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国家自然科学基金(30300348)

作品数:14 被引量:23H指数:3
相关作者:邢毅飞杜岳峰陆鹏曾甫清刘先艮更多>>
相关机构:华中科技大学西安交通大学医学院第二附属医院西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 14篇中文期刊文章

领域

  • 13篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 9篇前列腺
  • 8篇前列腺癌
  • 8篇腺癌
  • 7篇受体
  • 6篇趋化
  • 6篇趋化因子
  • 6篇趋化因子受体
  • 6篇趋化因子受体...
  • 6篇细胞
  • 6篇CXCR4
  • 5篇前列腺癌细胞
  • 5篇腺癌细胞
  • 5篇癌细胞
  • 4篇逆转
  • 4篇逆转录
  • 4篇逆转录病毒
  • 4篇转录
  • 4篇基因
  • 3篇前列腺肿瘤
  • 3篇肿瘤

机构

  • 12篇华中科技大学
  • 3篇西安交通大学...
  • 2篇南京大学医学...
  • 2篇西安交通大学...
  • 1篇复旦大学
  • 1篇北京大学

作者

  • 11篇邢毅飞
  • 9篇杜岳峰
  • 8篇陆鹏
  • 7篇刘先艮
  • 7篇曾甫清
  • 6篇肖亚军
  • 3篇王美玉
  • 2篇郭宏骞
  • 2篇屈峰
  • 2篇肖传国
  • 1篇郭飞
  • 1篇杨操
  • 1篇杨述华
  • 1篇叶哲伟
  • 1篇吴强
  • 1篇王继纳
  • 1篇邵佳
  • 1篇侯琳
  • 1篇许伟华
  • 1篇李炎生

