公共文化服务平台

共 5 条记录，以下是 1-5

全选清除导出

排序方式：

Cbl-b shRNA稳定转染乳腺癌MDA-MB-231细胞系的构建: 2011年; 目的构建靶向Cbl-b基因的短发夹环RNA(shRNA)真核质粒表达载体,建立Cbl-b shRNA稳定转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞系,为探讨Cbl-b的生物学功能奠定基础。方法设计Cbl-b shRNA序列BLAST进行同源性分析。化学合成法合成shRNA序列,将配对的单链合成双链,以T4连接酶连接于pSilencerTM 4.1-CMV表达载体,加入感受态细胞。将菌液涂布于含有氨苄青霉素的LB平板,筛选阳性菌落,测序确认后进行大量复制、扩增,提取重组质粒。脂质体法将上述质粒转染至MDA-MB-231细胞中,G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。结果 DNA测序证实靶向Cbl-b基因的shRNA真核质粒表达载体构建正确,G418压力筛选出阳性克隆,Western blot检测发现MDA-MB-231/Cbl-b shRNA转染细胞株中Cbl-b蛋白表达水平明显下调。结论成功构建了基因沉默Cbl-b的MDA-MB-231细胞株,为进一步探讨其生物学功能奠定实验基础。; 张凌云石晶滕月娥张晔曲秀娟刘云鹏; 关键词：CBL-B 短发夹环RNA MDA-MB-231 转染

c-Src在RANKL诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移中的作用被引量：1: 2011年; 目的探讨非受体酪氨酸激酶c-Src在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移中的作用。方法流式细胞仪检测MDA-MB-231细胞表面受体核因子-κB受体活化因子(RANK)蛋白的表达及RANKL刺激后细胞p-Src及c-Src的表达;Transwell法测定细胞迁移能力。结果 MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强。应用RANKL的圈套受体OPG可阻断RANKL诱导的细胞迁移。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-Src表达升高,应用Src激酶抑制剂PP2可显著抑制RANKL诱导的细胞迁移。结论 c-Src信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移。; 张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐; 关键词：C-SRC 核因子-ΚB受体活化因子配体乳腺肿瘤迁移

MEK/ERK信号通路在RANKL诱导的乳腺癌MCF-7细胞迁移中的作用及机制探讨: 2012年; 目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞MCF-7迁移中的作用。方法流式细胞术检测MCF-7细胞表面核因子-κB受体活化因子(RANK)蛋白的表达;Western blot检测RANKL刺激后磷酸化ERK(p-ERK)及ERK的表达;Transwell法测定RANKL刺激后细胞迁移能力的改变。结果 MCF-7细胞表面表达RANK蛋白,RANKL(2μg/mL)显著诱导MCF-7细胞迁移能力增强。RANKL刺激后MCF-7细胞p-ERK表达逐渐升高,MEK抑制剂PD98059显著抑制RANKL诱导的MCF-7细胞迁移。结论 ERK信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MCF-7迁移。; 张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐; 关键词：细胞外信号调节蛋白激酶核因子-ΚB受体活化因子配体细胞运动

PI3K/Akt信号通路在RANKL诱导的MCF-7乳腺癌细胞迁移中的作用被引量：1: 2012年; 目的:核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)能促进表达RANK的上皮癌细胞迁移至骨,与乳腺癌骨转移密切相关。本文探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(phosphoinositide3-kinase/serine/threonine protein kinase PI3K/Akt)信号通路在RANKL诱导的乳腺癌MCF-7细胞迁移中的作用。方法:流式细胞仪检测MCF-7细胞表面RANK蛋白的表达;Transwell法测定RANKL刺激后MCF-7细胞迁移能力的改变;Western-blot检测MCF-7细胞RANKL刺激后p-Akt及Akt的表达。SPSS 16.0软件分析实验数据。结果:MCF-7细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MCF-7细胞迁移能力显著增强,RANKL的圈套受体OPG可阻断RANKL诱导的细胞迁移。RANKL刺激后MCF-7细胞p-Akt表达在1、5分钟时一过性升高,PI3K抑制剂LY294002显著抑制RANKL诱导的细胞迁移。结论:PI3K/Akt信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞系MCF-7迁移。; 张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐; 关键词：核因子-ΚB受体活化因子配体乳腺癌迁移

Grb2-相关蛋白2参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移的机制研究: 2011年; 目的探讨Grb2-相关蛋白2(Gab2)在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-213迁移中的作用。方法流式细胞术检测MDA-MB-231细胞表面RANK的表达。Transwell法测定RANKL刺激后细胞迁移能力的改变。免疫沉降及Western-blot检测RANKL刺激后p-Tyr-Gab2和Gab2的表达。结果 MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-Tyr-Gab2表达一过性升高。结论 Gab2参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移。; 张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐; 关键词：乳腺肿瘤细胞运动核因子-ΚB受体活化因子配体

全选清除导出

共1页<1>

辽宁省教育厅高校重点实验室项目(2008S246)