国家自然科学基金(G30300133)
- 作品数：8 被引量：29H指数：3
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- 高血压患者抗AT1受体自身抗体与白细胞介素-4,干扰素-γ的关系探讨被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨原发性高血压患者抗AT1受体自身抗体与白细胞介素(IL)-4、干扰素(IFN)-γ的关系,以初步了解抗AT1抗体的产生机制。方法:用ELISA方法检测76例原发性高血压患者血清抗AT1抗体、IL-4和IFN-γ的水平,比较抗AT1抗体阳性和阴性组之间IL-4和IFN-γ水平的差异。结果:76例患者中,抗AT1受体抗体阳性和阴性者分别为42和34例,抗体阳性组血清IL-4水平显著高于抗体阴性组[(13.21±0.92)ng/L∶(11.64±0.77)ng/L,P<0.01];而IFN-γ在抗体阳性组与抗体阴性组之间差异无统计学意义[(14.68±2.53)ng/L∶(15.45±1.48)ng/L,P>0.05]。结论:抗AT1受体抗体阳性高血压患者血清IL-4水平高于抗体阴性组患者,Th2细胞功能亢进可能是原发性高血压患者抗AT1受体抗体产生的机制之一。
- 陈芬廖玉华周子华陈霄孙艳香王敏郭和平
- 关键词：高血压AT1受体自身抗体白细胞介素-4干扰素-Γ
- NF-κB和Jak-STAT信号途径参与血管紧张素Ⅱ介导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖效应被引量：7
- 2006年
- 目的进一步探讨JakSTAT信号途径在血管紧张素Ⅱ介导的主动脉平滑肌细胞增殖效应的作用。方法培养大鼠主动脉平滑肌细胞并行免疫组织化学鉴定,用血管紧张素Ⅱ以不同时间梯度刺激传代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞,采用BrdU法测定细胞增殖,裂解细胞后提取细胞总蛋白,分别经免疫共沉淀、Western印迹和细胞免疫荧光化学等方法分析胞内NFκB和Jak/STAT信号分子激活及表达的情况,行不同组间并与阴性对照组做对比。结果在6～30h的平滑肌细胞增殖实验中,6、12h时间段增值最明显;其中12h时AngⅡ组490nm处吸光度值(0.590±0.029)显著高于AG490+AngⅡ组(0.381±0.019),PDTC+AngⅡ组(0.481±0.024),氯沙坦+AngⅡ组(0.519±0.026)和SerumFree组(0.30±0.02),P<0.01。Western印迹显示AngⅡ组中NFκB及磷酸化的Jak2、STAT1分别在5、15、60min表达明显达高峰;免疫荧光则表明NFκB及STAT1分子随时间梯度可逆的由胞浆转至胞核,在AngⅡ刺激15min组中STAT1表达水平比对照组(P<0.01)及刺激60min高(P<0.05)。结论AngⅡ能导致VSMC增殖,同时NFκB和磷酸化的Jak2,STAT1表达增加并随刺激时间梯度改变。因此可说明在NFκB和Jak/STAT信号通路激活参与了血管紧张素Ⅱ导致的主动脉平滑肌细胞增殖作用。
- 孙艳香魏宇淼廖玉华张海燕朱峰王敏郭和平
- 关键词：信号转导平滑肌细胞增殖
- AT_1受体短肽主动免疫自发性高血压大鼠对血压和心血管重塑的影响被引量：7
- 2005年
- 目的:观察血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型(AT1)受体细胞外的不同肽段主动免疫自发性高血压大鼠(SHR)对血压、心脏及血管的影响。方法:2月龄SHR ,随机分成5组,以合成的AT1受体胞外3个多肽片段分别免疫,其余2组为氯沙坦灌胃组( 10mg/ (kg·d) ,标记为SHR L)和对照组(SHR C)。同龄Wistar大鼠免疫干预同SHR ,对照组用免疫佐剂。ELISA法检测抗体滴度,大鼠尾动脉血压计测量血压。试验结束检测心脏及左心室重量、肠系膜三级动脉中层及内径和组织病理变化、心肌超微病理变化。结果:SHR 2月龄血压开始升高,所有免疫组动物均产生针对特定短肽的抗体。ATR12 181免疫组SHR收缩压于免疫后一个月降低,并持续至实验结束( 14 5 4 2±8 4 6mmHg ,n =7) ,与SHR C( 197 0 0±7 70mmHg ,n =7,P <0 0 5 )相比明显降低,与SHR L( 139 2 8±17 19mmHg ,n =7,P >0 0 5 )相比无显著性差异;而ATR12 185和ATR10 0 14免疫组SHR收缩压无明显变化。与SHR C相比,ATR12 181免疫组心脏/体重比( 4 6 6±0 5 0mg/gvs 5 16±0 11mg/g ,P <0 0 5 )和左心室/体重比( 3 6 4±0 4 5mg/gvs 4 19±0 0 7mg/g ,P <0 0 5 )均显著降低;而ATR12 181免疫组与SHR L心脏/体重比( 4 4 1±0 6 0mg/g)及左心室/体重比( 3 5 0±0 31mg/g)相比无显著性差异。
