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聚类分析在苯中毒患者肿瘤相关基因表达谱研究中的应用: 2006年; 目的:探讨聚类分析方法在苯中毒基因表达谱研究中的应用价值。方法:从7组正常对照及苯中毒患者外周血提取总RNA,逆转录合成cDNA后,体外转录合成生物素标记的mRNA,与含有2780个cDNA克隆的微阵列肿瘤相关基因芯片杂交,经荧光染料标记后,用芯片扫描仪进行图像扫描,经M IDA S分析软件将扫描的图像信息转化为数据,对样本和基因做聚类分析。结果:重度苯中毒和再障患者的基因表达谱和轻、中度中毒的表达谱明显不同,且具有相似功能的基因具有相似的表达模式。结论:聚类分析方法能根据基因表达谱,将样本进行疾病类型分类,将基因进行功能分类,为苯中毒的早期诊断和预后评估的生物标记物研究提供科学依据。; 徐持华张国良夏颖李玲毕勇毅; 关键词：聚类分析基因表达基因芯片苯中毒

用cDNA微列阵技术探讨苯中毒相关的DNA复制及损伤修复基因表达谱的改变被引量：10: 2005年; 目的筛选与苯中毒有关的DNA复制及损伤修复基因。方法选取慢性苯中毒患者和无苯接触的健康人各7例配对,提取外周血白细胞总RNA。在反转录cDNA时,用Cy3,Cy5两种激发波长荧光分别标记两组样本cDNA探针。将各对探针混合后与含141条DNA复制及损伤修复的人类基因表达谱芯片杂交、扫描,分析杂交结果。结果共筛选出差异表达的基因25条,其中16条基因表达上调,9条基因表达下调,主要包括有DNA复制基因如PRIM2A,ORC1L等;DNA合成、重组及修复基因如POLK;DNA损伤信号基因修复蛋白和DNA连接酶如RECQL,PRKDC,G22P1,ERCC3,ERCC1,CRY1,CHES1,BRCA2,APEX等;重组蛋白质如RECQL;其他DNA合成再重组和修复蛋白质如SKIV2L,RBMS1,SON,SET等。结论苯中毒患者外周血白细胞的DNA复制及损伤修复基因与正常人相比存在差异性表达,为进一步筛选苯中毒生物标志物提供了依据。; 陈丽毕勇毅陶宁王红夏颖马强; 关键词：苯中毒 DNA损伤修复基因基因表达谱

基因芯片检测与苯中毒相关的信号传导通路中基因的差异表达被引量：3: 2005年; 目的检测苯中毒信号转导相关基因的表达,探讨苯引起的血液系统损害的发病机理。方法应用含4265条信号转导基因的cDNA芯片检测7例苯中毒患者和7例无苯接触的正常人的外周血白细胞基因表达谱,观察其在基因表达谱上的差异。进行了基因表达谱聚类分析。结果在4265条基因中,存在明显差异表达的基因176条。至少在六张芯片结果中有显著性表达上调的基因35个,主要包括有PTPRC、STAT4、IFITM1等。至少在5张芯片结果中有显著性表达下调的基因45个,主要包括有ARHB、PPP3CB、CDC37等。结论微矩阵基因芯片在检测苯中毒信号转导相关基因的改变时,具有快速、高通量、高灵敏度等特点,细胞信号转导的障碍在苯中毒发病中起一定的作用。; 王红毕勇毅陶宁汪春红赵职卫夏颖; 关键词：基因芯片苯中毒信号传导通路基因

用cDNA微阵列分析苯中毒肿瘤相关基因表达谱被引量：4: 2005年; 目的运用cDNA微阵列技术对苯中毒肿瘤相关基因表达谱进行分析研究。方法对7例接苯中毒工人及7例正常对照者全血中淋巴细胞分别进行RNA抽提,纯化后的mRNA配对进行逆转录制备杂交探针,利用7张含有2780个cDNA克隆的微列阵肿瘤相关基因芯片进行杂交,杂交信号用扫描仪进行扫描,然后将图像转化为基于荧光强度的数字信号,随后进行数据分析和处理。结果在7张肿瘤相关基因中共发现特异性差异表达基因44个,其中GRO1、TGFBR3、LYN等16个基因表达上调,FOSB、DJ1、MCT1等28个基因表达下调。结论苯暴露患者肿瘤相关基因的表达异常,提示其可能为致白血病的关键基因,在苯致白血病中起着重要的作用;采用基因芯片检测技术有利于全面揭示苯中毒肿瘤相关基因表达模式,快速高效地发现新的研究目标和基因治疗途径。; 夏颖张合喜毕勇毅陈小慧赵职卫王红; 关键词：苯中毒肿瘤基因表达谱 CDNA克隆癌基因

