国家自然科学基金(30571587)
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
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- 利用大鼠卵泡体外培养方法研究氯化镉对卵泡发育和卵母细胞成熟的影响
- 利用我们新近建立的大鼠腔前卵泡体外培养方法研究氯化镉对卵泡发育和卵母细胞成熟的影响及其机制,探讨该方法用于雌性生殖毒物鉴定和机制研究的可行性。结果显示1.2μg/ml以上剂量CdCL.可以影响卵泡生长、分化和孕激素生成。...
- 万旭英朱玉平马玺里朱江波郑怡文刘珍侯娟王飞许桂风张天宝
- 关键词：腔前卵泡体外培养氯化镉
- 文献传递
- 双酚A对大鼠卵泡体外生长和卵母细胞成熟的影响
- 目的观察双酚A(BPA)对大鼠卵泡体外生长发育及卵母细胞成熟的影响。方法采用大鼠卵泡体外长期培养方法,从12～14 d龄的雌性大鼠卵巢中机械性分离腔前卵泡(140～170μm),隔天分别换一半含BPA 0,50,100和...
- 夏仪王卓张天宝
- 关键词：双酚A生殖毒性卵泡体外培养
- 文献传递
- 纳米级二氧化钛对体外大鼠腔前卵泡生长发育成熟的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:采用大鼠腔前卵泡体外培养方法研究纳米级二氧化钛(TiO2)对大鼠卵泡发育及卵母细胞成熟的影响,揭示纳米TiO2有无雌性生殖毒性,为其安全性评价提供依据。方法:机械性分离大鼠腔前卵泡,单个卵泡在96孔板中连续培养。将卵泡随机分为5组:3个25nmTiO2(12.5、25和50μg/ml)组、阴性对照组、微米级TiO2对照组。培养第10天诱导排卵,观察卵泡发育和卵母细胞成熟情况。结果:随着纳米级TiO2剂量增加,卵泡存活率、有腔形成率及卵丘-卵母细胞复合体(COCs)排出率呈下降趋势(P<0.05);与阴性对照组相比,微米级TiO2组对卵泡发育与卵母细胞成熟无明显影响;25μg/ml以上剂量纳米级TiO2组卵泡形态学明显异常,卵泡存活率及有腔形成率明显下降;50μg/ml纳米级TiO2可使处于成熟阶段的卵母细胞数减少。结论:25μg/ml剂量以上25nmTiO2可以抑制体外大鼠腔前卵泡的生长发育与卵母细胞成熟,而微米级TiO2在相同剂量下对卵泡的生长发育和卵母细胞的成熟无明显影响。提示纳米级TiO2有不同于微米级TiO2的毒作用性质,可能有雌性生殖毒性,应引起关注。
- 侯娟万旭英王飞许桂凤刘珍张天宝
- 关键词：卵泡卵母细胞纳米级二氧化钛毒性试验
- 双酚A对大鼠卵泡体外生长和卵母细胞成熟的影响被引量：6
- 2013年
- 目的观察双酚A(BPA)对大鼠卵泡体外生长发育及卵母细胞成熟的影响。方法采用大鼠卵泡体外长期培养方法,从12～14d龄的雌性大鼠卵巢中机械性分离腔前卵泡(140～170μm),隔天分别换一半含BPA 0,50,100和150μmol·L-1的培养液,连续培养10d。倒置相差显微镜下观察卵泡发育的形态,计算卵泡存活率、有腔卵泡形成率和卵丘-卵母细胞复合体(COC)排出率,测定卵泡直径,显微镜下观察卵泡的排卵情况以及卵母细胞成熟情况,计算生发泡(GV)、生发泡破裂(GVBD)和第一极体(PB)的形成率;分别于培养2,6和10d时采用磁性酶联免疫法测定培养基中雌二醇和孕酮的分泌量。结果正常对照组卵泡在10d培养过程中,大多数正常对照组卵泡都经历了腔前卵泡、有腔卵泡以及成熟卵泡阶段。与正常对照组相比,BPA 100和150μmol·L-1组的卵泡存活率、有腔卵泡形成率、COC排出率、GVBD率以及PB率均明显降低(P<0.05)。BPA 50μmol·L-1组培养10d时的卵泡直径以及培养6和10d时BPA100和150μmol·L-1组卵泡和卵母细胞的直径均明显降低(P<0.05);与正常对照组相比,BPA 100和150μmol·L-1组卵泡膜细胞和颗粒细胞的增殖受到明显抑制(P<0.05)。与正常对照组相比,BPA 100和150μmol·L-1组在培养6和10d时雌二醇和孕酮含量均显著减少(P<0.01)。结论 BPA 100和150μmol·L-1可抑制大鼠卵泡的生长和卵母细胞的成熟。
- 夏仪王卓张天宝
- 关键词：双酚A生殖毒性卵泡体外培养
- 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯及其代谢产物MEHP对体外大鼠卵泡发育的影响被引量：10
- 2010年
