国家自然科学基金(30772595)
- 作品数：21 被引量：35H指数：4
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- 基于脂毒性的创新结构抗癌一类新药TNBG的研制
- 本文研制的抗癌新药TNBG(Tetrazanbigen,德氮吡格)是具有自主知识产权的手性氮杂甾体化合物,经体内外试验发现并证明,TNBG是具有抗实体瘤活性.在体外,经基因芯片[1]、蛋白质组学[2]等实验发现TNBG可...
- 余瑜李伟李龙江杨晓兰袁拥华刘嫱陈志琼汤为学
- 关键词：抗癌药脂毒性非细胞毒性德氮吡格
- 基于脂代谢靶点蛋白hPPARγ-LBD的抗肿瘤药物筛选模型的研究
- 2010年
- 目的:建立一种以脂代谢靶点蛋白hPPARγ-LBD重组蛋白进行抗肿瘤药物筛选的方法。方法:采用pReceiver-B01-PPARγ-LBD表达质粒转至E.coliBL_(21)(DE_3)细胞,进行表达与纯化得到可溶性靶点蛋白hPPARγ-LBD重组蛋白,以罗格列酮为hPPARγ-LBD的阳性配体,以GW9662作拮抗剂,采用分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)测定hPPARγ-LBD重组蛋白与配体药物的结合活性。结果:在优化条件(16℃、0.6mmol/LIPTG、诱导20h)下,能可溶性表达hPPARγ-LBD重组蛋白;经镍亲和色谱纯化后,以每升LB培养基计可获得41mg、纯度为95%的hPPARγ-LBD重组蛋白;该重组蛋白与罗格列酮特异性结合率约65%,K_d值为625nmol/L;与德氮吡格(Tetrazanbigen,TNBG)特异性结合率约60%,K_d值为1000nmol/L。结论:本文基于脂代谢靶点蛋白hPPARγ-LBD建立了抗肿瘤药物体外筛选模型的方法,该方法快速、稳定、安全及简便,能应用于抗肿瘤药物的筛选。
- 段雯李伟靳红卫夏铸程训官张昕宇郑小红余瑜
- 关键词：脂代谢抗肿瘤药物药物筛选模型罗格列酮德氮吡格
- 抗血吸虫药物吡喹酮的新合成路线被引量：7
- 2011年
- 目的:构建一条绿色、环保且能适合工业化生产抗血吸虫药物吡喹酮的新合成路线。方法:以苯乙胺为原料,用氯乙酰氯酰化,再用邻苯二甲酰亚胺钾氨基化反应,在P2O5作用下经Bischler-Napieralski环合反应制得N-[(1-亚甲基)-3,4-二氢异喹啉]邻苯二甲酰亚胺,经肼解和还原得到1-氨甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐,经环己烷甲酰化、氯乙酰氯酰化和环合得目标化合物。结果:该合成路线的总收率可达32.8%,为原总收率的2.13倍。结论:该合成工艺路线操作简便,原料廉价易得,条件温和,绿色环保,收率较高,具有一定的工业化生产前景。
- 程训官郑小红夏铸张昕宇王宇余瑜
- 关键词：吡喹酮环合血吸虫病
- 德氮吡格及其衍生物抗肿瘤研究进展
- 2023年
- 脂代谢在肿瘤发展和侵袭中有至关重要的作用,已成为肿瘤细胞最重要的代谢标志之一。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)配体或激动剂对多种肿瘤均有良好的抗肿瘤作用。德氮吡格是自主研发的创新结构抗肿瘤药,体内外实验表明其抗肿瘤作用显著,呈现非细胞毒性,已证实PPARγ是其作用靶点。本文对德氮吡格及其衍生物的抗肿瘤作用及其机制进行综述。
- 陈洁忠郑小红余瑜
- 关键词：德氮吡格肿瘤药物脂代谢
- 新型手性抗肿瘤药物德氮吡格(TNBG)体外抗肿瘤活性初步研究被引量：2
- 2011年
- 目的观察手性旋光异构体德氮吡格(TNBG)对6株人体肿瘤细胞增殖的影响,初步探讨其抗肿瘤作用机制。方法运用MTT法检测手性TNBG对6株肿瘤细胞生长抑制情况;油红O染色法观察QGY-7701细胞中脂质聚集情况;流式细胞仪检测手性TNBG对人肝癌细胞株QGY-7701细胞周期分布和凋亡影响。结果手性TNBG能不同程度抑制肿瘤细胞增殖,且呈剂量依赖性;油红O染色提取显示QGY-7701细胞内脂质量与给药剂量呈正相关;流式细胞仪检测到有S期细胞增加,并且手性TNBG还能诱导QGY-7701细胞发生凋亡。结论手性TNBG在体外具有良好的抗肿瘤活性,其抗肿瘤作用机制可能是通过促使肿瘤细胞产生脂质聚集,抑制肿瘤细胞增殖、诱导其凋亡从而达到抗肿瘤效应。总体看(+)TNBG体外抗肿瘤活性比(-)TNBG更强。
- 郑小红李伟张昕宇程训官夏铸汤为学余瑜
- 关键词：手性药物MTT法
- 固相金属亲和层析纯化全长人PPARγ重组蛋白
- 2013年
- 建立全长人PPARγ重组蛋白的固相金属亲和层析纯化方法。利用E.coli BL_(21)(DE3)细胞外源性表达出全长人PPARγ重组蛋白,采用固相金属亲和层析法纯化目标蛋白。通过考察咪唑浓度对纯化的影响,确定在8 mol/L尿素下,用含50 mmol/L咪唑的缓冲液冲洗,200mmol/L咪唑缓冲液洗脱,可获得纯度为95%的目标蛋白,透析复性后经放射配体受体饱和结合实验测定全长人PPARγ重组蛋白的解离常数K_d为106±6nmol/L。结果表明本文所建立的方法能够成功纯化出高纯度的目标蛋白,经复性后,可获得用于结构和功能研究的全长人PPARγ重组蛋白。
