中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2007T11)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：林学政沈继红张镱徐国英朱启忠更多>>
- 相关机构：国家海洋局第一海洋研究所中国海洋大学山东大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：天文地球生物学更多>>
- 分子伴侣共表达对低温脂肪酶Lip-837异源可溶性表达的影响被引量：7
- 2011年
- 将南极嗜冷菌Moritellasp.2-5-10-1的低温脂肪酶基因Lip-837克隆到表达载体pColdⅢ中,成功构建了重组质粒pColdⅢ+Lip-837,并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。SDS-PAGE实验结果表明,实现了该基因在E.coli的异源表达,且其表达量达到细胞总蛋白的39%;但表达产物主要以包涵体形式存在。将该重组质粒pColdⅢ+Lip-837分别与不同分子伴侣质粒,如pGro7,pKJE7,pG-Tf2,pTf16在E.coli BL21(DE3)中实现了共表达。SDS-PAGE结果表明,4种分子伴侣均能明显提高目的蛋白—脂肪酶Lip-837的可溶性表达,但不同分子伴侣提高可溶性蛋白表达的程度有所不同,如仅表达pColdⅢ+Lip-837时,低温脂肪酶可溶性蛋白占总表达量的比例为5%;当与分子伴侣pGro7共表达时,对脂肪酶可溶性蛋白表达提高的比例最大,其可溶性酶蛋白的比例可占总表达量的42%;分子伴侣质粒pG-Tf2促进可溶性表达的效果较差,其可溶性酶蛋白的比例仅占其总表达量的16.6%。
- 崔硕硕张镱林学政沈继红
- 关键词：低温脂肪酶分子伴侣共表达可溶性表达
- 极地适冷菌Pseudoalteromonas sp. QI-1产适冷蛋白酶发酵条件的优化被引量：3
- 2011年
- 对极地适冷菌Pseudoalteromonas sp. QI-1产适冷蛋白酶的发酵条件进行优化。结果表明:菌株QI-1的最适生长和产酶温度均为5℃;最佳接种量为1%;发酵培养基的最适初始pH和最佳装样量分别为5和10%;盐度为2%时对菌株的生长和产酶最为有利;麸皮和醋酸钠分别为最佳N源和C源;添加0.75%酪蛋白时菌株QI-1胞外蛋白酶的活性最高;10 mmol/L Mg2+和0.5%Tween-80有利于产酶。正交试验结果表明:菌株Pseudoalteromonassp. QI-1产蛋白酶较佳培养基配方(g/L)为麸皮5,酵母粉2.5,酪蛋白3,MgCl2.6H2O 3,KCl 1.5;发酵液比酶活为166.20 U/mL,较优化前提高了约56%。
- 徐国英林学政王能飞朱启忠
- 关键词：适冷菌发酵适冷蛋白酶
