山东省自然科学基金(ZR2010HM022)
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
- 相关作者：潘敏郁博刘宁肖君刚苏磊更多>>
- 相关机构：青岛大学青岛大学医学院附属医院第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省科技发展计划项目山东省中医药科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阻断NF-κB和ERK通路对黑素瘤细胞增殖及凋亡的影响被引量：4
- 2014年
- 目的研究分别或联合阻断核因子κB(NF-κB)和细胞外信号调节激酶ERK两条信号通路对黑素瘤A375细胞增殖及凋亡的影响。方法将培养的黑素瘤细胞A375随机分为对照组、NF-κB通路抑制剂BMS-345541组、ERK通路抑制剂U0126处理组及BMS-345541+U0126处理组,采用噻唑蓝法(MTT)测定各组细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡率;Western blot检测两试剂处理后细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果 BMS-345541和U0126作用后对A375细胞增殖有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖性(P<0.01),作用时间24h时,BMS-345541+U0126处理组的增殖抑制率为(77.27±2.70)%,明显高于BMS-345541组(35.41±1.38)%及U0126组(30.64±2.86)%,且联合作用具有协同性;BMS-345541组、U0126组和BMS-345541+U0126处理组与对照组相比S期分别降低14.20%,18.40%及22.64%,而凋亡率分别提高24.98%,13.96%及38.91%;BMS-345541和U0126均可降低A375细胞中Bcl-2蛋白的表达,二者联合作用后Bcl-2蛋白的表达显著降低。以上差异均有统计学意义(P<0.01)。结论阻断NF-κB和ERK两条信号通路对A375细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用,两者联合具有协同效应。
- 刘宁肖君刚潘敏郁博
- 关键词：NF-KBERK黑素瘤细胞
- A375细胞外信号调节激酶通路与核因子κB通路的交互作用初探被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨黑素瘤细胞A375细胞外信号调节激酶（ERK）通路与核因子κB（NF-κB）信号转导通路的交互作用.方法 将培养的A375细胞分为对照组、选择性ERK信号通路抑制剂U0126（10 μmol/L、5 μmol/L）处理组和选择性NF-κB通路抑制剂BMS-345541（10 μmol/L、5μmol/L）处理组,分别提取蛋白质和mRNA,用Western印迹、RT-PCR观察U0126抑制ERK通路后,NF-κB P65、p-IκBα蛋白及NF-κB P65mRNA的表达,观察BMS-345541抑制NF-κB通路后ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达.结果 应用10 μmol/L、5μmol/L U0126抑制ERK通路后,胞核NF-κB P65蛋白表达（分别为0.60±0.04、0.56±0.06）均较对照组（1.54±0.15）减少（P＜0.01）,其表达量与药物浓度无显著相关性（P＞ 0.01）;p-IκBα蛋白的表达（0.90±0.05、0.70±0.02）均较对照组（0.61±0.03）增加（P＜0.01）,两药物浓度组之间的表达量差异有统计学意义（P＜ 0.01）;NF-κB P65 mRNA的表达（0.79±0.05,0.75±0.04）均较对照组（0.86±0.05）减少（P＜0.01）.应用10 μmol/L BMS-345541抑制NF-κB通路后,ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达（0.73±0.07、0.75±0.09、1.51±0.02）较对照组减少（P＜0.01）,BMS-345541浓度为5μmol/L时,ERK1/2 、p-ERK 1/2蛋白和ERK1 mRNA的表达（0.94±0.11、0.99±0.04、1.62±0.03）较对照组的差异无统计学意义（均P＞0.05）.结论 NF-κB通路和ERK通路在黑素瘤A375细胞中存在交互作用.
