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国家自然科学基金(30772547)

作品数:7 被引量:17H指数:3
相关作者:傅仲学吴星烨王学虎谌伟王春毅更多>>
相关机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 6篇结肠
  • 5篇细胞
  • 5篇肠癌
  • 4篇结肠癌
  • 4篇基因
  • 4篇SURVIV...
  • 3篇SURVIV...
  • 2篇肿瘤
  • 2篇细胞生长
  • 2篇结肠肿瘤
  • 2篇RNA干扰
  • 2篇VEGF
  • 2篇肠肿瘤
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质变化
  • 1篇蛋白质组
  • 1篇电泳
  • 1篇选择性
  • 1篇血管

机构

  • 6篇重庆医科大学...

作者

  • 6篇傅仲学
  • 4篇王学虎
  • 4篇吴星烨
  • 3篇谌伟
  • 2篇王春毅
  • 2篇赵渝
  • 1篇李尚坤
  • 1篇李明洋

传媒

  • 1篇现代医药卫生
  • 1篇生命科学研究
  • 1篇中国肿瘤临床
  • 1篇重庆医学
  • 1篇基础医学与临...
  • 1篇重庆医科大学...
  • 1篇The Ch...

年份

  • 1篇2013
  • 3篇2010
  • 3篇2009
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
高选择性RNA干扰抑制survivin基因对在体结肠癌的治疗作用被引量:3
2013年
目的探讨肿瘤增殖型腺病毒Ad-delE1b55KD-shRNA/survivin-EGFP介导的针对survivin的高选择性RNA干扰对在体结肠癌细胞HT-29增殖和凋亡的影响。方法用携带针对人survivin的shRNA的肿瘤增殖型腺病毒Ad-delE1b55KDshRNA/survivin-EGFP转染结肠癌细胞HT-29裸鼠移植瘤模型,以携带相同shRNA的复制缺陷型腺病毒和脂质体载体为对照,检测移植瘤体变化,以及TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率。结果 Ad-delE1b55KD-shRNA/survivin-EGFP介导的高选择性RNA干扰使结肠癌裸鼠移植瘤的瘤体减小、移植瘤细胞凋亡率显著增加,且高于目前常用的复制缺陷型腺病毒载体和脂质体载体(P<0.05)。结论 Ad-delE1b55KD-shRNA/survivin-EGFP介导的高选择性RNA干扰能高效地诱导结肠癌细胞凋亡并抑制其增殖。
王春毅傅仲学
关键词:SURVIVIN结肠肿瘤
外源性VEGF对结肠癌细胞SW480蛋白质变化的影响
2010年
利用RT-PCR发现结肠癌细胞存在血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)的表达,随后采用外源性VEGF对结肠癌细胞SW480进行体外刺激,流式细胞仪检测到结肠癌细胞刺激后快速进入分裂期,同时提取VEGF作用前后的结肠癌细胞总蛋白,蛋白质组学研究,发现存在明显的蛋白质变化,其中鉴定出10个差异蛋白质.提示外源性VEGF可以促进结肠癌细胞增殖并对肿瘤细胞蛋白质组产生明显的影响.
王学虎傅仲学赵渝谌伟吴星烨
关键词:蛋白质组双向凝胶电泳结肠癌
VEGF上调不同类型细胞Survivin的表达被引量:5
2009年
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对结肠癌细胞(LOVO、HCT116)、人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)Survivin表达的影响和存在的差异。方法VEGF刺激体外培养的LOVO、HCT116、HUVECs并检测细胞周期和凋亡的变化,用RT-PCR测定mRNA表达,Western blot测定蛋白表达,用免疫细胞化学测定Survivin蛋白表达和部位。结果VEGF可促进肿瘤细胞增殖,在结肠癌细胞中Survivin表达水平较高,在VEGF诱导后表达上调(P<0.05),主要分布在细胞质;在HUVECs中,Survivin表达不明显,VEGF诱导后表达明显上调(P<0.05),在细胞质和细胞核中均有较高表达。结论VEGF上调3种细胞SurvivinmRNA和蛋白表达,但在肿瘤和非肿瘤细胞Survivin上调的程度和分布存在差异。
王学虎傅仲学谌伟吴星烨
关键词:血管内皮细胞生长因子SURVIVIN结肠癌
结直肠癌基因治疗研究进展被引量:1
2009年
大肠癌占全世界癌症发病的第三位,目前全球大肠癌发病率仍以2的速度递增。我国大肠癌发病率有加快趋势,大肠癌的年发病率在2~8/10万,为第四至六位的常见恶性肿瘤。随着生物技术的发展。基因疗法治疗大肠癌成为一个潜在的新型治疗方式。针对肿瘤发生的遗传学背景,将外源性目的基因引入肿瘤细胞或其他体细胞内以纠正过度活化或补偿缺陷的基因,执行或介导对肿瘤的杀伤和抑制作用,或保护正常细胞免受化学治疗与放射治疗的严重伤害,从而达到治疗肿瘤的目的,即为肿瘤的基因治疗。
王学虎傅仲学
关键词:癌基因治疗结直肠癌发病率大肠癌年发病率
Survivin在结肠癌中的表达、定位及多种功能(英文)
2010年
