广东省教育部产学研结合项目(2011B090300020)
- 作品数：5 被引量：45H指数：4
- 相关作者：赵祥杰邝哲师叶明强杨金波潘木水更多>>
- 相关机构：广东省农业科学院华南农业大学广州市良种猪场更多>>
- 发文基金：广东省教育部产学研结合项目国家级星火计划星火计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 5'非翻译区序列改建提高抗菌肽PR39表达被引量：5
- 2013年
- 目的:在毕赤酵母SMD1168中高效表达抗菌肽PR39,并检测其抗菌活性。方法:根据毕赤酵母密码子偏爱性,人工合成4条寡核苷酸片段,通过重叠PCR获得PR39核苷酸序列,将其插入酵母表达载体pPIC9K,重组表达质粒pPIC9K-PR39经PCR敲除PR39 5'端多余的长度为24bp的核苷酸序列得到pPIC9K-PR39-D,再经PCR、酶切连接构建5'UTR已删除8个核苷酸GGATCCAA的新型毕赤酵母表达载体pPIC9K-PR39-D-E;pPIC9K-PR39-D-E转化到毕赤酵母SMD1168,经PCR鉴定及G418筛选,用0.5%的甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE分析,再利用琼脂糖扩散法测定发酵上清的抗菌活性,表达产物经反相层析及SP-Sepharose层析柱纯化测定其表达量。结果:经Tricine-SDS-PAGE检测,在4.7kDa左右处可见目的蛋白表达条带,纯化后测定蛋白浓度表达量约为175.6mg/L。获得的抗菌肽PR39对E.coli DH5α,有明显抑菌活性。结论:经改建后新型毕赤酵母表达载体pPIC9K-PR39-D-E在毕赤酵母中可高效表达抗菌肽PR39,为以后深入研究毕赤酵母高效表达抗菌肽奠定了基础。
- 明飞平杨军朱进美邝哲师李华周夏枫耿叶明强王候光赵祥杰黄志丰蔡海明施巨清马苗鹏张玲华
- 关键词：抗菌肽分泌表达抗菌活性
- 抗菌肽对断奶仔猪血清生化指标、免疫指数和皮毛指数的影响被引量：5
- 2014年
- 试验旨在研究饲粮中添加抗菌肽对断奶仔猪血清生化指标、免疫指数和皮毛指数的影响。试验选用120头体质量相近的28日龄断奶仔猪,随机分为4组,每组3个重复,每重复10头猪(公母各半)。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组饲喂基础饲粮+120 mg/kg吉他霉素,试验Ⅱ组饲喂基础饲粮+200 mg/kg天蚕素抗菌肽,试验Ⅲ组饲喂基础饲粮+300 mg/kgPR39抗菌肽。试验期21 d。结果表明:添加抗菌肽显著提高血清中三碘甲状腺原氨酸含量,胸腺指数、脾指数和皮毛指数(P<0.05)。此外,添加抗菌肽对血清中四碘甲状腺原氨酸和生长激素有提高的趋势。由此可见,在饲粮中添加抗菌肽可改善断奶仔猪的血清生化指标,提高断奶仔猪的免疫指数和皮毛指数。
- 邝哲师卢俊鑫赵祥杰潘木水叶明强
- 关键词：抗菌肽断奶仔猪血清生化指标
- 猪源性PR39抗菌肽对断奶仔猪生产性能、血清免疫指标和肠道菌群的影响被引量：21
- 2014年
- 本试验旨在研究饲粮中添加猪源性PR39抗菌肽对断奶仔猪生产性能、血清免疫指标和肠道菌群的影响。选用体重相近的28日龄断奶仔猪120头,随机分为4组,每组3个重复,每个重复10头(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组饲喂基础饲粮+120 mg/kg吉他霉素,试验Ⅱ组饲喂基础饲粮+200 mg/kg天蚕素抗菌肽,试验Ⅲ组饲喂基础饲粮+300 mg/kg PR39抗菌肽。试验期21 d。结果表明:与对照组相比,2种抗菌肽均显著提高了仔猪平均日增重(P<0.05),显著降低了料重比和腹泻率(P<0.05)。与对照组相比,2种抗菌肽均显著提高了血清免疫球蛋白G(IgG)含量(P<0.05),试验Ⅱ组显著提高了血清免疫球蛋白M(IgM)含量(P<0.05),血清免疫球蛋白A(IgA)、补体3(C3)、补体4(C4)含量有提高的趋势(P>0.05)。与对照组相比,2种抗菌肽均显著降低了盲肠、直肠、结肠中大肠杆菌数(P<0.05),试验Ⅱ组显著提高了盲肠双歧杆菌数(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加PR39抗菌肽和天蚕素抗菌肽可改善断奶仔猪生产性能,降低腹泻率,提高血清免疫球蛋白含量,促进肠道有益菌增殖,抑制有害菌增殖。
- 卢俊鑫杨金波邝哲师赵祥杰叶明强潘木水
- 关键词：抗菌肽断奶仔猪肠道菌群
- 抗菌肽对断奶仔猪血清生化指标、细胞因子水平和小肠黏膜形态的影响被引量：14
- 2014年
- 本试验旨在研究饲粮中添加抗菌肽对断奶仔猪血清生化指标、细胞因子水平和小肠黏膜形态的影响。试验选用体重相近的28日龄断奶仔猪120头,随机分为4组,每组3个重复,每个重复10只(公、母各半)。对照组饲喂基础饲粮,试验I组饲喂基础饲粮+120 mg/kg吉他霉素,试验Ⅱ组饲喂基础饲粮+200 mg/kg天蚕素抗菌肽,试验Ⅲ组饲喂基础饲粮+300 mg/kg PR39抗菌肽。试验期为21 d。结果表明:添加抗菌肽显著提高了部分血清生化指标(总蛋白、丙氨酸氨基转移酶、IL-1β、IL-2、IL-6)、空肠和回肠的绒毛高度及空肠和回肠的绒毛高度/隐窝深度比值(P<0.05);添加抗菌肽对血清中天门冬氨酸氨基转移酶和干扰素、十二指肠的绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比值有提高的趋势。由此可见,在饲粮中添加猪源性PR39抗菌肽可改善断奶仔猪的血清生化指标,提高断奶仔猪的细胞因子水平,改善提高断奶的小肠黏膜形态。
- 卢俊鑫邝哲师杨金波赵祥杰张宝玲黄光琳
- 关键词：抗菌肽血清生化指标细胞因子水平小肠黏膜形态断奶仔猪
- 一株高效降解蚕蛹蛋白的菌株筛选与初步鉴定被引量：1
- 2013年
- 筛选、鉴定能高效降解缫丝蚕蛹蛋白的菌株,用于提高缫丝蚕蛹生产食品和动物饲料的营养价值。从蚕蛹储藏车间及周围的土壤中收集细菌,经富集培养、干酪素平板初筛和发酵蚕蛹蛋白复筛,获得一株产蛋白酶活性较高的菌株,命名为CY21。该菌株在32℃、pH 7.0条件下培养60 h后所产蛋白酶的比活力可达到272.7 U/mg。通过形态学观察、经典生理生化试验以及16S rDNA序列系统发育分析,初步确定该菌株为芽孢杆菌属(Bacillus)与解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)亲缘关系很近的一个菌株。
- 赵祥杰杨荣玲孔军邝哲师叶明强罗国庆肖更生
- 关键词：蚕蛹蛋白蛋白酶解淀粉芽孢杆菌
