安徽省高等学校优秀青年人才基金(2007jq1079)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
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- 人Prohibitin 2哺乳动物细胞株的转染表达与定位的初步研究被引量：4
- 2010年
- 目的构建带FLAG标签的人类野生phb2(prohib-itin2)表达载体,将其转染至HEK293T细胞检测其表达,转染至COS7细胞观察phb2蛋白在细胞内的定位。方法以含有人phb2全长cDNA序列的质粒为模板,通过带有FLAG标签上游引物,用PCR方法扩增phb2全长序列,然后插入真核表达载体pCDNA3中构建pCDNA3-FLAG-phb2表达载体,将构建的质粒转染至HEK293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测;转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位。结果成功构建了pCDNA3-FLAG-phb2表达载体,转染表明此表达载体在HEK293T细胞中能够有效表达,在COS7细胞中phb2呈斑点状主要在胞质内分布,细胞核中未见到明显的表达。结论实验结果为进一步了解phb2的功能提供了一定的基础。
- 武标刘晓颖范礼斌邢昕朱恒锐汪云飞
- 关键词：基因表达转染
