天津市自然科学基金(09JCYBJC09300)
- 作品数：9 被引量：12H指数：3
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- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院天津医科大学总医院南方医科大学更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金中国医学科学院放射医学研究所基金更多>>
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- 褪黑素对人非小细胞肺癌H1299细胞辐射敏感性的影响
- 2018年
- 目的:检测褪黑素(MLT)联合放疗对人非小细胞肺癌(NSCLC)H1299细胞增殖和凋亡的影响,阐明MLT在调节H1299细胞辐射敏感性中的作用。方法:将H1299细胞分为对照组、MLT组、照射组及照射+MLT组,对照组H1299细胞不作任何处理,MLT组H1299细胞给予不同浓度(100和500μmol·L^(-1))MLT,照射组H1299细胞采用^(137)Cs γ射线进行一次性6 Gy照射,照射+MLT组H1299细胞给予100和500μmol·L^(-1) MLT加6Gy^(137)Cs γ射线。克隆形成实验检测各组细胞克隆形成数,流式细胞术检测照射后24和48h各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测各组细胞中核转录因子κB(NF-κB)蛋白的磷酸化水平。结果:克隆形成实验,与照射组比较,照射+MLT组H1299细胞克隆形成数明显减少(t=7.234,P<0.01)。流式细胞术,照射后24h,与对照组比较,照射组和MLT组H1299细胞凋亡率明显升高(t=5.020,t=13.525,P<0.01),与对照组比较,照射+MLT组H1299细胞凋亡率升高(t=12.884,P<0.01);照射后48h,照射+MLT组H1299细胞凋亡率与照射组比较差异无统计学意义(t=0.394,P>0.05)。蛋白免疫印迹法,照射+MLT组H1299细胞中NF-κB蛋白磷酸化水平低于照射组。结论:MLT联合放疗对人NSCLC H1299细胞有明显的抑瘤效应,提高了NSCLC H1299细胞的辐射敏感性。
- 杨文延刘强孙志娟杜利清徐畅王彦柳杨王芹
- 关键词：褪黑素核转录因子ΚB
- IL-21基因对肝癌细胞抑瘤效应的辐射增敏作用被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨外源性IL-21基因联合放射对肝癌HepG2细胞抑瘤效应的辐射增敏作用。方法:将Ad-IL-21腺病毒颗粒转染HepG2细胞系,进行6Gy 137 Csγ射线照射,将细胞分为4组,包括空白对照组、Ad-IL-21组、照射组以及联合组,观察HepG2细胞的生长、细胞周期和细胞凋亡的变化。结果:与Ad-IL-21组和照射组比较,联合组HepG2细胞的抑制效应最显著,转染48h的抑制率明显高于转染24h和72h的抑制率。联合组HepG2细胞阻滞在G2期最多,凋亡细胞所占比例最高,转染24h和48h的凋亡率分别达到29.1%和33.1%。结论:IL-21基因联合放射对肝癌细胞的抑瘤效应具有辐射增敏作用,明显地抑制肝癌细胞的生长。
- 王芹孙元明王彦孙志娟宋力刘晓秋徐畅杜利清樊赛军樊飞跃刘强
- 关键词：肝癌腺病毒照射
- 人白介素21基因联合γ射线照射对食管癌EC109细胞周期的影响
- 2011年
