中央高校基本科研业务费专项资金(LZUJBKY-2010-141)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：兰州大学第四军医大学口腔医院兰州军区总医院更多>>
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- 混合阳离子交联剂甲基丙烯酸海藻酸盐三维培养软骨细胞被引量：1
- 2015年
- 本研究旨在建立一种更适合软骨细胞生长的三维培养体系。首先通过酰胺键反应将甲基丙烯酸引入海藻酸盐长链形成甲基丙烯酸海藻酸盐(MA),然后将MA和混合阳离子Ba2+∶Ca2+=5∶5进行光交联反应,形成内部结构为贯通式凝胶网络(IPN)的凝胶小球(MA凝胶小球)。将P1代软骨细胞包裹在MA凝胶小球中连续培养三周,在培养的不同时间点取适量凝胶小球进行倒置显微镜观察,冰冻切片后HE染色和免疫组化染色,扫描电镜观察第21d细胞在支架中的情况;通过Alamar blue法检测软骨细胞的增殖情况;二甲基亚甲兰法定量检测糖胺多糖(GAG)的含量。结果显示MA和混合阳离子Ba2+∶Ca2+=5∶5发生光交联反应形成的MA凝胶小球,与对照组藻酸钙相比,P1代软骨细胞在MA凝胶小球内增殖更明显,细胞外基质GAG的分泌也更多,扫描电镜下观察到软骨细胞可以良好地黏附在支架中生长,免疫组化染色呈阳性。以上结果证实软骨细胞在MA凝胶小球中的增殖和细胞外基质的分泌量优于藻酸钙组,并且能维持软骨细胞的表型,是一种更好的软骨细胞三维培养载体。
- 汪洋冯玉霞樊星任利玲
- 关键词：软骨细胞
- 海藻酸盐小球中培养的软骨细胞的生长被引量：3
- 2011年
- 目的为海藻酸盐水凝胶作为软骨细胞三维培养环境提供实验依据。方法将酶消化法获取的P1代软骨细胞包裹在20 g/L海藻酸钙凝胶小球中持续培养4周,在培养的不同时间点取适量的小球行倒置相差显微镜观察,HE、番红"O"染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色;并通过MTT法检测细胞活性及增殖;二甲基亚甲兰法进行氨基葡聚糖(GAG)含量测定。结果在海藻酸钙小球内培养的软骨细胞能够保持球形状态,且随时间的延长,细胞增殖逐渐聚集成簇;细胞外基质沉积逐渐增加,GAG含量增多。Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性,鉴定证实为具有正常表型的软骨细胞。结论软骨细胞在海藻酸盐凝胶小球中培养有效维持了细胞的分化状态,细胞增殖并具有良好的分泌蛋白功能。海藻酸钙凝胶适合于软骨细胞的生长。
- 任利玲冯雪马东洋王建卫陈富林丁寅
- 关键词：软骨细胞海藻酸盐细胞培养
- 动态压力作用下微囊化软骨细胞差异蛋白质组学研究
- 2011年
- 应力作用下软骨细胞代谢和功能的改变是导致软骨组织不断生长改建的主要原因。但目前,动态压力作用下调控软骨细胞生物学行为变化的分子机制尚不清楚。该研究借助于蛋白质组学技术,通过给藻酸盐三维培养的软骨细胞施加0.2 MPa、0.66 Hz动态压力持续作用4 h,比较加压组和未加压组蛋白表达的变化。结果10个蛋白点发生了变化:2个在加压培养后表达消失,2个在加压培养后出现表达,6个表达增强。进一步通过质谱分析和蛋白鉴定识别出6个有意义的蛋白质,分别是:proly14-hydroxylase alpha I、pyruvate kinase、L-lactate dehydrogenase A、proly1 4-hydroxylasesubunitβ、destrin isoform和αenolase。为今后深入研究这些差异蛋白在软骨细胞受压力刺激后代谢和功能变化的生物学作用奠定了基础。
- 任利玲冯雪马东洋余占海陈富林丁寅
- 关键词：软骨细胞海藻酸盐差异蛋白质组学
- 不同浓度海藻酸盐凝胶的力学特性及其对软骨细胞增殖能力的影响被引量：5
- 2012年
- 细胞外基质的理化性能影响着细胞的命运并调节组织形成。为探索最佳的软骨细胞体外三维生长环境,本研究通过改变藻酸盐浓度测定了海藻酸盐小球的力学特性及其对软骨细胞增殖能力的影响。凝胶的压缩机械性能通过INSTRON3365测定,结果发现浓度越高其压缩模量越大,表明凝胶对抗应变的能力越强。同时选取4w龄乳兔关节软骨细胞分别包裹在浓度为1%、2%和3%(w/v)海藻酸盐小球中连续培养4周,结果发现所有3组软骨细胞都表现出有限的增殖并形成类似于软骨组织的细胞簇,其中较低浓度组(1%和2%)增殖更明显。这些结果表明软骨细胞在海藻酸盐凝胶小球中连续培养有少量增殖,且较低浓度的藻酸盐更有利于软骨细胞的增殖,说明藻酸盐凝胶的力学特性影响了软骨细胞的增殖能力。
- 任利玲冯雪马东洋陈富林丁寅
- 关键词：软骨细胞海藻酸盐机械性能
