国家自然科学基金(30271377)
- 作品数：12 被引量：69H指数：5
- 相关作者：杨永弘俞桑洁沈叙庄高薇袁林更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺炎链球菌耐药基因ermB、mefA、tetM与转座子整合酶基因intTn的检测被引量：22
- 2005年
- 目的研究耐药基因ermB、mefA、tetM与转座子整合酶基因intTn在携带肺炎链球菌的北京儿童中分布特点。方法对185株呼吸道感染患儿鼻咽部分离的肺炎链球菌进行以下检测:Etest、琼脂稀释或纸片扩散法测定对大环内酯类、四环素、β内酰胺类及头孢类等15种抗生素的药物敏感性。PCR检测大环内酯类耐药基因ermB和mefA,四环素耐药基因tetM以及转座子Tn1545的整合酶基因intTn。结果185株肺炎链球菌的药敏结果显示,对红霉素、克林霉素、四环素和复方磺胺甲基异唑的耐药率较高,分别为78.9%、76.2%、86.0%和78.7%,对阿莫西林克拉维酸、头孢克洛、头孢曲松和头孢呋辛耐药率较低,分别为2.2%、15.5%、2.8%和14.1%。所有红霉素耐药株均检出ermB和或mefA,其中79.5%为ermB阳性,17.8%为ermB和mefA同时阳性,2.7%为mefA阳性。tetM基因在分离株中的阳性率是87%,四环素耐药组的tetM基因携带率是96.9%,高于敏感组(26.9%)。四环素耐药株的红霉素耐药率(90.0%)亦高于敏感株组(11.5%)。87.6%的肺炎链球菌存在intTn基因,intTn基因阳性组的红霉素、四环素、氯霉素、复方磺胺甲基异唑和环丙沙星的耐药率较intTn基因阴性组高。分离株最常见的基因组合是intTn+tetM+ermB,占58.4%。结论北京地区呼吸道感染儿童鼻咽部肺炎链球菌耐大环内酯类抗生素的主要原因是ermB编码的23SrRNA甲基化酶致靶位改变。tetM基因编码蛋白质的核糖体保护作用,是肺炎链球菌四环素耐药的重要机制。接合性转座子Tn1545的存在与菌株的红霉素和四环素耐药关系密切,可能是肺炎链球菌多重耐药的重要机制之一。
- 杨慧杨永弘Elisabet Nielsen俞桑洁袁林王咏红沈叙庄
- 关键词：肺炎链球菌大环内酯类转座子TETM基因耐药基因大环内酯类抗生素
- 北京地区儿童鼻咽部肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药的检测被引量：11
- 2004年
- 目的 研究北京地区儿童携带肺炎链球菌 (SP)对大环内酯类抗生素的耐药特点。方法 对 2 0 0 2～ 2 0 0 3年上呼吸道感染儿童鼻咽部 2 0 0株SP分离株对 4种大环内酯类抗生素、青霉素和克林霉素的最低抑菌浓度进行检测 ;耐药诱导试验分析部分耐药菌株大环内酯类耐药表型 ;PCR检测红霉素耐药基因ermB和mefA。结果 2 0 0株SP中 179株对红霉素耐药。红霉素和青霉素的药敏结果无明显关连性。耐红霉素的 14 7株SP中 ,阿奇霉素、克拉霉素、乙酰螺旋霉素和克林霉素的耐药率分别是 10 0 % ,10 0 % ,95 2 % ,95 9%。耐药表型以结构型大环内酯类、林可酰胺类和链阳性菌素B耐药表型 (cMLS)为主 ,占红霉素耐药株的 95 9%。耐药基因检测中 ,仅携带ermB基因的菌株为 79 6 % ,同时携带ermB和mefA基因菌株为 17 7% ,仅携带mefA基因的菌株为 2 7%。结论 2 0 0 2～ 2 0 0 3年北京上呼吸道感染患儿携带的SP对红霉素耐药率达 89 5 % ,分离株在对红霉素耐药同时也对其他大环内酯类药物和克林霉素耐药。耐大环内酯SP表型以cMLS为主 ,基因型以ermB为主。