- 目的研究含有IL-21基因的重组腺病毒表达载体(Ad-IL-21)联合γ射线照射对食管癌细胞EC109生长的抑制作用,为肿瘤的基因-放射治疗提供实验依据。方法将Ad-IL-21于体外转染食管癌细胞株EC109,用MTT比色法和流式细胞术观察基因联合照射后EC109细胞的生长曲线和细胞周期的变化。结果 Ad-IL-21基因组、单纯照射组和Ad-IL-21基因联合照射组EC109细胞生长均明显受到抑制,与Ad-lacZ组和空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。其中联合照射组EC109细胞生长最为缓慢,与Ad-IL-21基因组和单纯照射组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Ad-IL-21基因组、单纯照射组和联合治疗组大量的EC109细胞停留在G1期,而G2期和S期细胞明显减少,联合治疗组细胞停留在G1期最多。结论腺病毒介导的白介素21基因转移能显著抑制食管癌EC109细胞的生长,使细胞产生G1期阻滞,与放射治疗联合应用具有相加和协同效应。
- 张鸿艳赵欣然曹永珍李进王芹陈凤华宋力邵盈
- 关键词：食管癌腺病毒载体
- 人IL-21cDNA的克隆及重组腺病毒表达载体的构建被引量：4
- 2009年
- 目的:构建含人IL-21基因的重组腺病毒表达载体,为IL-21基因治疗肿瘤研究奠定基础。方法:从人外周血淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增IL-21基因片段,将其连接到进入载体pENTR1A,然后经LR重组转入到腺病毒表达载体pAd/CMV/V5-DEST中,构建含IL-21基因的腺病毒载体(Ad-IL-21),并进行测序鉴定和PCR鉴定。结果:Ad-IL-21表达载体测序结果与GenBank中IL-21基因序列一致,Ad-IL-21经PCR扩增出IL-21基因片段。结论:成功构建携带人IL-21基因的重组腺病毒表达载体。
- 王芹李进王颖嫒宋力岳井银穆传杰樊飞跃
- 关键词：基因克隆腺病毒表达载体
- 人白细胞介素21基因重组复制缺陷型腺病毒的制备与鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的制备表达绿色荧光蛋白的含人白细胞介素21(IL-21)基因的重组复制缺陷型腺病毒,为IL-21基因治疗肿瘤的研究奠定基础。方法从人外周血淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增IL-21基因片段,PCR产物和pDC316-mCMV-EGFP载体分别经限制性内切酶NotI与HindIII双酶切,然后将酶切产物连接、转化,构建pDC316-IL21-EGFP重组质粒。重组质粒经酶切和测序鉴定后,与腺病毒骨架质粒pBHGlox_E1,3CreF35共转染293细胞,包装产生Ad5F35-IL21-EGFP重组腺病毒,并测定病毒滴度。观察Ad5F35-IL21-EGFP腺病毒转染后食管癌细胞EC-9706的生长曲线和细胞周期的变化。结果 pDC316-IL21-EGFP重组质粒经酶切和测序证实,IL-21基因片段正确插入pDC316-mCMV-EGFP载体中且与GenBank中IL-21基因序列一致。Ad5F35-IL21-EGFP重组腺病毒载体在293细胞中包装成功,获得成熟的病毒颗粒,经鉴定有IL-21基因和绿色荧光蛋白的表达。测得Ad5F35-IL21-EGFP病毒颗粒滴度为9×1011VP/ml,感染性滴度为5×1010IU/ml。Ad5F35-IL21-EGFP转染后,EC-9706细胞的生长缓慢(P<0.05),G1期细胞增加,而G2期和S期细胞减少。结论成功制备了表达绿色荧光蛋白的人IL-21基因的重组腺病毒,且病毒滴度较高。腺病毒介导的外源性IL-21基因可有效转染EC-9706细胞,并对其生长有抑制作用。
- 王芹李进赵欣然宋力刘强岳井银樊飞跃
- 关键词：绿色荧光蛋白腺病毒基因治疗
- 白细胞介素21基因联合放射对肺癌细胞生长的协同抑制作用
- 2014年
