国家自然科学基金(00510497)
- 作品数：3 被引量：19H指数：1
- 相关作者：历俊华万虹张绍东陈刚王忠诚更多>>
- 相关机构：北京市神经外科科研究所中国科学院首都医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 施万细胞和神经干细胞在PLGA支架中共培养的扫描电镜观察被引量：18
- 2006年
- 目的扫描电镜观察施万细胞和神经干细胞在生物可降解材料(乙交酯-丙交酯)共聚物(Poly(lactide-co-glycolide acid),PLGA)支架中的生长状态,探讨施万细胞、神经干细胞与 PLGA取向支架的细胞亲和性。方法体外培养大鼠神经干细胞和施万细胞,待细胞生长良好,移植接种至PLGA支架上,培养9d后行扫描电镜观察。结果施万细胞与神经干细胞在PLGA支架表面贴附,形态正常,生长良好。迁出神经球的神经干细胞分化成多种形态的细胞紧贴PLGA表面, 部分细胞形态类似神经细胞。结论施万细胞和神经干细胞在PLGA支架中生长良好,PLGA对施万细胞及神经干细胞具有良好的细胞亲和性。
- 李德志万虹扬飞历俊华陈刚屈雪孙异临王身国王忠诚
- 关键词：施万细胞神经干细胞PLGA支架亲和性扫描电镜
- 大鼠脑出血移植施万细胞的实验研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨施万细胞(SCs)移植于大鼠脑出血部位对神经再生的影响。方法体外培养SCs,5'溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后移植于脑出血模型大鼠的脑出血部位,不同时间处死动物,免疫组织化学双染检测BrdU/髓鞘碱性蛋白(MBP)和BrdU/生长相关蛋白43(GAP43)的表达。结果SCs移植1周后至13周,脑内可见BrdU/MBP双染阳性细胞;移植后第12周可见BrdU和GAP43阳性细胞,海马部位GAP43阳性细胞尤其多见。结论移植的SCs参与髓鞘形成和神经再生。
- 张绍东历俊华万虹
- 关键词：施万细胞髓鞘碱性蛋白生长相关蛋白-43
- 体外血清预培养促进神经干细胞增殖(英文)
- 2006年
- 背景:神经干细胞的临床应用前景广阔,寻找多种方法体外促进神经干细胞的增殖和分化为今后的发展方向。目的:介绍一种省时且经济的神经干细胞的培养方法。设计:观察对比实验。单位:北京市神经外科研究所。材料:选择4只孕14天Wistar大鼠,常温常湿环境饲养,体质量(180±20)g,均购自中国医学科学院动物所(实验动物许可证号码:SCXK1100-0006)。DMEM/F12(1∶1)以及B27购自Gibco公司;碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子购自PeproTech公司;巢蛋白单克隆抗体、胶质纤维酸性蛋白多克隆抗体、半乳酸脑苷多克隆抗体和微管相关蛋白2单克隆抗体购自Chemicon公司。胎牛血清购自Hyclone公司。方法:实验于2004-05/2004-10在北京市神经外科研究所损伤修复室完成。将Wistar大鼠脱臼处死,每次取4只胎鼠,将其脑组织置于Hank’s液中,解剖显微镜下剥离软脑膜及血管,眼科剪剪碎脑组织并收集细胞于2个离心管中离心,弃上清液。①根据给予血清预培养与否将细胞分成血清预培养组及对照组。血清预培养组细胞加入含100g/L胎牛血清DMEM培养液,培养48h后换含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、B27的DMEM/F12培养液;对照组细胞中直接加含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、B27的DMEM/F12培养液,37℃,体积分数为0.05的CO2培养箱培养1周。通过相差显微镜观察血清预培养组对照组培养48h后神经干细胞的生长情况。②用100g/L胎牛血清诱导分化后的第5天和第10天行nestin、胶质纤维酸性蛋白多克隆抗体、半乳酸脑苷多克隆抗体和微管相关蛋白2单克隆抗体免疫荧光染色,采用荧光显微镜观察检测两组神经干细胞的表达;对照组采用PBS缓冲液替代一抗,其它步骤同血清预培养组。主要观察指标:①相差显微镜下观察血清预培养组及对照组神经干细胞培养48h后的生长状况。②免疫荧光染色检
- 万虹历俊华张绍东
- 关键词：干细胞细胞培养幼牛血清