Objective:Survivin has attracted abundant interest in tumor research since it was discovered in 1997.But several studies indicated that the relationship between survivin expression and tumor behavior is still not fully understood.So our main aim was to observe the localization of survivin in colon cancer and its influence on the colon cancer biocharacteristics.Methods:We screened the expression and localization of survivin in SW480 by immunofluorescence and immunocytochem-istry.Then, we constructed the recombinant adenovirus (Ad-survivin/shRNA), which contained the short hairpin RNA (shRNA) of survivin and transfected it into SW480 cells.We detected survivin gene expression after shRNA interference by RT-PCR and Western blot, and its influence on the proliferation, apoptosis and cell cycle was analyzed by MTT, colony-formation, and flow cytometry.Results:Survivin was expressed at a high level in SW480 cells and the sub-cellular localization was in the cytoplasm.Recombinant adenovirus could suppress survivin expression efficiency and inhibit proliferation, induce apoptosis, and affected the mitosis in vitro.Conclusion:Survivin plays an important role in controlling tumor growth by a variety of molecular regulatory mechanisms.Cytoplasmic survivin silence could induce apoptosis, effect the mitotic cycle and inhibit cell proliferation.
Xuehu Wang Zhongxue Fu Yu Zhao Wei Shen Xingye Wu Chunyi Wang
关键词:结肠癌SURVIVIN基因SURVIVINWESTERN印迹流式细胞仪分析重组腺病毒
间歇性缺氧对SW480细胞生长及HIF-1α表达的影响被引量:2
2009年
目的:研究间歇性缺氧(Intermittent hypoxia,IH)对SW480细胞生长及缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响,探讨肿瘤的间歇性缺氧现象及与HIF-1α的关系。方法:采用氯化钴(CoCl2)模拟缺氧环境,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察间歇性缺氧对SW480细胞生长的影响,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Westernblot检测间歇性缺氧对HIF-1α表达的影响。细胞分组:A组:常氧组;B组:间歇性缺氧2h组;C组:间歇性缺氧3h组;D组:持续性缺氧3h组。结果:MTT结果显示3个缺氧组与常氧组相比,SW480细胞增殖活性均受到抑制,C组和D组较B组增殖活性亦降低,而C组和D组之间无差异。RT-PCR检测HIF-1αmRNA发现C组高于A组、B组及D组。而其余各组之间无差异。Western blot检测HIF-1α蛋白发现C组高于其余各组,D组高于B组及A组,而B组与A组无差异。结论:相同缺氧时间,不同缺氧方式使SW480细胞生长受到同等程度抑制。一定程度的间歇性缺氧可以上调HIF-1αmRNA及蛋白水平。
李明洋傅仲学吴星烨李尚坤
关键词:间歇性缺氧结肠肿瘤缺氧诱导因子
Survivin基因的shRNA干扰对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响被引量:6
2010年
目的:以携带shRNA片段的腺病毒为载体,对结肠癌细胞SW480中Survivin基因的表达进行干扰,研究其对肿瘤细胞中Survivin基因沉默效果及对细胞周期、凋亡和增殖的影响。方法:将构建好的携带Survivin-shRNA片段腺病毒,体外转染结肠癌细胞株SW480。以EGFP为报告基因,采用流式细胞计数测定不同感染复数(MOI)下的转染效率,选取适当病毒浓度进行下一步实验。通过RT-PCR和Western blot检测基因沉默后结肠癌细胞内Survivin mRNA和蛋白的表达水平;在Annexin V—FITC和PI染色后通过流式细胞术检测并分析Survivin基因沉默后细胞周期和凋亡的变化;同时采用噻唑蓝(MTT)法、克隆增殖实验对细胞不同时期增殖活性进行观察,明确对细胞增殖的抑制时效性。结果:腺病毒转染后MOI值在0~50时,剂量与转染效率成正比,确定最佳MOI值为50并进行后续实验;shRNA干扰后细胞内Survivin mRNA和蛋白表达水平降低,较对照细胞组差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示基因沉默后细胞凋亡率升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。同时基因沉默后,细胞周期也有明显变化,表现为G_1/S期细胞增多和G_2/M期细胞减少,与对照细胞组相比差异有统计学意义(P<0.05)。MTT和单克隆平板实验均显示Survivin基因的沉默,对细胞的增殖和生长均具有明显抑制作用(P<0.05)。结论:采用腺病毒对结肠癌进行靶向Survivin基因的shRNA干扰,能有效降低目的基因的表达。其介导的Survivin基因的沉默,可以有效的诱导结肠癌细胞凋亡,同时Survivin基因可以通过抑制细胞G_1/S期转化来阻止细胞分裂,抑制细胞生长。
王学虎傅仲学赵渝谌伟吴星烨王春毅
关键词:SURVIVINRNA干扰结肠癌
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