- 杨慧沈叙庄王咏红袁林俞桑洁杨永弘
- 关键词：耐药表型鼻咽部大环内酯类抗生素克林霉素分离株
- 头孢丙烯对5种儿童感染常见病原菌的抗菌活性被引量：4
- 2005年
- 目的观察头孢丙烯等口服抗生素对5种儿童社区获得性感染常见致病菌的体外抗菌活性。方法选取近年北京儿童医院临床分离的金葡菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌菌株,采用E试验法检测其对头孢丙烯、头孢克洛、头孢地尼等抗生素的敏感性。结果头孢丙烯对所检测菌株的MIC90值分别是:甲氧西林敏感金葡菌0.75mg/L;化脓性链球菌0.023mg/L;肺炎链球菌青霉素敏感株0.094mg/L,青霉素耐药株12mg/L;β内酰胺酶阴性流感嗜血杆菌2mg/L,β内酰胺酶阳性16mg/L;β内酰胺酶阴性卡他莫拉菌0.75mg/L,β内酰胺酶阳性2mg/L。PRSP株对头孢丙烯耐药率为61.9%,流感嗜血杆菌β内酰胺酶阳性株中占15.8%。结论头孢丙烯对金葡菌、化脓性链球菌、青霉素敏感肺炎链球菌、β内酰胺酶阴性卡他莫拉菌有良好抗菌作用;对β内酰胺酶阳性流感嗜血杆菌的抗菌活性低于头孢地尼;青霉素耐药肺炎链球菌株对头孢丙烯有较高的耐药率。
- 高薇俞桑洁杨永弘
- 关键词：头孢丙烯抗生素敏感性
- 肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因多态性与其青霉素敏感性的关系被引量：6
- 2006年
- 目的探讨肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因(pbps)多态性与青霉素敏感性的关系。方法以包括63株青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSP)和69株青霉素敏感菌(PSSP)共132株菌为研究对象,浓度梯度(E-test)法检测青霉素最低抑菌浓度(MIC),PCR法扩增pbp2b、pbp2x和pbp1a,分析其限制性片段长度多态性(RFLP)。结果pbp1a有9种型,其中两种见于PSSP和部分PNSP菌株,其他7种主要见于青霉素MIC值≥0·25μg/ml的菌株(21/22)。pbp2b有10种型,其中3种型见于PSSP和部分PNSP菌株,其他7种主要见于青霉素MIC≥0·25μg/ml的菌株(20/22)。pbp2x谱型31个,PSSP菌株中有17种,其中13种仅见于PSSP菌株;余下14种只存在于PNSP(35株)。pbp1a、pbp2b和pbp2x组合的pbps型共47种,PSSP菌株中23种,其中17种仅存在于PSSP;其他24种仅见于PNSP(36株)。根据pbp1a或pbp2b基因型判断青霉素敏感,虽然敏感度高,但特异度较低(<50%),准确性也较低;根据pbp2x或pbps基因型判断,敏感度、特异度和准确性均在85%以上。结论肺炎链球菌青霉素耐药主要与PBP1a、PBP2b和PBP2x变异有关;根据肺炎链球菌pbps基因多态性,可快速准确地判断其青霉素敏感性。
- 姚开虎佟月娟俞桑洁沈叙庄杨永弘
- 关键词：链球菌肺炎多态性限制性片段长度
- 流感嗜血杆菌氨苄西林耐药基因TEM-1、ROB-1的检测被引量：9
- 2005年