- 目的：探讨白细胞介素21（IL-21）基因联合放射对肺癌A549细胞生长的协同抑制作用。方法将肺癌A549细胞分为4组：空白对照组、Ad-IL-21组（用Ad-IL-21腺病毒转染细胞）、照射组（行6 Gy 137Csγ射线照射）以及Ad-IL-21联合照射组（用Ad-IL-21腺病毒转染细胞后再行6 Gy 137Csγ射线照射），观察IL-21基因对A549细胞生长的抑制效应。结果 Ad-IL-21联合照射组的A549细胞的抑制效应最强（抑制率约为40%），显著高于Ad-IL-21组（约22%）和照射组（约17%）（F=45．6、57．5，P＜0．05）。Ad-IL-21联合照射组A549细胞发生明显的G2期阻滞（35．4%），与Ad-IL-21组（25．2%）和照射组（17．5%）比较，差异有统计学意义（F=16．6、32．8， P＜0．05）。Ad-IL-21联合照射组凋亡细胞所占比例最高，凋亡率达到33．1%，与Ad-IL-21组（27．8%）和照射组（14．8%）相比差异有统计学意义（F=15．9、41．7，P＜0．05）。结论 IL-21基因联合放射对肺癌细胞生长的抑制效应具有协同作用，可显著地抑制肿瘤细胞的生长。
- 王芹杜利清徐畅孙志娟王彦宋力李进樊飞跃刘强
- 关键词：白细胞介素类肺肿瘤
- 人IL-21基因联合γ射线照射对子宫颈癌Hela细胞生长的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究含人IL-21基因的重组腺病毒(Ad-IL-21)联合γ射线照射对子宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用。方法重组腺病毒Ad-IL-21于体外转染子宫颈癌Hela细胞,转染后6 h进行6Gy 137Csγ射线照射,用MTT方法和流式细胞仪测定Hela细胞的生长曲线、抑制率及细胞周期。结果 Ad-IL-21基因组、照射组和基因联合照射组对Hela细胞生长均具有抑制作用,联合照射组的抑制效应最强(44%),明显高于Ad-IL-21组和照射组。联合照射组Hela细胞出现明显的G1期阻滞,G1期细胞所占比例最高,达到88.9%,S期细胞最少(1%)。结论 IL-21基因联合γ射线照射对子宫颈癌的抑瘤作用具有协同效应,有效地抑制肿瘤细胞的生长。
- 邵盈曹永珍王芹李进赵欣然陈凤华宋力张鸿艳
- 关键词：子宫颈癌腺病毒照射
- 人IL-21基因对卵巢癌细胞生长的抑制作用被引量：4
- 2009年
- 目的研究含有IL-21基因的重组腺病毒表达载体(Ad-IL-21)抑制人卵巢癌细胞生长的作用。方法Ad-IL-21重组体于体外转染卵巢癌细胞株ES-2,用MTT比色法和流式细胞术观察ES-2细胞的生长曲线和细胞周期的变化。结果Ad-IL-21组ES-2细胞的生长比空白对照组和对照腺病毒组慢,在转染后第3天开始生长明显缓慢(P<0.05),转染后第5天Ad-IL-21组的细胞生长基本稳定在一定水平(P<0.05)。Ad-IL-21转染后ES-2细胞停留在G1期细胞增加,而G2期和S期细胞减少。结论腺病毒介导的外源性IL-21基因可有效转染人卵巢癌细胞,并对其生长有抑制作用。
- 王芹李进宋力刘强岳井银樊飞跃
- 关键词：卵巢癌腺病毒载体
- 人IL-21基因重组复制缺陷型腺病毒对肿瘤细胞的初步抑瘤效应被引量：1
- 2010年
- IL-21在治疗自身免疫性疾病、变态反应性疾病和抗肿瘤中发挥重要作用，特别是在肿瘤的基因治疗方面被广泛研究，具有潜在的临床研究价值。本研究利用AdMax腺病毒包装系统制备含人IL-21基因的重组复制缺陷型腺病毒，观察腺病毒转染食管癌细胞EC-9706后对其生长的影响，为开展IL-2l基因在肿瘤治疗中的应用提供资料。
- 王芹李进赵欣然宋力刘强岳井银樊飞跃
- 关键词：重组复制缺陷型腺病毒IL-21肿瘤细胞抑瘤效应变态反应性疾病食管癌细胞
