31,两组分别比较,差异有统计学意义(P均<0．05)。高血压组MMP-9 mRNA的表达水平明显高于重度子痫前期患者,差异有统计学意义(P<0．05)。子痫前期组胎盘滋养细胞KiSS-1 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达水平分别为1．97±0．21和1．11±0．18,均明显高于正常妊娠组的0．69±0．27和0．65±0．19,差异均有统计学意义(P<0．05);高血压组胎盘滋养细胞KiSS-1 mRNA表达水平低于子痫前期组,但与正常妊娠组比较,差异无统计学意义(P>0．05)。重度子痫前期患者胎盘滋养细胞TIMP-2 mRNA表达水平明显高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P<0．05)。(2)胎盘滋养细胞浸润相关基因的蛋白表达水平:子痫前期组MMP-9、MMP-2基因的蛋白表达水平分别为1．07±0．35和0．74±0．23,均明显低于正常妊娠组的2．43±0．92和1．48±0．78,差异均有统计学意义(P<0．05)。子痫前期组胎盘KISS-1和TIMP-1蛋白表达水平分别为2．46±0．39和1．51±0．40,均明显高于正常妊娠组的0．91±0．35和0．93±0．56,差异均有统计学意义(P<0．05)。子痫前期组胎盘滋养细胞TIMP-2蛋白表达水平与正常妊娠组及高血压组比较,
- 张弘林其德乔宠
- 关键词：明胶酶A明胶酶B金属蛋白酶类组织抑制剂肿瘤抑制蛋白质类
- 胎盘组织KiSS-1 mRNA及其蛋白肽metastin表达在子癎前期发病中的意义被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨胎盘组织中KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin表达在早发重度子癎前期发病中的作用。方法:采用RT-PCR、Western blot、免疫组化方法检测57例子癎前期患者(轻度15例和重度42例,其中早发重度12例,晚发重度30例)和30例正常晚期妊娠者胎盘组织中KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin的表达水平和定位。结果:胎盘组织中蛋白肽metastin主要表达在绒毛的合体滋养细胞和细胞滋养细胞。子癎前期组胎盘组织中KiSS-1mRNA及蛋白肽metastin表达分别为(1.73±0.24)和(78.41±7.96)μg/100μg总蛋白,显著高于正常晚期妊娠组(P均<0.01),以早发重度子癎前期组尤为显著。结论:子癎前期存在KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin表达增强,且早发重度子癎前期组表达显著增高,可能是早发重度子癎前期发病的主要原因之一。
- 乔宠王春晖尚涛林其德
- 关键词：子痫前期胎盘KISS-1MRNA
- 胎盘组织KiSS-1及metastin表达在早发重度子痫前期发病中的作用及其与围生结局的相关研究被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨胎盘组织中KiSS-1及其蛋白肽metastin表达在早发重度子痫前期发病中的作用及其与围生结局的相关性。方法:采用RT-PCR、westernblot、免疫组化方法检测57例子痫前期患者(轻度15例和重度42例,其中早发重度12例,晚发重度30例)和30例正常晚期妊娠者胎盘组织中KiSS-1及其蛋白的表达水平和定位,并与围生结局进行相关性分析。结果:子痫前期胎盘组织中KiSS-1及蛋白肽metastin的表达定位与正常晚期胎盘组织相似,主要表达在绒毛的合体滋养细胞和细胞滋养细胞。子痫前期组胎盘组织中KiSS-1mRNA及其蛋白表达分别为(1.73±0.24)和(78.41±7.96)μg/100μg总蛋白,显著高于正常晚期妊娠组(P<0.01、P<0.01),以重度子痫前期组尤为显著,早发重度子痫前期组显著高于晚发重度子痫前期组。与正常晚期妊娠组相比,子痫前期组metastin平均光密度(0.64±0.02)显著增高(P<0.01),随着病情的加重而逐渐增高,早发重度子痫前期组显著高于晚发重度子痫前期组(P<0.01)。随着新生儿窒息程度的加重,KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平呈升高趋势(P<0.05、P<0.05),且与窒息程度呈明显正相关,r分别为0.463(P=0.016)和0.587(P=0.027)。KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平与新生儿体重呈显著负相关,r分别为-0.764(P=0.000)和-0.899(P=0.000)。结论:子痫前期存在KiSS-1基因及其表达增强,且早发重度子痫前期组表达显著高于晚发重度子痫前期组,与滋养细胞侵润能力下降和新生儿预后密切相关,其异常表达可能是早发重度子痫前期发病的主要原因之一且与围生结局密切相关。