- 李留东廖玉华周子华魏芬王敏王彬魏宇淼
- 关键词：自发性高血压大鼠血压主动免疫氯沙坦
- 血管紧张素Ⅱ1型受体胞外第二环肽抗体对大鼠血管平滑肌细胞质游离钙水平的影响被引量：3
- 2006年
- 目的观察血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1受体)细胞外第二环肽抗体对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)细胞质游离钙水平的影响。方法采用酶联免疫吸附测定法检测高血压患者血清中抗AT1受体抗体,亲和层析法提取阳性血清中的AT1受体细胞外第二环肽抗体。同时应用AT1受体胞外第二环肽主动免疫大鼠并提取抗体。将血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),患者及大鼠的AT1受体胞外二环肽抗体分别刺激钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载培养原代大鼠VSMC,观察荧光强度变化来检测细胞质游离钙水平变化。结果患者及大鼠血清中提取的AT1受体第二环肽抗体均刺激培养VSMC使细胞质游离钙水平升高,作用与AngⅡ类似。进一步实验发现抗体的激动效应能够被AT1受体胞外第二环肽的抗原表位序列及AT1受体拮抗剂氯沙坦阻断。结论针对AT1受体胞外第二环肽抗体具备激动效应,通过激动AT1受体刺激细胞质钙离子浓度增高,提示该抗体在高血压发病机制中起重要作用。
- 朱峰廖玉华魏宇淼陈明周子华王敏
- 关键词：高血压抗体细胞质
- 血管紧张素1型受体自身抗体对大鼠血管平滑肌细胞细胞质游离钙水平的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:观察难治性高血压患者血清中血管紧张素1型受体(AT1)的自身抗体对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)细胞质游离钙水平的影响。方法:应用AT1的胞外第2环作为抗原,采用ELISA方法检测22例难治性高血压患者血清中AT1自身抗体,提纯难治性高血压患者血清中的AT1自身抗体。用细胞免疫荧光染色方法检测该抗体与AT1的亲和性。培养大鼠主动脉VSMC,应用钙离子的荧光探针Fluo-3/AM负载原代VSMC,应用共聚焦显微镜检测细胞荧光强度变化来反映细胞内游离钙水平的变化。将该患者血清、提纯AT1自身抗体、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)分别作用于VSMC,观察荧光强度变化来检测VSMC细胞质游离钙水平变化。结果:22例难治性高血压患者中有10例(45.5%)患者AT1自身抗体阳性,明显高于非难治高血压组(12.5%,P<0.05)。提纯的AT1自身抗体能够与VSMC膜表面AT1特异性结合。并且该抗体能够刺激VSMC,使得胞内游离钙水平增高。该抗体具有与AngⅡ类似激动效应,并能够被AT1拮抗剂洛沙坦阻断。结论:AT1胞外第2环肽的抗体能够与AT1特异结合并且模拟AngⅡ的激动作用,促进VSMC胞内游离钙水平升高,在难治性高血压患者高血压发病机制中起着重要作用。应用AT1拮抗剂洛沙坦能够有效地阻断该抗体的效应。
- 朱峰廖玉华陈明魏宇淼王敏
- 关键词：高血压自身抗体血管紧张素1型受体钙离子血管平滑肌细胞
- 血管紧张素II介导的大鼠血管平滑肌细胞STAT1激活与核转位被引量：5
- 2007年