- 目的 探讨我国北京,上海,广州3地2000—2003年流感嗜血杆菌氨苄西林的耐药机制。方法 选取2000—2003上述3地上呼吸道感染患儿鼻咽部分离培养的899株流感嗜血杆菌,采用E test法检测氨苄西林耐药情况。用头孢硝噻酚片进行β内酰胺酶检测,PCR方法检测产酶菌株TEM -1、ROB -1耐药基因携带情况。结果 74株氨苄西林耐药菌株均产生内酰胺酶,PCR检测均为TEM- 1基因阳性,未发现ROB -1基因阳性菌株。结论 我们研究的儿童上呼吸道携带流感嗜血菌对氨苄西林耐药的机制主要是TEM- 1型β内酰胺酶的产生。
- 姜敏胡翼云沈叙庄高薇俞桑洁杨永弘
- 关键词：流感嗜血杆菌氨苄西林耐药Β内酰胺酶TEM-1基因
- 分离肺炎链球菌主群与耐药亚群的简易方法被引量：1
- 2004年
- 目的 :研究分离肺炎链球菌苯唑西林 (OX)纸片清晰抑菌环内散在克隆与产生清晰抑菌环的主要克隆的简易方法。方法 :以OX纸片清晰抑菌环内存在散在克隆的 4株临床分离株R0 137、S10 39、R12 84和R2 0 34为研究对象 ,用常备的药敏培养基和OX纸片尝试分离散在克隆和主要克隆 ,并以青霉素结合蛋白基因 (pbp) pbp1a、pbp2b和pbp2x限制性片段长度多态性 (RFLP)分析和盒式 聚合酶链反应 (BOX PCR)菌株亲缘关系鉴定研究所分离菌株间的关系。结果 :于同一菌株分离出的克隆OX纸片药敏检测结果均不一致 ;除S10 39外 ,青霉素Etest检测结果也不一致。从R0 317、S10 39各分离出 2株 ,2株间 pbp酶切图谱相同 ,BOX PCR属于同一型 ;而从R2 0 34分离出的 2株 ,pbp酶切图谱与BOX PCR均不相同 ;从R12 84分离出 3个具有不同药敏表型的克隆 ,其中 2株 pbp1a和 pbp2b酶切图谱相同 ,BOX PCR属于同一型 ;另外 1株pbp2b酶切图谱与前 2株相同 ,而 pbp1a和 pbp2x不同 ,BOX PCR属于不同型。结论 :用药敏培养基和药敏纸片可成功分离不同耐药水平的混合菌株 ,方法简单易行。对所分离的菌株的分子生物学研究可能揭示自然过程中耐药基因逐步变异的特征。
- 姚开虎佟月娟俞桑洁沈叙庄杨永弘
- 关键词：肺炎链球菌苯唑西林抗生素耐药性
- 儿童携带卡他莫拉菌的耐药性及bro基因分型研究被引量：2
- 2005年
- 目的对儿童携带214株卡他莫拉菌分离株产酶率和9种抗生素敏感性测定,研究产酶株β-内酰胺酶耐药基因特征。方法采用英国抗生素化疗学会(BSCA)琼脂稀释法进行抗生素最小抑菌浓度测定;用Nitrocefin纸片琼脂扩散法检测β- 内酰胺酶;PCR扩增结合限制性内切酶分析方法对分离株进行bro基因分型。结果214株卡他莫拉菌中β-内酰胺酶产酶率为94.4%。产酶株对β-内酰胺类抗生素:氨苄西林、头孢呋辛、头孢克洛的MlC90分别为32 mg/L、2 mg/L和8 nag/L,明显高于非产酶株的0.5 mg/L,10 mg/L和0.5 mg/L;产酶株对氨苄西林、头孢呋辛、头孢克洛耐药率分别为95%、46.5%和76 2%,明显高于非产酶株组(0%)(x2=100.889,8.159,28.961 P均<0 001);产酶株与非产酶株组对头孢噻肟、非β-内酰胺类抗生素红霉素、环丙沙星、氯霉素和四环素敏感性无显著差异,其总体敏感性分别为100%、95.8%、100%、100%、34.1%,所有分离株对复方磺胺甲(口恶)唑产生耐药(100%),MIC50和MIC90高达32 mg/L和128 mg/L。202例产酶株经bro基因分型,69.8%(141/ 202)为bro—Ⅰ型,30.2%(61/202)为bro-Ⅱ型。bro-Ⅰ型携带菌株对β-内酰胺类抗生素的MIC50和MIC90高于bro-Ⅱ型的耐药株。结论北京地区携带的卡他莫拉菌β-内酰胺酶产酶率较高。
