国家自然科学基金(30300337)
- 作品数：8 被引量：27H指数：4
- 相关作者：龚建平彭勇刘海忠李敬东彭祥玉更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院川北医学院附属医院川北医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅科学研究项目更多>>
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- 大鼠肝移植缺血再灌注后Kupffer细胞CD14基因及蛋白的表达被引量：6
- 2006年
- 目的研究大鼠肝移植缺血再灌注后 Kupffer 细胞 CD14基因及蛋白的表达,探讨其在再灌注损伤中的作用。方法分离培养大鼠肝移植缺血再灌注后0(对照组)、2、6、12h(IR 组)的Kupffer 细胞,用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)检测 Kupffer 细胞 CD14 mRNA 的表达,用免疫印迹检测 CD14蛋白合成,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定培养上清 TNF-α的分泌量。然后在上述时间点的细胞培养液中加入抗 CD14抗体(anti-CD14组),观察 CD14抗体对 TNF-α分泌的影响。结果再灌注后 Kupffer 细胞 CD14 mRNA、蛋白以及 TNF-α随观察时间点呈逐步上升趋势(与对照组相比,P<0.01)。应用抗 CD14抗体后,TNF-α表达较 IR 组明显降低(P<0.01)。结论再灌注后Kupffer 细胞 CD14基因及蛋白的表达明显升高,TNF-α的合成和分泌也明显增强;抗 CD14单抗能明显抑制了 NF-α的产生;CD14在介导 Kupffer 细胞激活和肝移植缺血再灌注损伤中可能起重要作用。
- 彭勇龚建平刘长安李旭宏刘海忠李寿柏
- 关键词：肝移植缺血再灌注损伤CD14KUPFFER细胞
- 脂质体介导NF-κB圈套寡核苷酸体外转染Kupffer细胞的实验研究
- 2010年
- 目的 研究核因子κB（NF-κB）圈套寡核苷酸（decoy oligodeoxyribonucleotide,ODN）体外借助阳离子脂质体转染大鼠Kupffer细胞（KCs）的效率,并观察其对KCs活化的抑制作用.方法 24只Wistar大鼠分为3组,每组8只.（1）对照组：分离培养正常大鼠KCs （2）LPs组：KCs培养液中加入终浓度为1 ms/L的LPS作为刺激因素 （3）NF-κB圈套寡核苷酸组：先用阳离子脂质体（lipofectamine）将人工合成的NF-κB圈套寡核苷酸转染KCs（4μg/1×10^5个KCs）,观察转染效果,再用1 mg/L LPS刺激,观察其对KCs活化的抑制作用,包括KCs的吞噬功能、NF-κB易位,以及膜表面分子CD4O mRNA的表达.结果 在LPS刺激下,KCs呈高度活化状态,吞噬功能增强,NF-κB向细胞核移位,细胞膜表面共刺激分子CD40 mRNA呈高表达状态,与对照组相比差异有统计学意义（t=4.01,P〈0.01）.在阳离子脂质体介导下,人工合成的NF-κB圈套ODN可以高效转染KCs,有效地抑制NF-κB活化,降低其下游基因的表达,与LPS组相比差异有统计学意义（t=4.89,P〈0.01）.结论 在脂质体介导下,NF-κB圈套寡核苷酸可以高效转染KCs,并有效抑制KCs的活化.
- 彭勇李敬东肖江卫李旭红甘霖龚建平
- 关键词：枯否细胞NF-ΚB圈套寡核苷酸
- TNF-TNFR超家族T细胞协同刺激分子与器官移植研究进展
- 2005年
- T细胞协同刺激通路在器官移植后的排斥反应中起着重要作用。目前已经发现的T细胞协同刺激通路有:CD28/CTLA-4:B7,ICOS:B7h,PD1:PD-L1/PD-L2,CD40:CD154,CD134:CD134L,4-1BB:4-1BBL,CD27:CD70,LIGHT:HVEM和CD30:CD153等。
- 刘鸿翔龚建平
- 关键词：T细胞协同刺激分子器官移植
- 3D腹腔镜技术在肝癌切除术中的临床应用进展被引量：6
- 2018年
- 传统腹腔镜因其2D图像的局限性,使施术者失去了对空间深度的感知,从而延长了外科医师的腹腔镜学习曲线。具有立体视觉的3D腹腔镜减少了手术时间,提高了手术精确度,保障了手术的安全性。简要介绍3D腹腔镜在肝癌切除术中的应用及原理,探讨3D腹腔镜的优势及不足。
- 苏星彭勇
- 关键词：肝癌切除术
- CD28／CTLA-4-B7家族T细胞协同刺激通路的研究进展被引量：1
- 2007年
- T淋巴细胞在大多数移植排斥反应过程中都占主导地位。阻断T细胞协同刺激通路有可能为临床治疗移植排斥带来希望。因此，探究T细胞协同刺激分子与移植排斥反应的关系使成为一大热点。近年来，新发现的T细胞协同刺激通路包括CD28／CTLA-4：B7家族的ICOS：B7h，PD1：PD-L1／PD-12，TNF：TNFR家旅的CD134：CD134L，4-1BB：4-1BBL，CD27：CD70，LIGHT：HVEM和CD30：CD153等。上述通路和传统协同刺激通路一起构成一张复杂的调节网络，在T细胞激活过程巾起着精细而灵敏的调节作用。现就ICOS：B7h，PDI：PD-L1／PD-12等新发现的CD28／CTLA-4：B7家族的T细胞协同刺激分子作一综述。
