江苏省博士后科研资助计划项目(070213C)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 相关作者：李慧常有宏丛郁俞明亮颜志梅更多>>
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- 发文基金：江苏省农业科学院博士后基金江苏省博士后科研资助计划项目江苏省科技基础设施建设计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 早熟砂梨‘翠冠’hmgr基因家族两成员的表达与货架期黑皮病关系的研究被引量：2
- 2009年
- 以砂梨黑皮病易感品种‘翠冠’果实为材料,克隆获得了调控α-法尼烯合成的关键限速酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)基因家族中的两个成员Pphmgr1和Pphmgr2。Pphmgr1开放阅读框为1827bp,编码由609个氨基酸残基组成的蛋白;Pphmgr2开放阅读框为1707bp,编码由569个氨基酸残基组成的蛋白。序列比对结果显示:‘翠冠’PpHMGR1和PpHMGR2与苹果果实的MdHMGR1和MdHMGR2蛋白的同源性分别达到了90%和98%。在采后货架期28～32℃条件下,乙烯受体抑制剂1-MCP可明显抑制果实呼吸速率,减缓乙烯释放,显著降低果皮中α-法尼烯及其氧化产物共轭三烯的含量,减少黑皮病发病率并减轻发病程度。半定量RT-PCR结果显示1-MCP处理后果皮中Pphmgr2的表达受到显著抑制,但是Pphmgr1的表达几乎不受影响。
- 丛郁李慧颜志梅俞明亮常有宏
- 关键词：砂梨黑皮病HMGR1-MCP
- 砂梨2个内切-β-1,4-葡聚糖酶基因cDNA的克隆及其在果实贮藏过程中的表达分析被引量：6
- 2010年
- 为从分子水平上揭示EG基因在早熟砂梨软化过程中的作用机制,该研究以早熟砂梨品种翠冠果肉cDNA为模板,根据NCBI上登录的其他植物内切-β-1,4-葡聚糖酶(Endo-1,4-β-glucanas,EGases)基因编码区设计引物,利用RT-PCR技术,克隆内切-β-1,4-葡聚糖酶基因家族中的2个成员PpEG1和PpEG2的编码区序列,并在此基础上,利用半定量RT-PCR技术,探讨两基因在夏季货架期1-MCP处理条件下翠冠果肉软化过程中的表达情况。结果表明:PpEG1编码区包含1 869个核苷酸,编码1个由622位氨基酸组成的多肽,PpEG2编码区包含1 863个核苷酸,编码1个由620位氨基酸组成的多肽;PpEG1和PpEG2都含有糖基水解酶家族-9(Glycosyl-hydrolases-family-9)活性位点,但PpEG2比PpEG1的C端多1个碳水化合物结合组件(Carbohydrate-binding module,CBM);PpEG1与PpEG2分别位于分子进化树的2个不同发育分枝上;在室温货架期间,翠冠果肉中PpEG1的表达量先上升,贮藏4 d时其表达量最高,后缓慢下降,而PpEG2的表达量开始缓慢上升,在贮藏12 d时出现mRNA的积累高峰;1-MCP对PpEG1和PpEG2的表达不起延缓或促进作用。PpEG1与PpEG2在翠冠果实软化过程中的不同表达规律显示,PpEG1与PpEG2作用于不同的β-1,4-葡聚糖多聚分子底物,且PpEG1和PpEG2的表达均不受乙烯调控。
- 丛郁李慧颜志梅俞明亮常有宏
- 关键词：砂梨基因克隆
- 翠冠梨黑皮病发生规律与AFS基因克隆及其表达研究被引量：4
- 2010年
- 以梨黑皮病易感品种翠冠果实为材料,采用RACE技术克隆α法尼烯合成酶基因(PpAFS)的cDNA全长。PpAFS开放阅读框包括1731个碱基,编码576个氨基酸,相对分子质量为66.26×103。由该基因推测的氨基酸序列具有倍半萜类氨基酸的特征结构:RR(X8)W模式(33～43位氨基酸)和DDxxD模式(326～330位氨基酸)。2℃低温贮藏和1MCP(1甲基环丙烯)处理均能抑制翠冠果皮中PpAFS的表达,减缓α法尼烯合成,降低α法尼烯及其氧化产物共轭三烯的含量,进而推迟黑皮病的发病时间并降低其发病率;在两种措施同时应用情况下,翠冠果实采后42d之内不会发生黑皮病。贮藏于室温(28～32℃)或低温(2℃)的翠冠果实,果皮中共轭三烯含量超过2.0nmol.cm-2,黑皮病就会发生,因此推断该值为黑皮病发生的阈值,环境温度只能起延缓或加速达到这一阈值的作用,而与黑皮病的发生并无直接关系。
- 丛郁李慧颜志梅俞明亮常有宏
- 关键词：砂梨黑皮病基因克隆1-甲基环丙烯
- 成熟砂梨果实木葡聚糖转移酶基因PpXTH1的克隆及其在夏季货架期的表达规律被引量：6
- 2010年
- 木葡聚糖内糖基转移酶（XTH）通过降解细胞壁中半纤维的主要成分木葡聚糖在果实的软化过程中发挥重要作用。为探明XTH基因与砂梨品种翠冠果实软化之间的关系，本研究以翠冠果肉cDNA为模板，采用RT．PCR和RACE方法，克隆获得了编码砂梨XTH基因的全cDNA序列（PpXTH1，1300bp）。序列分析表明，PpXTH1的5’端和3’端非翻译区分别为125bp和293bp，它的开放阅读框为882bp，编码294个氨基酸，推导的PpXTHl蛋白序列含有XTH蛋白的催化活性部位DEIDFEFL。砂梨PpXTH1与其他植物果实中的XTH蛋白具有较高的同源性，其中与苹果MdXTH1的同源性为98．0％；与猕猴桃AdXTH5的同源性为85．0％；与番茄LeXTH4的同源性为67．6％。分子进化树分析表明，PpXTHX与MdXTHl、PeXTHl、AdXTH5、PtrXTH16A同分在一组，而这些XTH蛋白与果实成熟和细胞壁的次生结构代谢密切相关。在夏季货架期，28～32℃条件下，翠冠果肉中PpXTHI的表达量持续上升，贮藏8d时其表达量最高，之后缓慢下降，1-MCP对PpXTH1的表达起延缓作用。以上结果说明本研究所克隆的基因为砂梨XTH基因家族成员，在贮藏软化过程中它的表达受乙烯调节。
- 丛郁刘洪李慧颜志梅俞明亮常有宏
- 关键词：砂梨基因克隆
