国家自然科学基金(30271295)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- NSBP1基因干扰RNA慢病毒载体的构建及效应检测
- 2009年
- 目的构建和鉴定NSBP1基因RNA干扰慢病毒表达载体。方法针对NSBP1mRNA设计了3条siRNA,并构建pGCSIL-GFP-NSBP1慢病毒质粒,测序鉴定。用pGCSIL-GFP-NSBP1、pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染293T细胞包装产生慢病毒,测定病毒滴度。将慢病毒转染前列腺癌DU145细胞,Western-blot检测NSBP1表达,MTT法检测细胞生长活性,用转染细胞种植裸鼠成瘤,观察抑瘤效果。结果PCR和测序证实,成功构建LV-shNSBP1的慢病毒载体,病毒滴度达2×108TU/mL。转染细胞中NSBP1蛋白表达显著降低,且MTT检测细胞生长活性明显减慢,转染细胞在裸鼠体内成瘤率没有影响,但对肿瘤的生长有明显抑制作用。结论人NSBP1基因RNA干扰慢病毒载体构建成功,且NSBP1对前列腺癌激素非依赖DU145细胞的生长具有重要作用。
- 蒋宁周利群辛殿祺吕天敬韩文科
- 关键词：RNA干扰慢病毒WESTERNBLOTMTT
- 核小体结合蛋白1在雄激素非依赖性前列腺癌中的作用被引量：3
- 2008年
- 目的明确核小体结合蛋白1（NSBP1）在雄激素非依赖性前列腺癌细胞（PC-3）中的生物学功能。方法通过RNA干扰技术，使PC-3细胞中的NSBP1表达水平明显降低，然后用胆囊收缩素（CCK）-8法观察细胞活性的变化，用流式细胞光度术检测细胞周期的变化。结果NSBP1的表达抑制后，从60h开始PC-3细胞活性（A值为0．329±0．017与0．386±0．022）有显著下降（P〈0．05），抑制率到108h达到高峰（27．5％）。流式细胞光度术检测结果显示，NSBP1抑制后的PC-3细胞的G2M＋S期细胞百分率也从60h开始（31．7％±2．0％）与对照组（37．3％±2．5％）有统计学意义（P〈0．05）。结论NSBP1在前列腺癌PC-3细胞中，对维持细胞活性及促进细胞生长增殖有重要作用。
- 黄晨周利群宋刚
- 关键词：前列腺肿瘤RNA