传媒

  • 4篇临床泌尿外科...
  • 1篇中国癌症杂志
  • 1篇中华男科学杂...
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇中华泌尿外科...
  • 1篇中华老年医学...
  • 1篇南京医科大学...
  • 1篇西安交通大学...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇Chines...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2009
  • 2篇2008
  • 4篇2007
  • 7篇2006
14 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
CXCR4-siRNA逆转录病毒载体体外靶向抑制hTERT^+肿瘤细胞CXCR4基因的表达被引量:2
2006年
目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,并研究其在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中的表达。方法:用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(smallinterferingRNA,siR-NA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的Pgensil-1质粒,以hTERT启动子代替U6启动子,再将重组基因片段导入到逆转录病毒真核表达载体PLXSN中,行限制性酶切鉴定。转染PA317病毒包装细胞,收获病毒上清分别转染前列腺癌细胞PC-3m、LNCaP及人胚肺成纤维细胞MRC5和人乳腺癌细胞MCF7,RT-PCR检测CXCR4mRNA表达。结果:限制性酶切鉴定该重组质粒,成功构建了PLXSN/EGFP-hTERT-siCXCR4。与空载体组比较,PC-3m、LNCaP、MCF7细胞中CXCR4-siRNA对CXCR4mRNA的48h抑制率分别为(87.02±10.34)%、(61.70±9.77)%、(88.31±9.20)%。MRC5细胞中PLXSN-hTERT-siCXCR4对CXCR4mRNA不抑制。结论:该逆转录病毒系统中hTERT启动子调控的下游RNA干扰序列可选择性地在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中表达,在hTERT-MRC5细胞不表达,具有显著的靶向性。
杜岳峰邢毅飞曾甫清王美玉陆鹏刘先艮
关键词:趋化因子受体4人端粒酶逆转录酶
一种表达增强型红色荧光蛋白的前列腺癌骨转移模型的建立被引量:3
2006年
目的:建立稳定表达增强型红色荧光蛋白(ERFP)的NOD/SCID-hu(非肥胖性糖尿病/重症联合免疫缺陷)小鼠前列腺癌骨转移模型。方法:选用6~8周龄体重为22~25g雄性NOD/SCID-hu小鼠,利用外科植入术将成人骨组织(HAB)植入小鼠皮下,3~4周后将携有ERFP基因的逆转录病毒载体PLXSN—DsRed2转染前列腺癌细胞PC3m与LNCaP,收获稳定表达ERFP的前列腺癌细胞PC-3m/ERFP与LNCaP/ERFP并配置成细胞悬液,通过小鼠尾静脉注入小鼠体内。6~8周后通过整体荧光显像系统观察小鼠体内移植入骨组织处转移前列腺癌细胞ERFP的表达。结果:2只小鼠死于术后第2天;10只存活小鼠中,4只在整体荧光显像系统观察下发出红色荧光,成功建立前列腺癌骨转移模型。结论:本方法建立的表达ERFP的NOD/SCID-hu小鼠前列腺癌骨转移模型稳定、可靠;实验结果可以在体外进行无创性动态观察,具较强的灵敏性及特异性,是进行前列腺癌骨转移基础及临床研究的理想模型。
李炎生肖亚军杜岳峰邢毅飞郭飞王继纳
关键词:前列腺肿瘤骨转移
端粒酶hTERT在骨肉瘤组织中表达的意义被引量:4
2009年
目的探讨骨肉瘤组织中端粒酶hTERT基因的表达及意义。方法应用原位分子杂交技术,对52例骨肉瘤组织、17例骨质增生骨组织、11例异位骨化组织和10例正常骨组织中端粒酶hTERT基因进行检测和定位,并运用图像分析系统对hTERT基因表达水平进行研究。结果端粒酶hTERT基因在骨肉瘤组织中表达阳性率为82.7%(43/52),表达强度与肿瘤细胞的分化程度无明显相关(P>0.05)。端粒酶hTERT基因细胞表达水平与肿瘤细胞的分布定位一致。在骨质增生骨组织、异位骨化组织和正常骨组织中端粒酶hTERT基因的表达均为阴性。结论原位分子杂交是检测端粒酶亚单位hTERT的有效方法,在骨肉瘤细胞水平检测端粒酶hTERT基因的定位诊断具有重要意义。在骨肉瘤发展和维持中端粒酶可能起到重要的作用,同时还可能存在端粒酶以外的机制导致肿瘤细胞永生化。
叶哲伟杨述华邵佳吴强杨操许伟华李进杨秀萍侯琳
关键词:端粒酶原位分子杂交骨肉瘤基因表达
The inhibitory effects of siRNA expression vector on CXCR4 expression in prostate carcinoma cell lines被引量:3
2006年
Objective: To investigate the inhibitory effects of RNAi ( RNA interference, RNAi) expression vector on CXCR4 expression in prostate carcinoma cell lines. Methods: Small interference RNA (siRNA) expression vectors for CXCR4 gene were constructed and transfected into prostate carcinoma cell lines(PC-3m and LNCaP)with liposomes. T expression of CXCR4 was detected by RT-PCR and western blot. Results: T expression of