国家高技术研究发展计划(2003AA326010)
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
- 相关作者：刘华松孙正杨慧王荣孙晓红更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京口腔医院首都医科大学北京石景山医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 骨髓间充质干细胞在大鼠体内的迁移研究被引量：7
- 2005年
- 目的:将体外预先标记的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植到大鼠脑 内观察细胞的存活和转归,从在体(in vivo)角度阐明MSCs在中枢神经系统疾病细胞治疗中的潜 在应用前景。首先用DiI在体外标记MSCs。将标记后的MSCs分别移植到大鼠纹状体和侧脑室, 在移植后2w和4w灌杀动物,进行脑组织及脊髓的冰冻切片,在荧光显微镜下观察细胞的存活与 转归。结果:移植到纹状体的MSCs可沿针道向周围实质迁移,迁移的最远距离可达0.2mm。并 且,在大脑皮层及其他脑实质的血管壁、血管中以及血管周围还可见到标记细胞;而移植到侧脑 室的MSCs则主要沿脑室系统迁移,细胞主要分布在移植侧侧脑室,对侧脑室与第四脑室也有分 布,也有少量细胞沿侧脑室向周围实质迁移,迁移的最远距离为0.23mm。还可见到沿胼胝体向 对侧脑室迁移的细胞流,甚至有个别细胞迁移至脊髓腰段。所有动物在细胞移植后4周均未发 现肿瘤形成。结论:MSCs脑内移植后可以在中枢神经系统内存活并迁移,无致瘤性。结果提示 骨髓间充质细胞是很多疾病细胞与基因治疗的有力工具。
- 鲁玲玲刘玉军孙晓红刘华松孙正杨慧
- 关键词：骨髓间充质干细胞镜下观察肿瘤形成DII胼胝体致瘤性
- BMSC-HA/TCP修复牙槽骨缺损后牙齿移动的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨小型猪牙齿在牙槽骨缺损修复区的移动情况。方法:选用6只实验用小型猪(8-10个月龄),在一侧前磨牙近中造成直径为15mm,高为10mm圆柱状的骨缺损区。获取小型猪的自体骨髓基质细胞,分离培养并诱导为成骨样细胞。将小型猪自体骨髓基质干细胞与生物复合体(60%羟基磷灰石+40%磷酸三钙)复合后,种植到骨缺损区。另一侧作为对照侧。术后14W用60g力牵引双侧第一前磨牙近中移动。于12W后测量双侧前磨牙的移动距离。进行配对t检验比较。结果:6只小型猪两侧第一前磨牙近中移动平均距离的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用细胞支架构建方式,可修复小型猪的上颌骨缺损,修复后不会对牙齿移动产生不良影响。
- 王荣孙正刘华松
- 关键词：牙移动骨髓基质干细胞骨缺损
- 骨髓基质细胞及诱导后成骨细胞在钛合金表面粘附率的研究被引量：5
- 2006年
- 目的研究小型猪的骨髓基质细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)及其诱导后的成骨细胞在种植体钛合金(Ti-6Al-4V)表面的粘附情况。方法分离培养小型猪的骨髓基质细胞,并将其诱导为成骨细胞。分别将不同浓度的骨髓基质细胞及诱导后的成骨细胞悬液接种于种植材料表面,利用扫描电镜观察其粘附情况,计算不同接种浓度下两种细胞与种植材料的粘附率及粘附的细胞数。结果两种细胞在种植体表面粘附良好,接种浓度为3×105/100μl组两种细胞在种植材料表面的粘附细胞数量分别为17.6×106和18.6×106;粘附率分别84.2%和85.5%。两种细胞在钛合金表面的粘附率和粘附的细胞数与其余三组(1×105/100μl;2×105/100μl;4×105/100μl)相比差异均有显著性。结论小型猪BMSC在体外可经条件培养液诱导为成骨细胞,接种浓度为3×105/100μl组骨髓基质细胞及成骨细胞在种植材料表面有良好的粘附能力。
- 王荣刘华松张敏杨慧孙正
- 关键词：骨髓基质干细胞小型猪
- BMSC-HA/TCP修复羟基磷灰石种植体周围骨缺损的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨应用小型猪BMSC为种子细胞,HA-TCP为支架修复种植体周围骨缺损的可行性。方法:将8只小型猪,随机分为实验组及对照组。在两组种植体周围骨缺损区分别植入细胞-支架材料,单纯支架材料,于种植体植入后1个月,3个月取材,进行观察。结果:细胞-支架组1个月骨缺损区可见新生编织骨包绕支架材料,3个月可见支架材料降解,密质骨形成。支架组1个月骨缺损区纤维组织包裹支架材料,3个月支架材料部分降解。结论:细胞-支架构建方式可作为修复羟基磷灰石种植体周围骨缺损的方法之一。
- 王荣刘华松孙正
- 关键词：种植体小型猪骨髓基质干细胞骨缺损
- 制备人Ⅱ型多巴胺受体cRNA探针检测帕金森病大鼠模型纹状体内Ⅱ型多巴胺受体基因表达的变化被引量：2
- 2005年
- 目的:获得单链、杂交结果稳定的人Ⅱ型多巴胺受体基因正义和反义RNA探针,检测人Ⅱ型多巴胺受体在帕金森病大鼠模型中表达的变化。方法:实验于2002-10/2003-06在首都医科大学神经科学研究所内完成。选出2,6,12周帕金森病大鼠模型60只,每组各20只,用来做原位杂交的组织处理;将已制备的pGEM-T-Easy-D2R质粒载体分别经ClaI、XbaⅠ限制性酶切反应得到线形质粒,再分别以T7和SP6聚合酶制备了人Ⅱ型多巴胺受体基因的反义和正义探针,通过斑点杂交检测探针的浓度;将反义和正义探针分别作等梯度稀释,分别与组织切片杂交,强度洗脱后,观察使对照正义链探针没有杂交信号,而反义探针杂交后也无本底的最适宜浓度,从而降低内缘性其他多巴胺受体亚型的干扰作用;用制备的最适宜浓度探针分别杂交帕金森病大鼠模型2,6,12周的组织切片,杂交后冲洗,免疫检测及呈色,观察帕金森病大鼠模型纹状体中Ⅱ型多巴胺受体表达。结果:①实验标记的人Ⅱ型多巴胺受体探针属cRNA探针,其特点为单链探针,杂交过程不需变性,可合成最可靠的反义链探针,杂交结果稳定,体外转录合成的cRNA探针长度也比较一致,其浓度分别为150,120mg/L。②将反义和正义探针分别等梯度稀释,分别与组织切片杂交,强度洗脱后,结果证明25mg/L浓度最适宜,对照正义链探针没有杂交信号,而反义探针杂交后也无本底。③原位杂交证实,反义探针能够与帕金森病大鼠模型纹状体中Ⅱ型多巴胺受体mRNA杂交。用反义探针标记的细胞中可见蓝色颗粒沉积,左右半球纹状体中标记细胞数在2周时没有变化,帕金森病大鼠损伤侧和健侧Ⅱ型多巴胺受体mRNA表达没有明显变化;6周时,损伤侧较健侧表达明显上调,12周时,损伤侧与健侧表达都下降且没有明显差别。结论:实验获得了人Ⅱ型多巴胺受体基因反义和正义cRNA探针,并得出无�
- 赵焕英李良刘延英刘静孙晓红杨慧
- 关键词：帕金森病受体原位杂交