cDNA微阵列结合聚类分析探讨苯中毒免疫相关基因表达谱的改变被引量：8: 2005年; 目的通过基因表达谱研究寻找苯中毒发病机制中参与苯中毒免疫调控通路的苯中毒免疫相关基因。方法应用含2779条免疫相关基因的cDNA芯片检测7例苯中毒患者和7例正常人的外周血白细胞基因表达谱,观察其在基因表达谱上的差异。进行了基因表达谱聚类分析和比较;筛选有统计学意义的差异表达的免疫相关基因。结果存在差异表达的基因共有38条。在2张以上芯片结果中表达上调的基因10个,主要包括有CD59、TRA@、MCP等。在2张以上芯片结果中表达下调的基因14个,有HLA-DMB、HLA-DQA1、HLA-DPB1、ITGB2、PFC等基因。聚类分析揭示38条基因的基因表达谱特征存在关联。结论通过有统计学意义的差异表达的苯中毒免疫相关基因,推测免疫调控通路在苯中毒发病中可能扮演重要角色。基因芯片技术是分析不同研究对象之间基因差异表达的有效手段。; 王红毕勇毅陶宁汪春红夏颖张玲; 关键词：CDNA微阵列聚类分析苯中毒免疫相关基因基因表达谱

P450CYP4F3表达对氢醌诱导MOLT4细胞凋亡的研究: 2014年; 目的研究氢醌对体外培养条件下MOLT4细胞的毒性作用及细胞色素P450CYP4F3基因表达的意义。方法流式细胞术ANNEXINV-FITC加碘化丙啶(PI)双染定量检测细胞凋亡率和坏死率的变化;RT-PCR方法检测CYP4F3在mRNA表达水平,比较不同处理组之间的差异。结果加入不同浓度氢醌培养0、4、8、12、16 h后,流式细胞术检测结果发现,不同浓度氢醌作用后,细胞凋亡率明显高于空白对照组,差异有显著性(P<0.01),氢醌诱导细胞凋亡的最佳时间是8h,而随着作用时间延长,氢醌浓度为200μmol/L时,细胞坏死率明显增高;另外发现氢醌浓度为120μmol/L时,细胞凋亡率随着时间的延长逐步增加,8 h达到高峰,随后开始下降;CYP4F3基因在mRNA表达水平与细胞凋亡率一致。结论体外培养条件下,CYP4F3基因的表达上调可能对氢醌诱导MOLT4细胞凋亡起促进作用,并存在一定量-效与时-效关系。; 胡晶吴春江刘杨铭张正斌毕勇毅郭润正胡悦君; 关键词：氢醌细胞色素P450 凋亡坏死

接触苯再生障碍性贫血肿瘤相关基因表达谱的研究被引量：1: 2005年; 目的　利用c DNA芯片技术对接苯再障患者肿瘤相关基因表达谱进行研究。方法　对再障患者及正常对照组全血细胞进行总RNA提取,将纯化后的m RNA逆转录制备杂交探针,与含2 780个c DNA克隆的肿瘤相关基因巩芯片进行杂交,杂交信号用Gen III Microarray Scanner扫描仪进行扫描,然后将图像转化为基于荧光强度的数字信号,用Array Vision(Imaging Research,L td.)软件对数掘进行处理和分析。结果　发现共有11个基因出现差异性表达,其中4个基因表达上调,包括L YN、IFITMI、TGFBR3、GR0 1,7个基因表达下调,分别为DOC1、MCT- 1、GR0 2、DJ- 1、FOSB、MAP3K8、IFI30。结论　接苯再障工人肿瘤相关基因的异常表达,提示其可能为致再障的关键基因,在接苯致再障中起着重要的作用。; 夏颖张合喜毕勇毅张玲陈小慧赵职卫; 关键词：苯中毒再障表达谱芯片癌基因