- 乔宠王春晖尚涛林其德
- 关键词：子痫前期胎盘KISS-1METASTIN
- KiSS-1基因在孕早期绒毛组织中表达的初步研究被引量：18
- 2003年
- 目的 研究早孕绒毛中KiSS - 1基因mRNA的表达及定位 ,探讨其与滋养细胞浸润的关系。方法 采用半定量RT -PCR对 10 0例 (分为 8个孕周组 )正常早孕绒毛组织中KiSS - 1mRNA的表达水平进行检测 ,并采用原位杂交方法进行其组织学定位。结果 在整个孕早期绒毛组织中均有KiSS - 1基因表达 ,孕 5周时表达最低 ,至 9～ 12周达高峰。KiSS - 1mRNA表达与妊娠天数呈直线正相关。原位杂交法检测结果提示孕早期KiSS -1mRNA在滋养细胞胞浆中的表达随孕周增加而增强。结论 KiSS - 1基因在滋养细胞表达随孕周增长而增加 ,提示该基因在调控早孕滋养细胞的浸润行为中起重要的作用。
- 乔宠林其德
- 关键词：KISS-1基因孕早期绒毛组织
- 早期自然流产患者绒毛KiSS-1、MMP-9和MMP-2基因及其蛋白表达被引量：7
- 2006年
- 目的研究早期自然流产患者绒毛肿瘤转移抑制基因KiSS-1与基质金属蛋白酶(MMP-9、MMP-2)mRNA及蛋白的表达,探讨其与自然流产的关系。方法采用半定量RT-PCR、免疫印迹法检测30例正常早期妊娠和30例早期自然流产患者绒毛KiSS-1、MMP-9和MMP-2的mRNA及蛋白水平,用明胶酶谱分析法检测上述样本孵育液MMP-9、MMP-2的酶活性。结果(1)自然流产患者绒毛组织中MMP-9及MMP-2mRNA表达水平低于正常早期妊娠组(P<0.05),KiSS-1mRNA的表达高于正常早期妊娠组差异有统计学意义(P<0.05);(2)Westernblotting分析显示自然流产患者绒毛MMP-9、MMP-2蛋白表达低于正常早期妊娠差异有统计学意义(P<0.05),KiSS-1蛋白表达高于正常早期妊娠差异有统计学意义(P<0.05);(3)明胶酶谱分析结果显示,自然流产患者绒毛MMP-9、MMP-2酶活性低于正常早期妊娠者差异有统计学意义(P<0.05)。结论自然流产患者绒毛促浸润基因MMP-9、MMP-2mRNA及其蛋白表达水平降低,同时抑制浸润基因KiSS-1mRNA及其蛋白表达增加,造成滋养细胞浸润能力下降,可能与自然流产的发生有关。
- 张弘林其德
- 关键词：绒毛肿瘤转移抑制基因基质金属蛋白酶-2
- pcDNA3-KiSS-1质粒致孕鼠妊娠高血压综合征样病变的实验研究被引量：4
- 2005年
- 目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1表达增高抑制滋养细胞浸润及其在大鼠妊娠高血压综合征(妊高征)发病中的作用。方法妊娠Wistar大鼠随机分为A、B、C三组,每组10只,A组(实验组)于妊娠0.5、7.5、14.5d腹腔注射脂质体包埋的pcDNA3-KiSS-1质粒,B组(空质粒转染组)于同期腹腔注射脂质体包埋的pcDNA3空质粒,C组(对照组)同期腹腔注射生理盐水,观测血压、尿蛋白。于妊娠21.5d剖宫产,计数幼仔数量,并分别称取幼仔体重及胎盘重量,RT-PCR检测胎盘KiSS-1mRNA、基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA表达,并取大鼠胎盘、胎盘附着处子宫壁、肾、心、肝等脏器进行病理检查。结果⑴A组妊娠大鼠于妊娠15.5d起血压增高(P<0.05),并于妊娠17.5d及19.5d最为明显(P<0.01),与B组、C组同期相比差异有统计学意义(P<0.01);⑵A组大鼠于妊娠14.5d出现尿蛋白升高并持续至分娩,显著高于B组及C组(P<0.01);⑶A组孕鼠所产仔鼠总数及体重均较B组及C组降低(P<0.05),并且A组中有2例剖宫产时发现有流产胚胎;⑷经RT-PCR检测到A组10例大鼠中有7例其胎盘KiSS-1mRNA表达阳性,而B组及C组均为阴性,A组胎盘MMP-9mRNA表达显著低于B组及C组(P<0.05);⑸病理学检查结果提示A组大鼠肾小球肿胀,血管壁内皮细胞增生,肾小囊腔缩小,肾小动脉管壁增厚,管腔狭窄。三组胎盘、胎盘附着处子宫壁、心、肝等脏器未见明显差别。结论脂质体包埋的pcDNA3-KiSS-1质粒经整合至妊娠Wistar大鼠可在胎盘表达,出现血压升高、尿蛋白增高等妊高征样变化,并且胎盘MMP-9mRNA表达下降,提示KiSS-1基因表达增高导致滋养细胞浸润不足影响胎盘血管的生理性重铸,在妊高征发病中起重要作用。
