国家自然科学基金(30571588)
- 作品数：4 被引量：11H指数：3
- 相关作者：陈雯庞雅琴林忠宁魏青马儒林更多>>
- 相关机构：中山大学深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外细胞转化试验研究进展被引量：5
- 2007年
- 正常人体细胞从增生、异型增生、原位癌发展到浸润转移癌,要经过细胞永生化、分化异常和恶性转移等过程。而在体外细胞水平则需经历永生化和恶性转化这两个过程。近年来随着端粒酶研究的不断深入,人们对细胞的永生化以及细胞转化有了更清晰的认识,细胞转化试验在致癌机制以及肿瘤研究等领域中得到广泛应用。人体细胞与啮齿类动物细胞在永生化和细胞转化两个阶段均存在着一定差异,本文从端粒及端粒酶的调控、永生化和恶性转化条件等方面对上述两种细胞进行比较,并探讨细胞转化模型在毒理学中的应用价值。
- 庞雅琴陈雯
- 关键词：人体细胞细胞永生化细胞转化
- 端粒酶在人胚肾上皮细胞转化中的作用被引量：4
- 2006年
- 目的:利用原代人胚肾上皮细胞转化模型阐明端粒酶在细胞癌变过程中的作用。方法:用逆转录病毒介导的基因导入法,使人端粒酶催化亚基(humantelomerasecatalyticsubunit,hTERT)、HRas癌基因、猿猴病毒40(simianvirus40,SV40)编码的早期抗原在原代人胚肾上皮细胞中稳定地表达,观察细胞的生长特性、染色体畸变率以及细胞转化特征。结果:端粒酶的激活虽然能延长细胞的寿命,但不能使细胞永生化。如果细胞同时表达端粒酶和SV40编码的大T抗原(largeTantigen,LT),细胞就能获得永生化。在此永生化细胞株中导入HRas癌基因以及SV40编码的小T抗原(smallTantigen,ST),细胞发生恶性转化,表现为在软琼脂上形成克隆并在裸鼠皮下形成肿瘤。与原代细胞相比,永生化细胞株的染色体畸变率无改变,而恶性转化细胞的畸变率明显增加。此外在转化细胞和几种肿瘤细胞中表达阻抑人端粒酶的特异性siRNA,能显著地抑制肿瘤细胞的生长、诱导细胞凋亡并减少软琼脂上形成的克隆数目。结论:细胞永生化是癌变过程的必要阶段,端粒酶的激活不仅是细胞永生化的重要环节,而且在维持肿瘤细胞生长中起重要的作用。
- 甘德秀马儒林庞雅琴林忠宁魏青吴大伟庄志雄陈雯
- 关键词：肿瘤端粒末端转移酶细胞衰老细胞培养
- 蛋白磷酸酶2A及其在细胞转化中的作用
- 2008年
- 由特异蛋白激酶和蛋白磷酸酶共同参与的蛋白质可逆性磷酸化是细胞生物学过程的重要调节机制,蛋白磷酸酶2A是真核生物主要的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,具有复杂的亚基构成,参与细胞的各种调节机制,包括信号转导途径、细胞周期进程、DNA复制、基因转录和蛋白质翻译等,其功能受多种层次的调控。最新的研究揭示了PP2A的三维晶体结构以及甲基化在全酶组合中的作用,同时对PP2A在细胞转化方面的功能与机制有了更深入的阐释。
- 赖延东陈雯
- 关键词：蛋白磷酸酶2A细胞转化甲基化肿瘤抑制基因
- 癌基因高表达人上皮细胞转化模型的构建及应用被引量：5
- 2008年
- 目的构建癌基因高表达人支气管上皮细胞模型并应用于致癌物诱导细胞恶性转化活性的检测。方法在永生化人支气管上皮细胞株16HBE中依次导入人端粒酶催化亚基（hTERT）、癌基因H—Ras^V12。或c—Myc或空白载体，构建细胞株16HBETR、16HBETM和16HBETV。检测所构建细胞株的生物学特性如细胞形态、细胞生长、染色体畸变等指标。用已知致癌物硫酸镍（NiSO4）和二氢二醇环氧苯并（a）芘（BPDE）多次染毒，利用软琼脂试验及荷瘤试验检测化学物诱导细胞转化的活性。结果经过端粒酶活性测定以及蛋白印迹验证上述转基因16HBE细胞株均构建成功。癌基因H—Ras和c—Myc的表达分别使细胞的增殖加速30．3％和10．4％，但是细胞染色体的畸变率没有发生改变。癌基因高表达细胞株只在软琼脂中形成少数背景克隆，但不能在裸鼠皮下形成肿瘤。BPDE诱导16HBETR、16HBETM细胞发生恶性转化的间期分别为5周、11周，比对照组细胞16HBETV的加周分别提前了15周和9周；而硫酸镍诱导16HBETR、16HBETM细胞转化的间期分别为11周、14周，比对照组细胞的32周分别提前了21周和18周。结论癌基因高表达的细胞转化模型可大大缩短试验间期，有望应用于环境致癌物的筛查及化学致癌机制的研究。
- 马儒林庞雅琴李文学肖勇梅魏青李道传赖延东林育纯王庆杨萍陈丽萍唐石伏林忠宁陈雯
- 关键词：上皮细胞
