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国家自然科学基金(30772535)
作品数:
2
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相关作者:
王云
杨帆
姜冠潮
周足力
王俊
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作者
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王俊
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周足力
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姜冠潮
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杨帆
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王云
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dsRNA激活PTEN基因对肺癌细胞生物活性的影响
2012年
目的探讨双链RNA分子(dsRNA)促进肺癌细胞中PTEN基因表达后,肺癌细胞生物活性的改变。方法根据前期研究结果,利用针对PTEN基因启动子区域非CpG岛序列的dsRNA,将其转染入肺癌肿瘤细胞A549和H292,绘制生长曲线,探讨转染后细胞增殖变化通过Transwell小室法检测侵袭能力,以及通过流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果A549和H292细胞转染特异dsRNA分子后,与未经转染的细胞相比,PTEN基因mRNA表达量可增至4倍,但细胞的增殖、侵袭能力无显著变化。与对照组比,较多细胞停留于G1期。结论dsRNA分子激活后可以增加PTEN基因表达,但对于其细胞功能并无显著影响。
周足力
李晓
杨帆
王云
姜冠潮
王俊
关键词:
双链RNA
dsRNA介导的PTEN基因表达上调及其与启动子区甲基化的关系
2011年
目的观察以启动子区非CpG岛序列为靶点的dsRNA促进PTEN基因的表达,并探讨RNAa现象对PTEN基因启动子区DNA甲基化的影响。方法将与PTEN基因启动子区非CpG岛DNA序列互补的双链RNA分子(dsPTEN)转染入A549和H292肺癌细胞中,采用real—time聚合酶链反应(PCR)检测PTEN的表达,筛选能够促进PTEN基因表达的有效dsRNA序列。通过甲基化特异性PCR(MSP)产物测序,检测dsRNA转染前后启动子区甲基化程度的变化。结果经多条dsRNA分别转染肺癌细胞,证实针对PTEN基因-57到-38的序列(dsPTEN2—2)转染H292肺癌细胞后出现PTEN基因表达的明显上调,上调最高达5.1倍(与对照dsRNA比较,P〈0.05),证实了RNAa现象的存在;使用5-Aza处理后的A549和H292细胞与空白组比较CpG点甲基化明显减少(5±3比10±4、6±3比9±3,P均〈0.05),而转染PTEN2—2dsRNA后的两个细胞株CpG点甲基化情况与未转染组比较无明显变化(94-2比104-4、9±3比9±3,P均〉0.05)。结论dsRNA可以促进PTEN基因表达的上调,RNAa现象并不改变PTEN基因启动子区甲基化程度。
李晓
周足力
杨帆
王云
姜冠潮
王俊
关键词:
DSRNA
PTEN
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