- 目的利用大鼠腔前卵泡体外培养方法研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)及其代谢产物邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)对卵泡体外发育的影响。方法机械性分离大鼠腔前卵泡,单个卵泡在96孔板中连续培养。MEHP设2.5、5、10、20、40和80μg/ml6个浓度,DEHP设33.7、67.5、125、250、500、1000nmol/L6个浓度,同时设二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照和阴性对照。每组16～20个卵泡,3次重复。隔天换1/2液,在培养第10天诱导排卵,观察卵泡体外发育情况。结果DEHP对第11天卵泡存活率、有腔形成率、异常卵泡形成率和卵丘-卵母细胞复合体(COCs)排出率无明显的影响,与溶剂对照组差异无显著性(P>0.05)。第2天暴露>10μg/ml以上剂量的MEHP48h后,第11天卵泡存活率明显下降(54.76%±3.37%),与对照组(91.57%±1.32%)比较差异有显著性(P<0.05),剂量与卵泡存活率之间存在一定相关性(R2=0.92);COCs排出(24.99%±3.95%)明显减少,与对照组(52.78%±8.45%)比较差异有显著性(P<0.05);异常卵泡出现率(45.24%±3.37%)明显升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);暴露>20μg/mlMEHP有腔形成率(46.18%±1.67%)减少,与对照组(85.91%±5.03%)比较差异有显著性(P<0.05),且有明显剂量-反应关系。结论MEHP可以抑制体外大鼠腔前卵泡的生长发育。
- 万旭英朱玉平马玺里朱江波郑怡文侯娟王飞刘珍张天宝
- 关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯卵泡发育环境毒理
- 卵巢卵泡体外培养系统及其在生殖毒理学中的研究进展被引量：1
- 2009年
- 万旭英张天宝
- 关键词：体外培养
- TERE1基因在小鼠胚胎双前肢正常发育和异常发生中的表达
- 2010年
- [目的]观察移行上皮反应基因(TERE1)在小鼠胚胎双前肢正常发育和异常发生中的表达,探讨TERE1在短肢发生中的作用。[方法]ICR小鼠受孕后,将其随机分为实验、对照两组,各64只。于孕第10天(GD10),经口灌胃一次给予实验组孕鼠80 mg/kg的全反式视黄酸(atRA)、对照组孕鼠给予等体积的大豆油,并分别于GD11～GD18取两组胎鼠的双前肢。于GD12取下小鼠胚胎双前肢,以atRA诱导,培养72 h后收获肢。利用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测TERE1在各样本中的表达情况。[结果]在整体动物试验中,atRA可诱致小鼠胚胎明显的短肢畸形;在体外试验中,atRA可诱致小鼠胚胎前肢多种骨骼发育异常。TERE1在正常、异常肢及培养肢芽中均有表达。在正常和异常肢中,TERE1的表达模式一致;除GD15外,实验肢中TERE1的表达均低于相同时点正常肢的表达水平。在体外培养肢,各组的表达量随培养时间的延长而增加。实验组在培养24 h,atRA各剂量组的表达量均低于对照组(P<0.05);培养48 h和72 h,在2.5×10-6 mol/L～1.0×10-5 mol/L剂量范围有随剂量增加表达量增加的趋势,但在高剂量组(2.0×10-5 mol/L)表达又下降。[结论]TERE1与小鼠胚胎前肢的发育过程有关,atRA在诱致小鼠前肢异常发生中可引起TERE1 mRNA的表达改变。
- 朱勇飞朱江波王飞张天宝红凌
- 关键词：小鼠胚胎前肢发育
- 利用大鼠卵泡体外培养方法研究氯化镉对卵泡发育和卵母细胞成熟的影响
- 利用我们新近建立的大鼠腔前卵泡体外培养方法研究氯化镉对卵泡发育和卵母细胞成熟的影响及其机制,探讨该方法用于雌性生殖毒物鉴定和机制研究的可行性。结果显示1.2μg/ml以上剂量CdCL2.可以影响卵泡生长、分化和孕激素生成...
- 万旭英朱玉平马玺里朱江波郑怡文刘珍侯娟王飞许桂风张天宝
- 关键词：腔前卵泡体外培养氯化镉
- 文献传递
- 小鼠腔前卵泡体外培养方法的建立被引量：4
- 2009年
- 目的建立可供毒理学研究的小鼠腔前卵泡体外培养方法。方法采用机械方法分离出生后12～14天(C57B1/6JxCBA/Ca)小鼠卵巢内直径为100～130μm的腔前卵泡,96孔板单个卵泡连续培养12天后诱导排卵16h,观察卵泡发育、激素分泌和卵子形成,并将体外卵母细胞的成熟情况(IVG)与体内卵母细胞的生长情况(IVM)进行比较,以判断体外培养方法是否成功。结果分离完整卵泡率为89.74%(376/419);培养12天卵泡存活率为96.81%(364/376),有腔形成率为48.94%(184/376);卵泡和卵母细胞直径显著增加。诱导排卵后卵丘细胞-卵母细胞复合体排出率为56.38%(212/376);培养卵泡经历从腔前卵泡到卵母细胞成熟和极体排出的形态学变化,也有部分卵泡不发生腔样结构改变。体外培养卵泡分泌E2和P激素与体内分泌特征一致。IVG组4.61%(10/217)卵母细胞不能恢复成熟[停止在生发泡期(GV期)],76.50%(166/217)停止减数分裂在生发泡破裂期(GVBD期),18.89%(41/217)卵母细胞停止在第2次减数分裂(MII期)(PB);而IVM组1.24%(3/241)的卵母细胞不能恢复成熟(停止在GV期),45.23%(109/241)停止减数分裂在GVBD,53.53%(41/241)卵母细胞停止在MII期(PB);卵母细胞染色体核型完整,无染色体数目和结构异常。结论本研究建立的小鼠腔前卵泡体外培养方法基本成功,可作为卵泡发育生理研究和毒理学研究的模型。
- 万旭英朱玉平马玺里朱江波侯娟刘真王飞张天宝
- 关键词：腔前卵泡体外培养小鼠
