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甘蓝型油菜花柄遗传转化体系的创建被引量：2: 2013年; 为获得转基因油菜植株,以甘蓝型油菜品种特选4号花柄为外植体,确定了不定芽分化最佳培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L,并进行了花柄外植体的转化试验,得到了抗卡那霉素(Kan)植株,并对影响转化的一些因素进行了研究。结果表明:卡那霉素对芽再生均具有很强的抑制作用,最佳筛选浓度为15mg/L;花柄外植体在MS+3mg/L 6-BA+1.0mg/L 2,4-D培养基上预培养72h时,经农杆菌(OD600≈0.4)侵染3min后共培养2d,获得了抗卡那霉素并通过PCR鉴定和GUS报告基因检测的转基因植株15株,遗传转化效率为5.19%。; 刘洋徐漫赵德刚; 关键词：油菜花柄外植体

转2mG2-epsps基因水稻种子蛋白质非预期变异分析被引量：1: 2017年; 以转2mG2-epsps基因抗草甘膦水稻为材料,根据实质等同性原则,分析转基因(genetically modified,GM)水稻种子可溶性蛋白含量和组分的非预期变异。结果表明:与非转基因亲本相比,GM水稻种子的总可溶性蛋白含量极显著降低,主要受谷蛋白含量变异影响。但清、球、醇、谷4种蛋白含量的最高变异幅度(9.12%)低于P1和P2两亲本之间的最大差异幅度(14.67%)。说明GM水稻种子的可溶性蛋白含量非预期变异在安全范围内,但营养品质可能与亲本品系存在差异。SDS-PAGE分析发现,GM水稻株系T12和T22分别有12和14个蛋白谱带发生了非预期变异,涉及4种可溶性蛋白的组分,多数表现为含量变化。突出的是,2个GM水稻株系中均新增加了41 ku和56 ku谷蛋白组分,需要进一步通过毒理学分析评价其食品安全性。; 李燕燕赵艳; 关键词：转基因水稻实质等同性

抗草甘膦基因的克隆及在原核表达系统中的功能分析被引量：1: 2012年; 为了克隆抗草甘膦基因并在原核表达系统中分析其抗性水平,利用200μmol/L草甘膦平板从草甘膦严重污染的土壤中筛选到1株抗草甘膦菌株G6PP,经电镜和16SrDNA鉴定为恶臭假单胞菌;以该菌株基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增出5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸酯合成酶(EPSPS)基因,该基因编码440个氨基酸,亚克隆到原核表达载体pEET-28a中构建原核表达载体pET-G6;将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达出46ku的融合蛋白;携带pET-G6质粒的大肠杆菌BL21(DE3)在液体M63培养基中能耐受150μmol/L草甘膦的抑制。本研究结果表明克隆到的G6基因具有一定的抗草甘膦活性,对抗草甘膦作物的培育具有实践意义。; 赵特林朝阳徐晓丽方军沈志成; 关键词：抗草甘膦 RDNA 克隆原核表达

限控基因飘流的生物学措施研究进展被引量：1: 2012年; 转基因作物种植面积逐年增加,到2011年全球转基因作物的种植面积达到1.6亿hm2,较1996年增长了近94倍。随着转基因作物的大面积商业化种植,由此带来的生物安全问题越来越受到人们的关注,其中花粉介导的基因飘流是人们关注的焦点问题之一。探索限控转基因飘流的生物学措施是当前国际上关于生物安全研究的热点和焦点。因此,就目前研究较多的生物学措施如叶绿体转化技术、基因剔除技术、转基因弱化技术、雄性不育技术、种子不育技术、闭花受精和无融合生殖技术、基因拆分技术、可控转基因技术等进行了综述,并对将来的研究方向进行了展望。; 靳茜王志兴王旭静贾士荣; 关键词：生物安全