- 夏铸丁惠惠余瑜
- 关键词：活性
- 尺寸排阻色谱柱上尿素梯度复性全长人PPAR-γ被引量：4
- 2010年
- 建立尺寸排阻色谱柱上尿素梯度复性全长人PPAR-γ重组蛋白的方法。利用尺寸排阻色谱柱上尿素梯度除去变性剂直接复性变性蛋白。添加尿素和精氨酸抑制聚集以提高复性产率,加入Zn2+促进变性蛋白形成正确折叠。复性后,重组蛋白的尺寸排阻色谱保留体积增大;紫外光谱最大吸收波长从234.0nm变为280.8nm;基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱分析重组蛋白的完整性,测得分子量与理论值一致;放射配体受体结合饱和实验测得解离常数(Kd)为89±4nmol/L;复性产率为52.7%。结果表明本文所建立的方法能成功用于复性变性全长人PPAR-γ,获得可用于结构和功能研究的具有生物学活性的全长人PPAR-γ蛋白。
- 李伟张雪梅郑晓红段雯余瑜
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体复性紫外光谱
- 固相萃取RP-HPLC测定小鼠肝脏组织中的德氮吡格被引量：1
- 2010年
- 目的:建立小鼠肝脏组织中德氮吡格(Tetrazanbigen)的反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定方法。方法:精密称取小鼠肝脏组织,匀浆后固相萃取(Solid phase extraction,SPE)。液相色谱采用Lichrospher C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-0.1%三乙胺水溶液(pH6.5)(体积比90∶10)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长260nm,进样量20μl。结果:实验表明,肝脏组织匀浆液中德氮吡格在2～20μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9993),平均回收率为106.47%。最低定量限为1.0μg/ml。结论:本文建立的固相萃取RP-HPLC方法简便、准确、选择性和重现性好,适合于德氮吡格的肝脏组织浓度检测。
- 刘嫱陈志琼靳红卫李伟夏铸程训官张昕宇郑小红余瑜
- 关键词：德氮吡格固相萃取反相高效液相色谱法肝脏
- 全长hPPARγ重组蛋白的可溶性表达、纯化及活性鉴定
- 2013年
- 建立细菌外源性表达的有活性的全长hPPARγ重组蛋白的纯化方法。利用pReceiver-B13-SUMO-PPARγ表达质粒转化至E.coli BL21(DE3)细胞中诱导表达获得的全长hPPARγ重组蛋白;采用阴离子交换色谱法纯化目标蛋白;采用分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)法测定全长hPPARγ重组蛋白与Ros(Rosiglitazone,罗格列酮)配体的结合活性。经DEAE-52阴离子交换树脂一次纯化,从每升LB培养介质中可获得135mg、纯度为80%目标蛋白;该蛋白与罗格列酮的解离常数K_d为492nmol/L。本文所建立的方法能纯化出大量有活性、纯度较高的全长hPPARγ重组蛋白。
- 夏铸丁惠惠张万萍余瑜
- 关键词：纯化
- 德氮吡格影响人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞的蛋白质组学研究
- 2011年
- 目的观察德氮吡格（TNBG）对人肝癌细胞QGY-7701亚细胞蛋白表达的影响，探讨其影响脂代谢的分子机制。方法分别提取TNBG处理前后人肝癌细胞QGY-7701的细胞质、细胞膜和细胞核蛋白进行双向电泳，PDQuest7．4．0软件分析比对图像，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI—TOF-MS）鉴定差异蛋白质点。结果TNBG作用于人肝癌细胞QGY-770172h后，细胞质的差异表达蛋白质点有56个，细胞膜的差异表达蛋白质点有65个，细胞核的差异表达蛋白质点有34个，共计155个。利用MALDI—TOF-MS技术鉴定出其中33个差异表达蛋白质点，其中包括与脂质合成有关的10个蛋白质点和与脂质降解、转运有关的7个蛋白质点，如3-羟基-3甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶、角鲨烯合成酶、低密度脂蛋白受体、三磷酸腺柠檬酸裂解酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、甘油-3-磷酸酰基转移酶、长链酯辅酶A脱氢酶等，这些都是固醇调节元件结合蛋白调控的靶基因。结论TNBG可能通过固醇调节元件结合蛋白途径增加胆固醇和甘油三酯合成，导致肿瘤细胞内脂滴大量聚积。
- 袁拥华杨晓兰李伟郑小红谷容余瑜
- 关键词：肝细胞蛋白质组学脂代谢障碍德氮吡格
