山西省自然科学基金(20051104)
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 相关作者：周永安张景萍杜苏萌杨丽萍郭向荣更多>>
- 相关机构：山西省儿童医院山西医科大学第二医院太原市中心医院更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 弓形虫基因片段在白血病患者弓形虫感染诊断中的应用
- 2007年
- 目的建立快速、特异、敏感诊断白血病患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,探讨其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对58例白血病患者及20名正常人同时进行弓形虫基因片段及其抗原检测。结果检测白血病患者58例,PCR和ELISA方法检测弓形虫基因片段和其抗原,阳性各为4、3例;其阳性率分别为6.89%和5.17%。作为阴性对照的20名正常人同时进行弓形虫的检测,其结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫基因片段的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点,可以作为白血病患者弓形虫感染诊断的有价值的方法之一。
- 常杏红周永安李国霞
- 关键词：弓形虫免疫组织化学基因表达
- 全文增补中
- 慢性髓性白血病bcr/abl融合基因的克隆与表达被引量：2
- 2009年
- 目的:克隆bcr/abl融合基因融合位点基因片段。方法:以慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株总RNA作为模板,采用RT-PCR方法扩增包含Bcr/abl(b3a2)融合位点基因片段。将RT-PCR物按正确的阅读框架,定向克隆到pEGFP-N3的下游,将重组质粒转化大肠杆JM109大肠杆菌,用PCR初筛,将PCR扩增阳性的重组子用EcoR和BamH双酶切鉴定,并进行序列的测定。结果:扩增出470bp的Bcr/abl融合位点基因片段,构建重组质粒pEGFP-bcr/abl,酶切产物的大小分别与预期相符。结论:成功地扩增bcr/abl融合位点基因片段及构建真核表达重组质粒pEGFP-bcr/abl,为在体外表达重组bcr/abl蛋白奠定基础。
- 周永安张景萍
- 关键词：慢性髓性白血病BCR/ABL融合基因克隆
- bcr/abl特异性siRNA真核表达载体的构建及鉴定
- 2009年
- 目的:构建bcr/abl的特异性siRNA真核细胞表达载体,并初步探索对K562细胞bcr/abl mRNA和P210蛋白的影响。方法:根据GenBank数据库提供的bcr/abl基因核苷酸序列,按照Tusch l设计原则,选择设计双链小干扰RNA(siRNA),再转化为能表达其小发卡结构RNA(shRNA)的DNA序列,并与pTER质粒定向连接,构建受控于人RNA聚合酶启动子H1的真核表达载体pTER117,经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定;在脂质体的介导下转染K562细胞,用RT-PCR分析bcr/abl mRNA的表达,细胞化学染色检测P210蛋白的表达。结果:构建bcr/abl融合基因siRNA真核表达载体pTER117经限制性内切酶酶切和DNA测序证实与设计完全一致,转染K562细胞24 h后,pTER117使bcr/abl mRNA的相对水平下降50%,使P210蛋白下降47%。结论:bcr/abl融合基因siRNA真核细胞表达载体构建成功,并有效干扰K562细胞bcr/abl的表达。
- 周永安张景萍郭向荣
- 关键词：慢性髓细胞性白血病BCR/ABL融合基因真核表达载体
- P43基因在白血病患者弓形虫感染诊断中的应用被引量：4
- 2005年
- 目的建立快速、特异、敏感诊断白血病患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并分析其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对46例白血病及20名正常人同时进行检测。结果检测白血病40例,PCR和ELISA方法检测弓形虫P43基因片段和其抗原,阳性各为8例及6例,其阳性率分别为17.4%和13.1%。作为阴性对照的20名正常者同时进行弓形虫的检测,其结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫P43基因的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点,可以作为白血病患者弓形虫感染诊断的有价值的方法之一。
- 杨丽萍周永安
- 关键词：白血病ELISA
- 血液病患者血液细胞中EB病毒DNA检测
- 2008年
- 目的荧光定量PCR方法（FQ—PCR）检测急性白血病（AL）、多发性骨髓瘤（MM）外周血EBV—DNA含量，并探讨其临床意义。方法采用FQ—PCR方法检测38例AL患者、18例MM患者和20例健康成年人外周血EBV—DNA含量，并进行统计学分析。结果AL组EBV感染率为7．8％，MM组EBV感染率为61．1％，对照组阳性率为5．0％（1／20）。AL组与对照组EBV—DNA阳性率比较差异无统计学意义（P〉0．05）；MM组与对照组EBV—DNA阳性率比较差异有统计学意义（P〈0．01）；MM组与AL组EBV—DNA阳性率比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论应用FQ—PCR方法对MM患者外周血中EBV—DNA含量进行检测，对于揭示MM的发病与EBV感染之间的相关性提供了敏感可靠的检测方法。AL患者的发病与EBV感染关系不大，MM患者的发病与EBV感染有关。
- 毕久康周永安赵瑾杜苏萌武坚锐
- 关键词：多发性骨髓瘤DNA
- 社区肺炎克雷伯菌耐药性分析及耐药基因的研究
- 2009年
- 目的研究山西医科大学第二附属医院肺炎克雷伯菌(KPN)耐药性以及10种耐药基因的检测。方法采用纸片琼脂扩散(K-B法)法测定临床分离的31株肺炎克雷伯菌对环丙沙星、头孢吡肟(FEP)、头孢西丁(FOX)等19种药敏纸片的耐药性,并选22株不同耐药株进行TEM、SHV、CTX-M1、CTX-M9、gyrA、gyrB、parC、parE、ompC、ompF 10种耐药基因进行PCR扩增。结果药敏试验显示有17株为耐药株,8株为敏感菌株,有6株中介,5株超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型试验为阳性;PCR扩增试验显示10种耐药基因均能扩增出,其中SHV型超广谱β-内酰胺酶基因17株居首,13株ompF、16株parC、15株gyrB型基因相对4株ompC、6株parE、8株gyrA型氟喹诺酮耐药基因。结论社区肺炎克雷伯菌中普遍存在ESBLs型基因,DNA旋转酶基因、拓扑异构酶Ⅳ基因、外膜蛋白基因,应加强耐药基因的检测,减少耐药株出现。
- 杜苏萌周永安张润梅康建邦徐辉武素梅杨素萍
- 关键词：肺炎克雷伯菌超广谱Β-内酰胺酶DNA旋转酶外膜蛋白
