国家自然科学基金(30300350)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：宋波龚宇丁砺蠡熊恩庆金锡御更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院浙江大学医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省医学会临床科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 膀胱出口梗阻对逼尿肌功能影响的研究进展被引量：3
- 2004年
- 龚宇宋波
- 关键词：膀胱逼尿肌梗阻
- E2F“诱骗”策略抑制膀胱出口梗阻后逼尿肌细胞的表型转化
- 2007年
- 目的利用自建的膀胱出口梗阻(BOO)细胞水平的模型,探讨转录因子 E2F"诱骗"(decoy)策略抑制逼尿肌细胞(DSMC)的表型转化作用。方法对培养的 DSMC 施加周期性张力负荷以建立细胞水平的 BOO 模型;以 Lipofectamine 2000介导 E2F-decoy 脱氧寡核苷酸(ODN)转染DSMC,设立 E2F-decoy ODN 转染组(Decoy 组),错配 E2F-decoy ODN 转染组(Mis-decoy 组)及空白对照组(非转染组);四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞的增殖活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA 表达水平,Western 印迹检测 PCNA 和细胞周期依赖性蛋白激酶cdk2表达。结果 Lipofectamine 介导转染 E2F-decoy ODN 后24 h 可获得表达;Decoy 组增殖活性显著低于非转染组和 Mis-decoy 组(均 P<0.01);Decoy 组 PCNA mRNA 表达显著低于非转染组(P<0.01);Decoy 组 PCNA 和 cdk2蛋白表达显著低于非转染组(126±14 vs 180±10;155±6 vs210±22,均 P<0.01);而 Mis-decoy 组与非转染组之间以上指标差异均无统计学意义(均 P>0.05)。结论 E2F-decoy ODN 能够转染 DSMC 并获得表达;转录因子 E2F"诱骗"策略有效抑制了 BOO 后DSMC 的表型转化,显示了从逼尿肌结构的角度改善梗阻后膀胱功能的前景。
- 龚宇杜传军丁砺蠡宋波金锡御
- 关键词：膀胱颈梗阻逼尿肌
- 膀胱出口梗阻体外细胞生物力学模型的建立的研究被引量：1
- 2005年
- 目的 建立一种全新的膀胱出口梗阻(BOO)体外细胞水平的生物力学模型,为BOO的研究提供一个更为稳定科学的实验平台。方法 应用负压发生装置对贴壁生长在BioFlex培养皿内的正常膀胱平滑肌细胞施加不同程度的周期性张力,使其硅胶底部分别发生10 %、2 0 %、3 0 %的形变,利用免疫细胞化学检测收缩表型标志物αactin ,RT PCR检测增殖指标PCNA的mRNA表达以及Westernblot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、cdk2kinase蛋白表达,观察它们的动态变化,利用MTT法观察细胞增殖性的变化。结果 随着形变量的增大,免疫细胞化学发现αactin先代偿增加后失代偿降低;RT PCR和Westernblotting发现PCNA的mRNA表达量逐渐增加,PCNA、cdk2kinase的蛋白表达量逐渐增加,3 0 %形变组显著高于正常对照组(P <0 0 1) ;MTT实验发现与正常对照组比,细胞的增殖活性显著增加(P <0 0 1)。结论 ①对培养逼尿肌细胞施加周期性张力负荷作用的方法建立了一种全新的体外细胞水平的BOO模型;②随周期性张力增加,逼尿肌细胞由“收缩型”逐渐转化为“分泌型”。
- 丁砺蠡熊恩庆龚宇宋波
- 关键词：逼尿肌梗阻