- 目的检测血管紧张素II(Ang II)介导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖过程中信号转导和转录活化因子-1(STAT1)的激活与核转位。方法本文采用Western印迹、非同位素凝胶电泳(EMSA)和免疫荧光染色的方法,观察Ang II刺激大鼠主动脉VSMC前后,细胞中STAT1的活化状态与定位。结果VSMC经Ang II干预后,胞内磷酸化的STAT1(p-STAT1)蛋白表达增加(P<0.01),达峰后随时间梯度逐渐下降,Ang II干预15 min后检测到胞核内有蛋白-DNA复合物形成。这一反应可被血管紧张素II 1型受体(AT1)阻滞剂Losartan以及Jak2抑制剂AG490抑制(P<0.01)。免疫荧光染色结果也显示Ang II干预后p-STAT1主要在胞核内表达。结论Ang II可以通过和AT1受体结合,激活Jak/STAT通路,在Ang II介导的大鼠VSMC增殖过程中发挥作用。
- 张海燕廖玉华魏宇淼孙艳香朱峰王敏郭和平
- 关键词：血管平滑肌细胞信号转导信号转导和转录活化因子
- AT_1受体主动免疫对自发性高血压大鼠血压及心脏重塑的影响被引量：1
- 2005年
- 目的 观察血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型 (AT1)受体细胞外的不同肽段主动免疫对自发性高血压大鼠 (SHR)血压及心脏的影响。方法 2月龄SHR 35只 ,随机分成 5组 ,其中 3组以合成的AT1受体胞外 3个多肽片段分别免疫 ,其余为氯沙坦灌胃组 (10mg·kg-1·d-1,标记为SHR -L)和对照组 (SHR -C)。同龄Wistar大鼠免疫干预同SHR ,对照组用免疫佐剂。ELISA法检测抗体滴度 ,大鼠尾动脉血压计测量血压。实验结束检测心脏及左心室重量、心肌组织病理变化及超微病理变化。结果 2月龄SHR血压开始升高 ,所有免疫组动物均产生针对特定短肽的抗体。ATR12 181免疫组SHR收缩压于免疫后 1个月降低 ,并持续至实验结束 ,与SHR -C组相比明显降低 ,与SHR -L组相比无显著性差异(P >0 0 5 ) ;而ATR12 185和ATR10 0 14免疫组SHR收缩压无明显变化。与SHR -C相比 ,ATR12 181免疫组SHR心脏重量 体重和左心室重量 体重均显著降低 (P <0 0 5 ) ;而ATR12 181免疫组与SHR -L组心脏重量 体重及左心室重量 体重相比无显著性差异 (P >0 0 5 )。Wistar大鼠各组免疫前、后均产生相应抗体 ,收缩压无明显变化 ,心脏未见病理变化。结论 用ATR12 181主动免疫SHR ,可降低SHR血压 ,减轻心脏重量 ,逆转心脏重塑 ;ATR12
- 李留东廖玉华周子华魏芬王敏王彬魏宇淼
- 关键词：SHR心脏重塑WISTAR大鼠主动免疫
- 原发性高血压患者中抗血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体所致大鼠主动脉平滑肌细胞增殖及胞内信号研究被引量：3
- 2008年
- 目的在妊高征和恶性高血压患者血清中检测到抗血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体(AT_1RAb)的存在,同时有研究表明该自身抗体有类似血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的激动样作用。本文探讨原发性高血压患者血清中该自身抗体是否也具有类似AngⅡ的激动样效应及胞内信号机制。方法大鼠主动脉细胞培养及鉴定。同时将收集的20例高血压病人血清经硫酸铵沉淀粗提、免疫亲和层析法纯化,ELISA 检测其滴度后以1:40刺激细胞,并设立不同的处理组用BrdU法观察细胞增殖情况。将 AT_1RAb 刺激后的细胞裂解提取总蛋白,经Western 印迹方法分析胞内 JAK-STAT 信号分子激活及表达状况。结果在0～24 h 的平滑肌细胞增殖实验中,AT_1RAb 组12 h 时间段增值明显,其450 nm 处吸光度值(0.236±0.012)显著高于 AG490+AT_1RAb 组(0.175±0.009),氯沙坦+AT_1RA 组(0.119±0.006)和空白对照组(0.127±0.006,P<0.01)。Western 印迹显示 AT_1RAb 组中磷酸化的 JAK2、STAT1和 STAT3分别较空白对照组明显增强,同时,其表达可被AT,R阻滞剂氯沙坦和 JAK2特异性拮抗剂 AG490明显抑制。结论高血压病人血清中 AT_1RAb 确有类似血管紧张素Ⅱ致平滑肌细胞增殖的激动样效应,并且在该效应中伴有 JAK-STAT信号通路的活化。
- 孙艳香廖玉华魏宇淼张海燕王敏朱峰
- 关键词：细胞增殖信号机制