- 袁林杨永弘王艳张美和甄景慧沈叙庄
- 关键词：卡他莫拉菌抗生素耐药
- 2000至2002年北京儿童中青霉素不敏感肺炎链球菌的血清型分布和同源性研究
- 2007年
- 研究表明青霉素不敏感肺炎链球菌（peniciHinnonsusceptible Streptococcus pneumoniae，PNSP）的克隆传播是其流行的重要因素，我们也证实克隆传播是北京地区PNSP流行的重要因素。进一步血清分型可为抗生素耐药性和流行克隆分析提供更多信息，为推广接种疫苗预防PNSP感染和控制其传播提供依据。
- 姚开虎俞桑洁沈叙庄佟月娟高薇杨永弘
- 关键词：肺炎链球菌血清型分布STREPTOCOCCUS同源性克隆分析
- 北京地区上呼吸道感染儿童青霉素不敏感肺炎链球菌的血清型分布研究被引量：4
- 2007年
- 目的了解青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSP)的耐药性和血清型分布。方法以2000～2004年门诊上呼吸道感染的0～5岁患儿鼻咽部分离的肺炎链球菌为研究菌株,采用E-test法检测青霉素最低抑菌浓度,简易棋盘式分型系统进行血清分型。结果检出PNSP菌株129株,其中中介102株,耐药27株;2000～2004年各年耐药株占PNSP比率分别为19.0%、8.0%、17.6%、30.0%和26.1%;常见血清型共有124株(96.1%),为19群、23群、不能分型、6群和14型;7价结合疫苗覆盖率从2000年到2004年分别为57.1%、76.0%、88.2%、75.0%和82.6%。结论北京儿童中分离的PNSP的青霉素耐药性有所增强;7价结合疫苗覆盖率升高,有利于应用疫苗来预防PNSP的携带、感染及耐药性的进一步播散。
- 姚开虎沈叙庄俞桑洁佟月娟高薇袁林杨永弘
- 关键词：肺炎链球菌耐药性抗生素儿童
- 北京地区青霉素不敏感肺炎链球菌分子流行病学的初步探讨被引量：6
- 2005年
- 目的了解北京地区儿童中青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSP)的流行状况,阐明其分子流行病学特征.方法以2000-2002年于0～5岁上呼吸道感染儿童鼻咽部分离的63株PNSP冻存标本为研究对象,进行耐药模式分析,以聚合酶链反应(PCR)扩增青霉素结合蛋白(PBP)基因pbp1a、pbp2b和pbp2x,分析其限制性片段长度多态性(RFLP),并进行细菌染色体RFLP脉冲场凝胶电泳(PFGE)比较.结果 63株PNSP有61株(96.8%)为多重耐药菌株.pbp1a、pbp2b和pbp2x分别有8、9和18种基因型,三者组合的谱型共有30种.63株PNSP的PFGE型共分为35个,其中,9种PFGE型包括菌株≥2株,这9种型共包含37株,占59%,均为多重耐药菌株.与亚洲流行菌株比较,我们发现2株PFGE型可能相关的PNSP分别与亚洲流行菌株越南-19群、新加坡-19群、中国台湾-19群和韩国-19群谱型完全相同.结论北京地区儿童中PNSP的多重耐药状况严峻,克隆传播是PNSP流行的重要因素;已存在与亚洲流行菌株相同的克隆,值得关注.
- 姚开虎俞桑洁沈叙庄佟月娟高薇杨永弘
- 关键词：链球菌肺炎流行病学抗药性青霉素结合蛋白分子流行病学肺炎链球菌