- 张弘林其德
- 关键词：KISS-1基因妊娠高血压综合征滋养细胞
- 子痫前期患者滋养细胞中KiSS-1基因及基质金属蛋白酶9表达的临床意义被引量：6
- 2005年
- 目的探讨胎盘滋养细胞中KiSS-1基因及基质金属蛋白酶(MMP)9在子痫前期发病中的作用及其与新生儿预后的相关性。方法采用RT-PCR和western blot(蛋白印迹法)检测40例子痫前期患者(其中轻度15例、重度25例,子痫前期组)和20例正常足月正常妊娠妇女(正常妊娠组)胎盘滋养细胞中KiSS-1mRNA和MMP-9mRNA及其蛋白的表达,并与其临床症状及其新生儿围产结局进行相关性分析。结果(1)子痫前期组滋养细胞中KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平分别为1.73±0.24和(78.4±8.0)μg/100μg总蛋白,其中轻度患者为1.50±0.15和(72.4±6.9)μg/100μg总蛋白,重度患者为1.87±0.20和(83.5±3.6)μg/100μg总蛋白;均显著高于正常妊娠组的1.24±0.25和(63.4±2.7)μg/100μg总蛋白(P<0.01)。(2)子痫前期组MMP-9mRNA及其蛋白表达水平分别为0.09±0.06和(9.6±4.3)μg/100μg总蛋白,其中轻度患者为0.11±0.08和(10.0±3.2)μg/100μg总蛋白,重度患者为0.07±0.05和(7.8±2.0)μg/100μg总蛋白;均显著低于正常妊娠组的0.17±0.10和(17.9±7.3)μg/100μg总蛋白(P<0.01)。(3)子痫前期组KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平与中心动脉压(MAP)和24h尿蛋白定量呈正相关,r分别为0.610(P=0.023)、0.713(P=0.011)和0.397(P=0.003)、0.638(P=0.002);与有、无眼底动脉痉挛呈显著正相关,r分别为0.499(P=0.000)和0.511(P=0.000)。子痫前期组MMP-9mRNA及其蛋白表达水平则与MAP、24h尿蛋白定量及有、无眼底动脉痉挛呈显著负相关,r分别为0.561(P=0.042)、0.571(P=0.022)、0.275(P=0.039)、0.375(P=0.048)、0.346(P=0.001)、0.543(P=0.000)。(4)子痫前期组MMP-9mRNA及其蛋白表达水平与新生儿体重呈显著正相关,r分别为0.651(P=0.000)和0.544(P=0.004);KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平与其呈显著负相关,r分别为0.759(P=0.000)和0.865(P=0.000)。(5)随着新生儿窒息程度加重,MMP-9mRNA及其蛋白表达水平呈降低趋势,KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平呈升高趋势(P均<0.05)。结论MMP-9和KiSS-1表达失衡
- 乔宠王春晖尚涛林其德
- 关键词：滋养层蛋白质类明胶酶B
- KiSS-1基因对滋养细胞生物学行为影响的实验研究被引量：5
- 2004年
- 目的 :探讨KiSS 1基因对滋养细胞生物学行为的直接影响 ,进一步证实妊娠高血压综合征患者胎盘“浅着床”与滋养细胞中肿瘤转移抑制基因KiSS 1表达增高有关。方法 :含有人KiSS 1基因全长cDNA的重组真核表达载体pcDNA3 KiSS 1经酶切和测序鉴定正确后 ,转染滋养细胞株JAR ,观察其KiSS 1mRNA表达、细胞生长和增殖能力和细胞侵袭力的变化。结果 :pcDNA3 KiSS 1成功转染JAR细胞 ,KiSS 1mRNA表达阳性 ,而亲本JAR细胞为阴性。转染目的基因后细胞生长曲线、软琼脂克隆形成率等与未转染之细胞无差异 ,但细胞侵袭能力明显下降 ,穿透Matrigel膜细胞数明显少于未转染组。结论 :KiSS 1基因对滋养细胞的生长、增殖能力无影响 ,但抑制其侵袭能力 ,这可能是导致妊高征“浅着床”
- 张弘林其德
- 关键词：基因KISS-1滋养层妊娠并发症心血管