彗星试验检测叔丁基对苯二酚对苯骨髓毒性的保护作用被引量：1: 2005年; 目的　用彗星试验检测叔丁基对苯二酚(tert- butylhydroquinone,t BHQ)对苯诱导的骨髓细胞毒性的保护作用。方法　体外培养的大鼠骨髓细胞行t BHQ(10 0 μm ol/ L)预处理12 h后以不同浓度(0、5、10、15、2 0 mm ol/ L)苯分别染毒2、4、6 h。用彗星试验检测骨髓细胞的DNA损伤,计算DNA迁移率和迁移度。结果　随苯染毒浓度的增加,染毒时间的延长,骨髓细胞DNA迁移率和迁移度增加。t BHQ预处理后5、10、15、2 0 mm ol/ L 苯染毒骨髓细胞的DNA迁移率和迁移度均减低(P<0 .0 5 )。结论　苯可诱导骨髓细胞DNA损伤,并呈现一定的时间、剂量依赖性;叔丁基对苯二酚对苯诱导的骨髓细胞毒性有保护作用。; 赵职卫熊永山陈小慧黄萍萍毕勇毅; 关键词：叔丁基对苯二酚苯骨髓毒性彗星试验

叔丁基对苯二酚对苯诱导的大鼠骨髓细胞毒性的保护作用被引量：6: 2006年; 目的探讨叔丁基对苯二酚(tBHQ)对苯诱导的骨髓细胞毒性的保护作用。方法体外培养的大鼠骨髓细胞随机分为对照组和tBHQ预处理组,对照组:以不同浓度(0、5、10、15、20mmolL)苯分别染毒骨髓细胞2、4、6h;tBHQ预处理组:骨髓细胞染苯前先行tBHQ(100μmolL)预处理12h。单细胞凝胶电泳法检测骨髓细胞DNA损伤,流式细胞仪检测骨髓细胞凋亡率,2,6二氯靛酚还原法测定苯染毒前两组骨髓细胞内依赖还原型辅酶ⅠⅡ醌氧化还原酶(NQO1)的活力。结果对照组中随苯染毒浓度的增加、染毒时间的延长,骨髓细胞DNA损伤增强,细胞凋亡率增加。tBHQ预处理组中5、10、15、20mmolL苯染毒骨髓细胞的DNA迁移率和迁移度低于同浓度、同时间点的对照组,差异有统计学意义(P<0.05);15、20mmolL苯染毒2h及10、15、20mmolL苯染毒4h和5、10、15、20mmolL苯染毒6h骨髓细胞的凋亡率较同浓度、同时间点的对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);tBHQ预处理组骨髓细胞内NQO1活力(1.62±0.16mgpro-1·min-1)高于对照组(0.95±0.08mgpro-1·min-1),差异有统计学意义(P<0.01)。结论苯可诱导体外培养的大鼠骨髓细胞DNA损伤和细胞凋亡,并呈现一定的时间、剂量依赖性;tBHQ可诱导骨髓细胞NQO1活力增强,对苯诱导的骨髓细胞毒性有保护作用。; 赵职卫毕勇毅潘伯群张玲陈小慧欧阳静萍马强; 关键词：叔丁基对苯二酚苯细胞毒性骨髓细胞

肿瘤坏死因子受体相关因子及蛋白表达对氢醌诱导HL-60细胞凋亡的影响被引量：1: 2007年; 目的研究体外培养条件下肿瘤坏死因子受体相关因子及蛋白(TTRAP)表达对氢醌诱导人HL-60细胞凋亡的影响,以探讨TTRAP表达与氢醌诱导HL-60细胞凋亡的关系。方法流式细胞术ANNEXINV-FITC加碘化丙啶(PI)双染定量检测细胞凋亡率和坏死率的变化;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测TTRAP在mRNA水平的表达量,比较不同处理组之间的差异。结果加入不同浓度氢醌培养0、4、8、12h后,流式细胞术检测结果发现,不同浓度氢醌作用后,细胞凋亡率明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01),氢醌诱导细胞凋亡的最佳浓度为200μmol/L,而当氢醌浓度为250μmol/L时,细胞坏死率明显增高,浓度为20μmol/L氢醌诱导的细胞凋亡,随着作用时间的延长,凋亡率明显增高,作用8h达高峰,而后细胞凋亡率下降,坏死率增加。作用8h时,随着氢醌浓度的增加,细胞凋亡率明显增加,TTRAP基因在mRNA表达水平也相应明显增加;当浓度增加到250μmol/L时,细胞坏死率增加,TTRAP基因表达量下降。结论体外培养条件下,TTRAP的表达上调可能对氢醌诱导HL-60细胞凋亡起促进作用,并存在剂量-效应与时间-效应关系。; 张正斌胡晶毕勇毅赵职卫陶宁燕红祝忠玲刘杨铭李丽; 关键词：氢醌细胞凋亡

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国家自然科学基金(30170796)

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