CXCR4 mRNA and protein in the PC-3m and LNCaP cells was reduced by RNAi expression vectors. The inhibitory rate of CXCR4 mRNA expression in the PC-3m cells was 87.81% ± 10.20% ,56.10% ± 9.32% at the 24th hour and the 48th hour, compared with 56.93% ±8.78% ,49.24% ± 11.23% in LNCaP cells. The inhibitory rate of the expression of CXCR4 protein was 64.71% ± 6.68% ,58.66% ± 11.56% respectively. Conclusion: The expression of CXCR4 gene can effectively be inhibited by RNAi expression vectors.
Yuefeng Du Yifei Xing Fuqing Zeng Peng Lu Xianyin Liu
人前列腺特异性抗原启动子调控的CXCR4-siRNA逆转录病毒载体的构建及其对前列腺癌细胞的生物学效应被引量:5
2007年
目的构建人前列腺特异性抗原(hPSA)启动子调控的趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,并探讨其对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞CXCR4基因表达的靶向抑制作用。方法PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(siRNA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的pGensil-1质粒,以hPSA启动子代替U6启动子,再将重组基因片段导入到逆转录病毒真核表达载体pLXSN中,进行限制性酶切鉴定。转染。PA317包装细胞,收获病毒上清,分别转染前列腺癌细胞PC-3m、LNCaP和人乳腺癌细胞MCF7。采用RT-PCR、Western blot检测CXCR4基因表达。Transwell小室侵袭实验检测前列腺癌细胞体外侵袭能力的变化。结果通过限制性酶切鉴定该重组质粒,成功构建了CXCR4的RNA干扰质粒pLXSN/EGFP-hPSA-siCXCRd。与空载体组比较,CXCRd-siRNA对LNCaP细胞CXCR4 mRNA和蛋白表达抑制显著,48 h抑制率分别为(81.53±10.22)%和(90.52±9.31)%;对PC-3m、MCF-7细胞CXCRd mRNA和蛋白表达无抑制作用。Transwell侵袭实验结果显示,LNCaP细胞干扰组微膜下孔细胞数为(139.9±14.2)个,空载体组为(348.4±36.4)个,两组差异有统计学意义(P<0.05);PC-3m、MCF-7细胞干扰组微膜下孔细胞数与空载体组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论该逆转录病毒系统中,hPSA启动子调控的下游RNA干扰序列特异性地抑制激素依赖前列腺肿瘤细胞的CXCR4基因表达,具有明显的靶向性。hPSA启动子调控的靶向CXCRd基因的RNA干扰技术在激素依赖性前列腺癌的基因治疗中具有一定价值。
杜岳峰邢毅飞曾甫清陆鹏刘先艮肖亚军
关键词:趋化因子受体4
趋化因子CXC受体4在前列腺癌细胞中的表达被引量:1
2006年
目的:对趋化因子CXC受体4(CXCR4)在前列腺癌(PCa)组织以及PCa细胞系PC-3M中的表达进行研究。方法:提取正常前列腺组织、PCa组织和PC-3M细胞的总RNA,采用RT-PCR方法,于mRNA水平检测其CXCR4的表达情况;制备PC-3M细胞爬片和MCF-7细胞爬片(人乳腺癌细胞系,作为阳性对照),采用SABC免疫组织化学方法,于蛋白水平测定CXCR4在PC-3M细胞中的表达。结果:RT-PCR方法显示PC-3M细胞和PCa组织CXCR4 mRNA有较高水平的表达,正常前列腺组织未见CXCR4 mRNA的表达;SABC显示PC-3M细胞CXCR4蛋白呈强表达。结论:CXCR4在PCa组织和PC-3M细胞中有明显表达,在正常前列腺组织中无明显表达,CXCR4可能在PCa的发生发展中发挥重要作用。
杨明刚邢毅飞赵军陆鹏
关键词:前列腺肿瘤基质细胞衍生因子1
RNAi表达载体对前列腺癌细胞CXCR4基因表达的抑制作用
2007年
趋化因子CXC受体4及其配体基质细胞衍生因子1(SDF-1)相互构成的反应轴与肿瘤的恶性表现密切相关。它们不仅在肿瘤细胞的迁移过程中起着一定作用,而且与肿瘤细胞发生、增殖和分化等有密切关系,并可能成为肿瘤基因治疗中的一个新靶点。我们利用可在细胞内自主生成siRNA的表达质粒转染激素依赖性和非依赖性人前列腺癌细胞株LNCaP和PC-3m,观察其对CX-CR4mRNA及蛋白表达的影响。
杜岳峰邢毅飞曾甫清陆鹏刘先艮
关键词:前列腺癌细胞株CXCR4基因表达RNAI基质细胞衍生因子
Retrovirus-Mediated CXCR4-siRNA Can Inhibit the Invasion of Prostate Carcinoma In Vitro被引量:1
2007年
