国家自然科学基金(30271207)
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- v-fos转化效应因子是CD2胞内区新的结合蛋白
- 2006年
- 在以前的研究中,本实验室采用酵母双杂交技术,从人KT3T淋巴细胞cDNA文库中筛选到一个与CD2胞内区结合的新的蛋白分子,称为v-fos转化效因子(v-fostransformationeffector,Fte-1).本研究进一步分析鉴定了Fte-1与CD2相互作用的分子机制和Fte-1的生物学功能.应用研究生物大分子相互作用的生物传感器分析了CD2胞内区与Fte-1结合特性和亲和力,表明二者确为特异性结合,其解离常数KD值为10?7mol/L;分子缺失突变和体外磷酸化实验结果表明,Fte-1可被蛋白激酶C(PKC)磷酸化,其磷酸化位点为Ser238;基因表达研究显示,在JurkatT淋巴细胞白血病细胞中Fte-1呈簇集性分布;CD2单克隆抗体T11刺激JurkatT淋巴细胞后,Fte-1这种簇集性分布特征消失,而趋向细胞膜,并与CD2共定位于细胞膜区域;Fte-1的PKC磷酸化位点Ser238突变为Gly238后,其与CD2分子的共定位能力丧失,表明Fte-1的Ser238的PKC磷酸化对Fte-1和CD2在T淋巴细胞内的结合起关键作用;使用Fte-1干扰RNA技术抑制Fte-1在JurkatT淋巴细胞中的表达,可抑制佛波酯(PMA)和离子霉素(ionomycin)引起的JurkatT淋巴细胞激活后凋亡,提示Fte-1参与了CD2对T淋巴细胞凋亡的调节.上述结果进一步确证Fte-1是CD2胞内区的特异结合蛋白,并可能参与了CD2介导的细胞凋亡信号传递.
- 李明张伟伦刘士廉刘彦信郑德先
- 关键词：CD2结合蛋白蛋白激酶C磷酸化