黑武士大叶醉鱼草茎段愈伤组织的诱导及植株再生: 2013年; 为了建立黑武士大叶醉鱼草的快速繁殖与遗传育种体系,以大叶醉鱼草的茎段为外植体,研究其离体培养及试管苗再生途径。结果表明:愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2.0mg/L 2,4-D+0.2mg/L 6-BA,诱导率为85%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0mg/L TDZ+0.2mg/L NAA,分化率为80%,平均单芽数高于13个;最佳生根培养基为1/2MS+0.5mg/L IBA,生根率为78.7%,移栽成活率为80%。; 刘洋赵德刚; 关键词：茎段愈伤组织诱导植株再生

除草剂2,4-D对土壤微生物类群的影响被引量：4: 2014年; 为了评价除草剂2,4-D对土壤生态系统的影响,采用构建人工微生态的方法,在42d内动态评估供试土壤中微生物类群的变化。结果表明:当2,4-D使用浓度为5mg/kg时,对土壤细菌及放线菌均没有显著影响,对真菌的影响也可以较快地恢复;浓度为25mg/kg和50mg/kg的处理,细菌和真菌总数均表现下降,但细菌的适应性更强;放线菌总数则表现出一定的波动性。2,4-D处理浓度越高,对真菌的抑制作用也越强。因此,建议将土壤中真菌总数作为评估除草剂2,4-D污染土壤生态环境效应的敏感指标。; 韩丽珍赵德刚罗信旭; 关键词：除草剂土壤微生物数量

1株草甘膦降解菌的分离鉴定及特性被引量：4: 2012年; 为利用生物降解草甘膦修复污染土壤,以多年施用草甘膦除草剂的农田土壤为材料,采用富集培养及逐级驯化方法,对长期施用草甘膦的农田土壤中分离得到1株草甘膦高效降解菌进行了研究。结果显示:被分离出的菌株HX-5,能以草甘膦为唯一碳源和氮源生长,对草甘膦的最高耐受浓度为4g/L。形态观察及生理生化特征研究,鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.)。通过单因素试验确定了HX-5菌株生长的最适温度为30℃、最适pH 7.0及无机盐培养基中添加草甘膦的最适起始浓度为1.2g/L,在此条件下培养6d,草甘膦的降解率达74.83%。; 韩丽珍刘飞赵德刚; 关键词：降解率

植物选择标记基因剔除技术研究进展被引量：1: 2013年; 获得无选择标记基因的转基因作物是转基因作物发展的必然趋势。目前剔除选择标记基因的常用方法包括共转化、位点特异性重组、转座子、同源重组等。本文综述了这些常用技术的原理和目前的发展现状,同时对这些技术的特点进行描述,并对植物安全转基因技术发展进行展望,以期推动转基因作物的快速产业化。; 苏月焱王旭静王志兴; 关键词：选择标记基因共转化位点特异性重组转座子同源重组

猪胰岛素启动子序列分析及调控基因在胰腺组织特异性表达验证: 2013年; 通过对不同中国地方猪品种胰岛素基因启动子序列差异分析,可为转基因调控我国小型猪胰腺β细胞功能研究和糖尿病模型制备提供依据。本研究利用PCR从通城猪、广西巴马小型猪和五指山小型猪3个品种猪基因组DNA中扩增猪胰岛素启动子全长,经比对分析获得具有地方猪品种特征的序列,在小鼠胰腺瘤细胞和转基因鼠中验证该序列调控目的基因表达的有效性和特异性。3个地方猪品种间1.5kb长的胰岛素启动子序列无碱基差异,与国外猪品种仅有3个碱基差异;双荧光素酶报告基因检测系统证明该启动子能在胰腺瘤细胞高效启动下游基因表达;转CHOP和UCP2基因小鼠中,2个目的基因在胰腺组织中表达量显著高于肝脏、背肌和肾脏,且胰腺组织中蛋白丰度显著增加。本研究结果表明,从中国地方猪品种中分离的胰岛素启动子能够特异性调控目的基因在胰腺组织中表达,为转基因调控猪β细胞功能的动物模型建立奠定了基础。; 胡炳俊王超群阮进学辛磊磊牟玉莲杨述林李奎; 关键词：地方猪品种转基因鼠胰腺

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国家科技重大专项(2011ZX08010-003)