- 刘鸿翔刘虹龚建平
- 关键词：T细胞协同刺激分子器官移植免疫耐受
- 核因子-κB圈套对Kupper细胞活化的抑制作用及其机制被引量：9
- 2006年
- 目的探讨核因子-kB(NF-kB)圈套对大鼠Kupper细胞(KCs)活化的抑制作用及其机制。方法分离大鼠KCs并随机分为3组：正常对照组、内毒素(LPS)刺激组及NF-kB圈套组。后者KCs在LPS刺激前转染NF-kB圈套。除对照组外,两个实验组培养液中加入终浓度为1mg/ L的LPS。于LPS刺激6h后,凝胶电迁移率改变分析法(EMSA)检测NF-kB蛋白结合活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测KCs膜表面CD80 mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6表达情况。结果转染NF-kB圈套可以高效抑制KCs激活,EMSA结果显示NF-kB活性仅为LPS组的0．53,RT-PCR结果显示KCs CD80 mRNA表达仅为LPS组的0．46,ELISA结果显示培养上清TNF-α表达量仅为LPS组的0．37,IL-6仅为LPS组的0．60。结论NF-kB圈套可以高效抑制NF-kB的转录活性,降低KCs膜表面共刺激分子和细胞因子的产生,为活体内应用NF-kB圈套提供了可靠的实验依据。
- 彭勇李敬东彭祥玉刘海忠刘作金龚建平
- 关键词：核因子-ΚB细胞因子
- 核因子κB诱骗寡核苷酸对大鼠肝脏的Kupffer细胞共刺激分子表达的影响
- 2009年
- 目的探讨核因子κB（NF-κB）诱骗寡核苷酸（ODN）对大鼠肝脏Kupffer细胞（KC）膜表面共刺激分子表达的影响。方法取雄性SD大鼠，麻醉后经门静脉插管，以0．5g／LIV型胶原酶体外循环灌注消化肝脏，不连续Percoll密度梯度离心分离KC。以人工合成的NF-κB诱骗ODN转染KC，再以终浓度为img／L的脂多糖（LPS）刺激（NF-κB诱骗组），培养8h后，采用逆转录聚合酶链反应测定KC膜表面CD80、CD40和CD54mRNA的表达。以不转染NF-xB诱骗ODN、但接受LPS刺激的KC为对照（LPS刺激组），正常大鼠KC为对照组。每组每份标本含KC1×10^5个。结果每个大鼠肝脏可以分离得到KC（3-4）×10^6个，NF-κB诱骗ODN可以在KC内维持12d而不被降解。对照组KC膜表面CD80、CD40、CD54 mRNA呈低表达；LPS刺激组KC表面3种共刺激分子表达均较对照组明显升高，分别是对照组的2．53、2．51和2．74倍（P〈0．01）；NF-κB诱骗组CD80和CD40mRNA表达明显低于LPS组，仅为LPS组的0．52和0．55倍（P〈0．01），而CD54 mRNA表达的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在体外，NF-κB诱骗ODN可以高效地抑制KC表面共刺激分子的表达，为活体内应用NF-κB诱骗ODN抑制肝移植后急性排斥反应提供了实验依据。
- 李敬东刘海忠刘作金龚建平肖江卫彭勇
- 关键词：寡核苷酸类抗原CD80抗原
- 核因子κB圈套寡核苷酸减轻大鼠移植肝缺血/再灌注损伤的作用和机制被引量：5
- 2006年
- 目的探讨抑制枯否(Kupffer)细胞核因子κB(Nuclear factor-kappaB,NF-κB)活性对减轻大鼠移植肝缺血/再灌注损伤(IRI)的作用和机制。方法建立大鼠肝移植缺血/再灌注损伤模型。实验分正常对照组、缺血/再灌注组和圈套寡核苷酸组,每组均为8只大鼠。圈套寡核苷酸组于移植术前2d经供者尾静脉注入120μg脂质体包裹的NF-κB圈套寡核苷酸。移植再灌注后2h,取各组受者移植肝分离枯否细胞。凝胶迁移变动分析法(EMSA)检测枯否细胞NF-κB蛋白结合活性,逆转录聚合酶链法(RT-PCR)观察枯否细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)mRNA的表达,同时观察肝组织病理及肝功能变化。结果缺血/再灌注组移植肝再灌注后2h,枯否细胞NF-κB活性及TNF-α、IL-6 mRNA表达量较对照组明显升高(P＜0．01)。光镜下肝细胞大量变性、坏死,伴有肝血窦明显淤血,血清丙氨酸转氨酶(ALT)和胆红素总量(TBIL)较对照组明显升高(P＜0．01)。相反,圈套寡核苷酸组枯否细胞NF-κB活性及细胞因子mRNA表达与缺血/再灌注组相比明显下降(P＜0．01),移植肝未见明显病理组织学改变,肝功能明显改善。结论NF-κB圈套寡核苷酸能高效抑制枯否细胞NF-κB活性,并抑制其下游有害细胞因子的产生,从而减轻缺血/再灌注损伤对移植肝的打击和损害。
- 李敬东彭勇彭祥玉刘海忠焉涛龚建平
- 关键词：枯否细胞核因子ΚB肝移植
