国家自然科学基金(30571582)
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
- 相关作者：王心如顾爱华张炜夏彦恺孙炀更多>>
- 相关机构：南京医科大学江苏省人民医院南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 西维因致男性工人精子DNA损伤的机制初探被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨西维因农药暴露与男性工人精子DNA损伤的关系,并探讨其可能的机制。方法:选择某农药厂西维因生产男工31名为暴露组;该厂行政区男性员工36名为内对照组;同地区男性行政人员22名为外对照组。检测3组人群精子DNA损伤、精浆超氧化物歧化酶(SOD)活性及精子活性氧(ROS)含量。选用培养的小鼠精母细胞(GC2-spd细胞)进行体外功能学验证,在不同浓度西维因染毒条件下,分析细胞存活率、凋亡及SOD活性,ROS含量的变化。结果:与内、外对照组相比,暴露组男性精子DNA断裂损伤显著增加(P<0.05)、精浆SOD活性降低及精子ROS增加(P<0.05)。相关性分析的结果显示,精子DNA损伤与精浆SOD的活性负相关(r=-0.53,P<0.001),与精子ROS水平呈正相关(r=0.32,P=0.002)。小鼠精母细胞随西维因染毒剂量增加细胞存活率显著下降,凋亡增多并且细胞SOD减少及ROS增加(P<0.05)。结论:西维因可影响男性精液质量,其可能的机制是通过氧化应激导致精子DNA的损伤。
- 胡凡顾爱华吉贵祥王心如
- 关键词：西维因精子DNA损伤氧化应激
- 男性FASL-844基因多态性与特发性无精子症及严重少精子症发病风险的研究被引量：3
- 2007年
- 目的：研究FASL-844位点基因多态性在中国南方汉族男性人群中的分布，探讨其与特发性无精子症及严重少精子症发病风险的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法，分析184例特发性无精子症及严重少精子症患者与236例正常生育男性FASL-844位点的基因型及等位基因频率，分析该基因多态性与特发性无精子症及严重少精子症之间的关系。结果：不育组与正常生育组FASL-844CT和TT基因型分布差异有显著性（P=0．024；P=0．008）。携带FASL-844TT基因型个体罹患特发性无精子症或严重少精子症的风险是CC基因型个体的2．76倍（95％CI：1．20～6．35）；将携带CC和CT基因型的个体合并，携带TT基因型的个体罹患特发性无精子症或严重少精子症的风险是（CC＋CT）基因型个体的2．90倍（95％CI：1．28～6．58）。结论：FASL-844基因多态性可能是中国南方汉族男性特发性无精子症及严重少精子症的遗传易感因素之一。
- 王巍陆宁霞夏彦恺王心如张炜宋宁宏魏敏苏建堂
- 关键词：无精子症严重少精子症基因多态性FASL
- 人尿中的3-苯氧基苯甲酸的气相色谱-质谱联用测定法被引量：3
- 2007年
- 目的建立一种灵敏、可靠的气相色谱-质谱联用(GC-MS)测定方法,以检测人尿中拟除虫菊酯类农药的主要代谢产物3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)的浓度。方法尿液中加入内标2-苯氧基-苯甲酸(2PBA),以正己烷为提取溶剂,在酸性条件下采用液一液萃取法提取目标化合物3-PBA,然后在碱性条件下去除溶于有机相的杂质,目标化合物则进入水相,再在酸性条件下以正己烷重新提取水相中的目标化合物,氮吹干正己烷后,用N,(特丁基二甲基硅烷基)-N-甲基三氟乙酰胺(MTBSTFA)对目标化合物进行衍生化处理,利用GC-MS对衍生化产物进行分离检测,以分析尿液中3-PBA的浓度。结果尿液中3-PBA在0.05～30μg/L浓度范围内呈良好线性,相关系数为0.9974;最低检测限为0.01μg/L,日内相对标准偏差(RSD)为2.4%～3.8%,日间RSD为8.7%～10.8%;相对回收率为94.3%～120.6%。结论该方法经济、可靠,且灵敏度比其他类似方法高,可以快速准确地检测人尿液中拟除虫菊酯类农药主要代谢产物3-PBA浓度,从而预测该类农药在中国普通人群中的暴露水平,并为拟除虫菊酯类农药的安全性评价提供依据。
