河北省医学科学研究重点课题(20110221)
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- PTEN siRNA对多发性骨髓瘤细胞周期和侵袭力的影响及其分子机制
- 2011年
- 目的探讨PTEN基因对RPMI8226细胞增殖、细胞周期和侵袭力的影响及其分子作用机制。方法应用PTEN siRNA转染RPMI8226细胞,封闭内源性PTEN mRNA表达。MTT法检测细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡;Transwell小室实验检测细胞侵袭活性;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测mRNA水平变化,Western印迹检测蛋白水平变化。结果 PTEN siRNA能明显抑制RPMI8226细胞PTEN mRNA及蛋白表达。MTT结果显示,转染后4 d,与NS-siRNA组相比,PTEN-siRNA组细胞生存率为(141.55±8.34)%(P<0.01)。细胞周期分析显示PTEN-siRNA转染RPMI8226细胞48 h后,与未转染细胞相比,处于G0/G1期细胞比例升高,G2/M期和S期细胞比例降低,凋亡峰显示凋亡的细胞比例减少。PTEN-siRNA转染RPMI8226细胞后24 h,未转染组、NS-siRNA转染组和PTEN-siRNA转染组黏附于下室面的细胞数量分别为:49.33±7.63、47.17±7.76和79.50±11.89,NS-siRNA和PTEN-siRNA组相比,差异显著(P<0.01)。转染PTEN siRNA后凋亡相关基因Survivin mRNA及蛋白表达水平增加,Caspase-3/-7 mRNA及蛋白活性表达水平减低。FAK mRNA MMP-2,MMP-9 mRNA p-FAK蛋白表达水平升高。结论转染PTEN siRNA能够促进RPMI8226细胞增殖及侵袭能力,抑制细胞凋亡。
- 王素云潘崚郝洪岭王超李燕杨洁王瑞仓李杰袁军
- 关键词：多发性骨髓瘤PTEN基因干扰RNA
