河南省教育厅自然科学基金(2007310020)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
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- 互隔交链孢酚增加NIH3T3细胞中DNA聚合酶β表达被引量：3
- 2008年
- 目的研究互隔交链孢酚(AOH)对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中DNA聚合酶β(DNAPOLβ)表达的影响。方法采用半定量RT-PCR、细胞免疫化学和Western blot方法检测细胞中DNAPOLβmRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,AOH可以引起NIH3T3细胞中DNAPOLβ基因的mRNA水平和蛋白水平表达增高(并呈一定的剂量效应关系)(P<0.05)。结论AOH可以引起NIH3T3细胞中DNAPOLβ基因表达增高,可能有助于细胞应对AOH引起的DNA损伤。
- 赵继敏金戈李沛赵明耀杨洪艳郑智敏董子明
- 关键词：DNA聚合酶Β互隔交链孢酚NIH3T3细胞
- 互隔交链孢酚激活EC9706细胞DNA聚合酶β表达的信号通路初探被引量：2
- 2009年
- 目的:研究互隔交链孢酚(AOH)对食管癌EC9706细胞株中DNA聚合酶β(DNApolβ)表达的影响.方法:以PKA激活剂Forskolin(40μmol/L)为阳性对照,采用免疫细胞化学,WesternBlot方法检测20μmol/LAOH作用EC9706细胞16h后polβ蛋白水平的表达.以PKA特异性抑制剂H89(10μmol/L)预处理EC9706细胞1h,再以20μmol/LAOH作用细胞16h,观察H89阻断AOH激活polβ蛋白表达的作用.结果:免疫细胞化学结果显示,与溶剂对照组和H89处理组相比较,AOH处理组,Forskolin处理组的细胞中polβ表达增高.WesternBlot结果表明,AOH处理组,Forskolin处理组polβ表达分别是溶剂对照组的2.05和3.12倍(P<0.05),而H89组仅为对照组的1.32倍.结论:AOH可以激活食管癌EC9706细胞中polβ基因表达,这可能是通过PKA信号转导通路介导的.
- 赵继敏李沛杨洪艳黄幼田江亚南赵明耀郑智敏董子明
- 关键词：DNA聚合酶Β互隔交链孢酚蛋白激酶A信号转导通路
- 互隔交链孢酚通过PKA-CREB信号通路激活NIH3T3细胞中DNA聚合酶β表达被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨互隔交链孢酚(AOH)诱导小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中DNA聚合酶β(DNA polβ)表达增高的分子信号通路。方法:①15μmol/L AOH作用NIH3T3细胞16 h,利用Western blotting方法检测细胞中DNA polβ的表达,并利用磷酸化CREB抗体检测AOH作用后NIH3T3细胞中CREB信号分子是否被激活。②利用PKA-CREB信号通路特异性抑制剂H89预处理NIH3T3细胞1 h,再加入AOH作用,分别检测磷酸化CREB和DNA polβ表达的变化。结果:①与溶剂对照组相比,AOH诱导NIH3T3细胞中DNA polβ表达明显增高,而且磷酸化CREB蛋白含量也明显增加,差异均显著。②用PKA特异性抑制剂H89预处理,可部分抑制NIH3T3细胞中CREB蛋白的磷酸化,并且降低了AOH引起的NIH3T3细胞中DNA polβ的表达增加。结论:PKA-CREB信号通路在AOH诱导的NIH3T3细胞中DNA polβ表达起重要作用。
- 赵继敏路静刘康栋王瑾瑾杨洪艳黄幼田董子明
- 关键词：DNA聚合酶ΒCAMP反应元件结合蛋白NIH3T3细胞
- 互隔交链孢酚对NIH3T3细胞PKA-CREB信号通路的影响
- 2009年
- 目的:探讨互隔交链孢酚(Alternariol,AOH)对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中PKA-CREB信号通路的影响.方法:20μmol/L AOH作用NIH3T3细胞1 h,或用PKA特异性抑制剂10μmol/L H89预处理1 h,再进行20μmol/L AOH刺激实验,同时设溶剂对照组.用免疫荧光和免疫细胞化学染色法检测磷酸化PKA催化亚基表达情况,用免疫细胞化学染色法检测磷酸化CREB表达水平.结果:与溶剂对照组相比,AOH诱导NIH3T3细胞中磷酸化PKA催化亚基和磷酸化CREB水平明显增加(P<0.05);用PKA特异性抑制剂H89预处理,降低了AOH激活的PKA催化亚基和CREB的磷酸化水平.结论:AOH能够激活NIH3T3细胞中PKA-CREB信号转导通路,这为探讨AOH致癌的分子机制提供依据.
- 马俊芬杨璇赵继敏黄幼田杨洪艳郑智敏董子明
- 关键词：互隔交链孢酚蛋白激酶ACAMP反应元件结合蛋白NIH3T3细胞