- 韩燕周靖平夏彦恺乔善磊赵人琤金念祖王心如
- 关键词：除虫菊酯类苯甲酸
- 氰戊菊酯体外对大鼠精子运动能力的影响被引量：10
- 2007年
- 目的:观察氰戊菊酯(Fen)对大鼠精子运动能力的直接作用。方法:收集7只健康成年雄性SD大鼠附睾尾精子,用Fen进行体外染毒,剂量分别为1、4、16、64μmol/L,以Fen溶剂(二甲亚砜)作为对照组。在染毒1、2、4 h后用计算机辅助精子分析(CASA)系统对精子运动速度[曲线运动速度(VCL)、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、鞭打频率(BCF)]和运动方式[前向性(STR)、直线性(LIN)]进行检测,观察Fen对离体大鼠精子运动能力的影响。结果:Fen染毒1、2 h后,可见64μmol/L组的VSL、BCF、LIN和STR与对照组相比差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。染毒4 h后,除上述指标外,VCL在16、64μmol/L组与对照组相比也呈现出明显的下降(P<0.01)。时间-效应关系分析显示,Fen(16、64μmol/L)染毒4 h组与染毒1 h组相比,VCL和STR显著下降(P<0.01或P<0.05)。结论:Fen可作用于大鼠附睾尾精子,并对大鼠精子运动有直接毒性效应。
- 宋玲王玉邦孙宏顾爱华孙炀王心如
- 关键词：氰戊菊酯精子运动能力计算机辅助精子分析体外研究
- 邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露致仔鼠睾丸膜联蛋白A5的表达差异被引量：3
- 2008年
- 背景:国内外关于邻苯二甲酸二丁酯导致雄性生殖系统畸形发生机制的探讨多集中于邻苯二甲酸二丁酯干扰胚胎期睾丸睾酮合成途径的研究,对其基因表达调控的因素及功能蛋白质之间相互干扰的网络效应却并不明了。蛋白质组学能够从整体水平反映蛋白质组分,并筛选功能相关蛋白。目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯胚胎期暴露对胎鼠睾丸蛋白表达谱的影响,分离并鉴定差异表达蛋白质。设计、时间及地点:随机对照动物实验,实验于2006-08/2007-10在南京医科大学动物实验中心及南京医科大学生殖医学重点实验室完成。材料:将孕鼠随机分为实验组和对照组,每组5只。妊娠14～18d。方法:实验组按800mg/(kg·d)染毒孕鼠,对照组予大豆油5mL/d。妊娠21d取出胚胎大鼠睾丸,提取总蛋白,进行二维凝胶电泳分离和图像分析,筛选出的差异蛋白质点利用质谱技术进行鉴定,并选择关键蛋白进行验证。主要观察指标:①两组蛋白的电泳差异比较。②酶切,MALDI-TOF分析,数据库检索,生物信息学检索结果。③两组蛋白Western blotting检测及免疫组织化学染色结果。结果:共筛选出33个差异表达蛋白(t≥2.831,P<0.05),其中14个通过质谱分析和SwissProt蛋白数据库检索得到鉴定,包括膜联蛋白A5、过氧化物酶6、泛素羧基末端水解酶L1等。运用Western blotting,验证了膜联蛋白A5在实验组表达量明显高于对照组,通过免疫组织化学方法,发现膜联蛋白A5主要定位在胎鼠睾丸Leydig细胞中。结论:实验运用蛋白质组学方法,建立了邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露雄性仔鼠睾丸与正常仔鼠睾丸蛋白质差异表达谱系,鉴定出14个蛋白点,确定了膜联蛋白A5在胎鼠睾丸的定位。
- 居小兵沈百欣徐子程沈华马隆蒋荣江张炜王心如
- 关键词：邻苯二甲酸二丁酯睾丸质谱
