国家自然科学基金(30300265)
- 作品数：6 被引量：52H指数：5
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- 配饵中不同大豆浓缩蛋白含量对中华绒螯蟹消化酶活力的影响(英文)被引量：5
- 2006年
- 研究了大豆浓缩蛋白作为饵料蛋白源对中华绒螯蟹幼蟹消化酶活力的影响,初步探讨了中华绒螯蟹对饵料蛋白源的内在适应机理。根据中华绒螯蟹的营养需求,用大豆浓缩蛋白替代鱼粉作为蛋白源配制成6种近似等蛋白等能的饵料,其中大豆浓缩蛋白在饵料中的含量分别为0、11%、22%、33%、44%和56%(分别替代鱼蛋白质量的0、18.64%、37.93%、56.90%、77.19%和100%),对照饵料全部以鱼粉作为蛋白源。用上述6种饵料喂养中华绒螯蟹50 d后,测定蟹肝胰腺各种消化酶活力。结果表明:随着饵料中大豆浓缩蛋白含量的升高,胃蛋白酶和胰蛋白酶活力均呈降低之势。当大豆浓缩蛋白含量达到44%时,与全鱼粉对照组相比,胃蛋白酶和胰蛋白酶活力显著性降低(P<0.05);同时,淀粉酶稍呈升高之势,而纤维素酶则稍呈降低的趋势;A/T比例呈显著上升的趋势,当大豆浓缩蛋白含量达44%时,与对照组有显著性差异,说明河蟹对植物蛋白有很强的适应性。
- 李二超陈立侨蔡永久顾顺樟洪美玲张璐刘超
- 关键词：大豆浓缩蛋白中华绒螫蟹消化酶
- 三种抗氧化剂对氯化镉所致河蟹精子DNA损伤的保护作用被引量：4
- 2007年
- 采用单细胞凝胶电泳技术与CASP软件检测和分析了3种抗氧化剂(VC,VE和Zn2SO4)对氯化镉所致河蟹离体精子DNA损伤保护作用的量效关系。以5mmol.L-1氯化镉处理河蟹精子DNA,表征DNA损伤程度的4个参数(L tail,TailDNA,TM,OTM)值与空白组相比显著增加,表明该氯化镉浓度下已对河蟹精子的DNA造成严重损伤。在此基础上,将河蟹精子加入到分别含有不同浓度抗氧化剂的氯化镉(5mmol.L-1)溶液中,研究不同浓度抗氧化剂对精子DNA的保护作用。其中VC的浓度分别为:400μmol.L-1,1mmol.L-1,3mmol.L-1,5mmol.L-1;VE的浓度分别为:50μmol.L-1,100μmol.L-1,200μmol.L-1,400μmol.L-1;Zn2+的浓度分别为:400μg.mL-1,1mg.mL-1,2mg.mL-1,4mg.mL-1。结果发现,上述3种抗氧化保护剂均对精子DNA具有一定的保护效果,其中VE和Zn2+添加组均随其浓度的增加,保护作用不断增强,当VE达到400μmol.L-1,Zn2+达到4mg.mL-1时,均表现出很好的保护效果;然而,VC在低浓度时保护作用随其浓度增加而加强,至3mmol.L-1时细胞拖尾率最低,即保护效果最佳,但在5mmol.L-1时细胞拖尾率又明显增加,即精子DNA又受到严重损伤,表明VC对精子DNA的保护作用具有一定的浓度范围。此外,与VC和Zn2+的保护作用相比,VE在400μmol.L-1浓度时表现出更好的保护效果。
- 范丽君曲迪贾林芝李艳东赵云龙王群
- 关键词：氯化镉彗星实验DNA损伤单细胞凝胶电泳技术
- 红螯螯虾雄性生殖系统的生化组成及精子代谢被引量：11
- 2005年
- 通过对红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)雄性生殖系统各组织的生化测定和乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、延胡索酸还原酶(FR)的活性测定发现,红螯螯虾精荚(含精子)中的糖类和蛋白质含量丰富,分别为18.264和12.846 mg/g(FW),总脂含量相对较低,仅为1.613 mg/g(FW);精子(含初级精荚壁)亦以糖类和蛋白质含量较高,分别达到5.227和8.475 mg/g(FW),总脂含量因过低而未能测出,但精子的上述物质含量均显著低于精荚。酶活性测定发现,LDH酶活性以精巢、输精管和射精管较高,其中又以前输精管最高,为1 426.258 U/(g protein),可能与其功能相关;精子和精荚LDH活性极显著低于输精管,含量分别为87.375和36.215 U/(g protein),两者间差异显著;FR活性在精荚和精子中较高,两者分别达到19.945和15.732 U/(mg protein),显著高于生殖系统其他组织器官,但均未检测到SDH酶活性,故其SDH/FR的比值趋向于0。而生化物质的组织化学以及酶组化定位的结果进一步证实了上述结果。此外,LDH同工酶酶谱结果证实,精荚仅含有一条厌氧型LDHA编码亚基占优势的同工酶谱带。所有实验结果表明,红螯螯虾精子代谢的方式以厌氧型为主,其代谢底物主要为糖类,为厌氧型糖酵解,其代谢底物由次级精荚壁提供。
- 丁银娣王群李恺陈东华
- 关键词：红螯螯虾雄性生殖系统生化成分同工酶
- 红螯螯虾雄性腺的组织学研究
- 应用组织切片、扫描电镜技术研究了红螯螯虾雄性腺的结构与功能.红螯螯虾雄性腺一对,呈不规则索状,位于射精管内侧表面,其长度和宽度与虾体的性腺指数呈一定的正相关;腺体由许多实心腺泡组成,可明显划分为增殖期、合成期和分泌期的3...
