中央高校基本科研业务费专项资金(2013ZZ0068)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：吴晖余以刚肖性龙胡双芳李晓凤更多>>
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- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 通用型酵母菌实时荧光PCR检测方法的建立被引量：3
- 2014年
- 为建立一种快速检测鉴定食品中酵母污染菌实时荧光PCR法,根据酵母基因序列设计出通用型探针和引物,建立了运用实时荧光PCR法检测酵母的反应体系和反应条件,进而对该方法进行特异性验证,灵敏度分析及稳定性评价,并应用于产品样本的检测。特异性试验表明,酵母菌检测结果均为阳性,而细菌、霉菌均为阴性,荧光PCR检测结果的特异性为100%。灵敏度试验表明,酵母菌检出限在760 cfu/m L。稳定性试验表明,酵母菌组内实验CV在0.62-0.81%之间波动,而组间实验在0.43-0.77%之间波动。通过样品增菌检测发现在培养12 h后能检出阳性。本研究所建立的实时荧光PCR法特异性好、灵敏度高、稳定性好,具有快速、简便的特点,为快速检测食品中酵母污染提供新的方法和途径,具有很好的研究价值和应用前景。
- 余以刚万松华胡双芳肖性龙吴晖
- 关键词：酵母菌荧光定量PCR
- 基于细菌酯酶活性的叠氮噻唑橙分子设计与特性验证
- 2013年
- 为了建立一种新型、高效的活菌检测技术,以细菌酯酶代谢活性为判断依据,设计合成了一种新型噻唑橙荧光染料——TOMA,其结构经核磁共振谱、高分辨质谱确证.对TOMA的细胞膜穿透性、酯酶敏感性及对DNA的PCR扩增的抑制作用3方面特性进行了初步验证.结果显示:10 mg/L的TOMA于室温、黑暗条件下与活的大肠杆菌(Escherichia coli)O157:H7混合孵育10 min后菌体发出强烈荧光,表明该分子能有效穿透细菌壁膜,并与核酸有良好的结合能力;用固定化脂肪酶对TOMA进行体外水解,水解率达83%,说明该分子的酯键能在相关酶作用下断裂;TOMA与实时荧光定量PCR联用时,该分子对细菌DNA扩增具有明显的抑制作用.以上结果证明TOMA分子设计基本达到预期目的.
- 余以刚黄韵李晓凤肖性龙吴晖
- 关键词：细菌酯酶DNA扩增