Objective: CXCR4 is a potential target for cancer gene therapy. In this study, an RNA interference retrovirus vector targeting CXCR4 gene was constructed, and its influence on the invasion of prostate cancer cells by depressing CXCR4 gene expression was analyzed. Methods: the CXCR4-specific siRNA gene was cloned by PCR and inserted into the Pgensil-1 plasmid eonstaining U6 promoter and EGFP, and then the recombinant fragment was sub-cloned into PLXSN and tested by restriction enzyme and sequencing. The virus obtained from transfected PA317 cells was transfected into prostate cancer cells. The expression of CXCR4 mRNA was detected by RT-PCR. The ability of invasion of prostate cancer cells in vitro was estimated by Transwell experiment. Results: it was showed that with the recombinant PLXSN transfection, the expression of CXCR4 mRNA in prostate cancer cells PC-3m and LNCaP was reduced at rates of (84.26±10.20)% and (88.17±11.23)%, respectively. The results of Transwell experiment also showed that the number of cells under micro-membrane were 14.7±3.1 and 18.9±4.2 in the treated group of PC-3m and LNCaP, respectively, compared with 46.9±5.3 and 66.7±6.0 in the control group (P〈0.05). Conclusion: PLXSN/EGFP-U6-siCXCR4 can significantly depress the expression f CXCR4, by which the invasiveness of prostate cancer cells in vitro was inhibited as well. This recombinant fragment would be helpful in the treatment of prostate cancer.
杜岳峰石瑛邢毅飞肖亚军
关键词:INVASIONCXCR4
趋化因子受体4在前列腺癌中的表达及其与转移的相关性研究被引量:3
2008年
目的:研究趋化因子受体4(CXCR4)在前列腺癌(PCa)组织中的表达及其与患者血清PSA水平的相关性,探讨CXCR4在PCa转移中的作用。方法:采用EnVision免疫组织化学染色方法检测40例PCa组织(包括15例转移和25例未转移PCa组织)及配对癌旁组织和10例正常前列腺组织中CXCR4的表达情况,统计分析PCa与癌旁和正常组织CXCR4的表达差异,以及CXCR4表达与血清PSA水平及转移的相关性。结果:CXCR4蛋白在PCa中高表达,其阳性表达率为82.5%(33/40);癌旁组织表达较低,阳性表达率为37.5%(15/40);而正常前列腺组织中未见CXCR4表达(0/10)。与癌旁及正常组织相比,PCa组织表达CXCR4显著增高,差异有统计学意义(P<0.01);而癌旁组织与正常组织CXCR4表达差异则无统计学意义(P>0.05)。PCa中CXCR4表达与癌转移特征的相关性差异具有统计学意义(P<0.05),不同血清PSA水平的癌组织CXCR4表达差异则无统计学意义(P>0.05)。结论:CXCR4在PCa组织尤其在转移性PCa组织中高表达。CXCR4可能是一个独立的,较有效的转移预测指标,可为临床判断预后提供参考。研究结果为进一步研究CXCR4/SDF-1与转移性PCa的关系奠定了基础。
屈峰杜岳峰邢毅飞肖亚军肖传国郭宏骞
关键词:前列腺癌趋化因子受体4前列腺特异抗原预后判断
白介素-12基因转染致敏树突状细胞体外诱导特异抗前列腺癌效应的实验研究被引量:1
2006年
背景与目的前列腺癌是泌尿系统疾病中发病率和死亡率较高的恶性肿瘤,临床积极寻求最佳治疗方案。白细胞介素-12(IL-12)具有促T细胞增殖分化和抗肿瘤免疫作用,负载肿瘤抗原的树突状细胞(DC)疫苗可诱导机体产生特异性的抗肿瘤免疫效应,联合两者抗肿瘤效应,探讨逆转录病毒介导白细胞介素-12(IL-12)基因转染DC体外诱导特异免疫杀伤前列腺癌细胞的效能及其机制。方法构建IL-12基因逆转录病毒重组质粒,转染PA317细胞后获得相应病毒,转染前列腺癌(PCa)患者外周血DC成DC-IL-12细胞。以HSP70-PC-3m肿瘤混合肽负载DC-IL-12细胞得致敏的DC。MTT法检测T淋巴细胞(1×105个/ml)增殖分化能力,细胞毒实验检测DC-IL-12诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)及其上清液对PC-3m细胞株杀伤作用。结果DC经IL-12修饰后48h分泌高水平IL-12(26.35±3.12)ng/L及IFN-r(778±28)ng/L,均显著高于未转染组(P<0.05)。DC-IL-12细胞诱导的CTL及其上清液对前列腺癌PC-3m细胞均有显著杀伤作用,杀伤率显著高于未转染组,分别为(76.43±6.20)%vs(42.12±2.80)%和(66.38±7.56)%vs(14.23±5.42)%(P<0.05),对膀胱癌细胞EJ无明显杀伤作用。结论IL-12基因修饰增强PC-3m细胞抗原致敏DC体外诱导同源T淋巴细胞产生特异性的抗前列腺癌免疫效能,其机制与IL-12基因转染DC后促进分泌IL-12、IFN-r及增强T淋巴细胞活化状态密切相关。
杜岳峰邢毅飞曾甫清王美玉陆鹏刘先艮
关键词:逆转录病毒前列腺癌IL-12树突状细胞
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