- 秦绪艳臧运书潘敏袁梦姝郁博吴惠惠
- 关键词：黑色素瘤细胞外信号调节MAP激酶类信号转导
- ERK在黑素瘤细胞和人正常黑色素细胞中的表达
- 2014年
- 目的:研究ERK1/2和P-ERK1/2在人正常黑色素细胞和黑素瘤细胞A375中表达强度的差异,并分析其意义。方法:从健康青年人阴茎包皮中分离并培养原代黑色素细胞;传代培养黑素瘤细胞A375;Western-blot检测两种细胞中ERK1/2和P-ERK1/2的表达强度,并进行统计比较。结果:ERK1/2、P-ERK1/2在黑素瘤细胞A375的表达强度均明显高于人正常黑色素细胞,差异均具有统计学意义(t值分别为17.75、104.39,P值均<0.01)。结论:黑素瘤的发生、发展可能与MAPK/ERK通路有关。
- 张雪英陈官芝潘敏
- 关键词：ERK1
- 皮肤黑色素瘤细胞中TGF-βRⅠ型和Ⅱ型受体表达的研究被引量：3
- 2015年
- 目的探讨转化生长因子β受体(TGF-βR)Ⅰ、Ⅱ型在皮肤黑色素瘤细胞中的表达情况。方法应用反转录-实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法,对TGF-βRⅠ、Ⅱ型的mRNA及其蛋白在人皮肤黑色素瘤A375细胞和人正常黑素细胞中的表达进行检测。结果 A375细胞中TGF-βRⅠ、Ⅱ型的mRNA和蛋白表达均显著低于正常人黑素细胞。结论在黑色素瘤细胞的TGF-β/Smad信号通路中出现TGF-βR表达的下调,可能是皮肤黑色素瘤发病机制之一。
- 郁博张斌苏磊潘敏陈宏泉
- 关键词：黑色素瘤黑素细胞
- 皮肤黑素瘤细胞3种Smad的表达
- 2015年
- 目的 探讨Smad2、Smad3、Smad4在皮肤黑素瘤细胞中的表达情况。方法 应用反转录-实时荧光定量PCR方法和蛋白印迹方法,分别检测人皮肤黑素瘤A375细胞和人正常黑素细胞中Smad2、Smad3、Smad4的mRNA及蛋白表达。结果 A375细胞中Smad2、Smad3、Smad4的mRNA和蛋白表达均显著低于人正常黑素细胞（t=2.361-4.214,P〈0.01）。结论在黑素瘤细胞的转化生长因子β（TGF-β）/Smad信号通路中Smad2、Smad3、Smad4均出现表达下调,可能参与了皮肤黑素瘤发病。
- 郁博张斌苏磊潘敏臧运书陈宏泉
- 关键词：黑素瘤黑素细胞转化生长因子ΒSMAD蛋白质类
- MEK/ERK通路阻断剂对黑素瘤细胞增殖的影响被引量：5
- 2012年
- 目的研究MEK/ERK通路阻断剂U0126对黑素瘤细胞A375增殖的影响,并探讨其作用机制。方法噻唑蓝法(MTT)测定U0126和传统抗癌药物达卡巴嗪(DTIC)分别及联合作用时对黑素瘤细胞A375的增殖抑制作用;流式细胞术检测不同药物处理组的细胞周期及凋亡情况;Western blot检测U0126处理后细胞p-ERK1/2的表达。结果药物作用24h时U0126单一用药组对细胞的增殖抑制率高于DTIC单一用药组(P<0.01);联合应用U0126和DTIC对细胞的增殖抑制率明显高于DTIC用药组(P<0.01);U0126组与对照组相比,G1期细胞比例数提高了21.83%(P<0.01),凋亡率提高了13.96%(P<0.01),联合用药组与对照组相比G1期比例增加了26.64%(P<0.01),凋亡率亦明显提高了25.20%(P<0.01);不同浓度U0126处理细胞后,细胞的p-ERK1/2均明显降低(P<0.01)。结论 MEK/ERK通路阻断剂U0126可显著抑制黑素瘤细胞的增殖,其机制可能与降低p-ERK1/2的表达从而参与细胞周期调控有关;联合U0126用药有望成为治疗黑素瘤新的有效途径。
- 刘宁肖君刚潘敏
- 关键词：MEK/ERKU0126达卡巴嗪