- 丁银娣王群范丽君
- 关键词：红螯螯虾组织学
- 文献传递
- HgCl_2与CdCl_2对河蟹精子DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测研究被引量：7
- 2007年
- 采用单细胞凝胶电泳技术,研究了HgCl2和CdCl2对河蟹(Eriocheir sinensis)精子DNA损伤的影响.HgCl2和CdCl2各设置6个相同的浓度梯度,分别为0mmol/L,0.01mmol/L,0.05mmol/L,0.1mmol/L,1mmol/L,5mmol/L,处理温度为37℃(水浴),处理时间为1h;SCGE的检测指标为DNA拖尾长度和DNA损伤率.结果表明,对照组DNA未受损伤,在电场中核DNA几乎不泳动,染色后呈圆形的荧光团,无拖尾现象;各处理组精子DNA均不同程度受损,电泳染色后均呈现彗星状荧光团,且随着HgCl2和CdCl2浓度的升高,河蟹精子DNA迁移距离和损伤率亦随之增加,DNA损伤程度与其浓度之间存在明显的"剂量-效应"关系.此外,本实验亦证实SCGE可用于河蟹精子DNA损伤的检测.
- 范丽君周忠良陈东华赵云龙孙菊香王群
- 关键词：河蟹单细胞凝胶电泳氯化汞氯化镉精子DNA
- 伊红、PI染色法检测中华绒螯蟹活精子率被引量：10
- 2007年
- 以伊红和PI两种染色法,结合光学显微镜和流式细胞仪对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子的存活率进行评价研究。将新鲜精子和60℃水浴处理致死精子以不同比例混合,配成含有死精子比例为0%、20%、40%、60%、80%、100%的6个浓度梯度,将其作为"理论死亡率",分别用上述两种染色法进行检测。结果表明:伊红能有效区分死、活精子,其实测精子死亡率与"理论死亡率"之间具有明显的相关性,相关系数为R=0.98(P<0.01);经PI染色后通过流式细胞仪分析发现,其实测精子死亡率与"理论死亡率"同样具有极好的相关性,相关系数为R=0.99(P<0.01)。对伊红和PI两种染色法进行相关性比较分析,认为PI染色流式细胞仪检测法在检测中华绒螯蟹精子活力方面更具灵敏性,结果更可靠。
- 孙菊香范丽君贾林芝厉小波陈东华曲迪王群
- 关键词：中华绒螯蟹精子活力碘化丙啶流式细胞仪
- 冷冻保护剂及预冷时间对河蟹精子体外冷冻保存的影响被引量：17
- 2008年
- 本文以甘油、二甲亚砜(DMSO)为冷冻保护剂,采用两步降温法,以精子存活率和DNA损伤程度为检验其冷冻效果的评价指标,研究了冷冻保护剂和预冷时间对河蟹Eriocheir sinensis精子冷冻保存效果的影响。胰蛋白酶消化法获得河蟹游离精子,液氮冷冻保存8h以上,精子保存密度为107个/mL,伊红染色法检测精子存活率,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测精子DNA损伤。实验共设置10个组,分别为不同浓度的单一冷冻保护剂(每种保护剂的体积百分比分别为5%、10%、12.5%、15%)和两种保护剂组合(两种保护剂在同一实验组中的体积百分比含量均为5%、10%)。结果显示,12.5%甘油的保存效果最佳,精子存活率达到62.60%。在此基础上,以10%甘油作为冷冻保护剂,设置5、10、20、30、40min 5个时间梯度,研究了预冷时间对精子冷冻保存效果的影响。结果显示预冷时间的长短对精子冷冻保存效果的影响显著,当预冷时间低于20min时,精子大量死亡,且精子DNA严重损伤;当预冷时间超过30min时,精子存活率明显提高,精子DNA损伤明显减弱。
- 陈东华李艳东贾林芝厉小波王立人曲迪王群
- 关键词：河蟹精子冷冻保存冷冻保护剂二甲亚砜单细胞凝胶电泳
- 伊红、PI染色法检测中华绒螯蟹活精子率
- 以伊红和 PI 两种染色法,结合光学显微镜和流式细胞仪对中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精子的存活率进行评价研究。将新鲜精子和60℃水浴处理致死精子以不同比例混合,配成含有死精子比例为0%、20%、40...
- 孙菊香范丽君贾林芝厉小波陈东华曲迪王群
- 关键词：中华绒螯蟹精子活力碘化丙啶流式细胞仪
