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Ⅰ型胶原α_1链基因-1997G→T突变对成骨细胞生物学性能的影响被引量：2: 2010年; 目的研究Ⅰ型胶原α1链(COLⅠA1)基因-1997G→T突变对成骨细胞生物学性能的影响,初步探讨COLⅠA1基因-1997G/T多态性影响骨矿物密度(BMD)的病理机制。方法取行髋、膝关节置换患者的松质骨原代培养成骨细胞,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对成骨细胞进行基因型鉴定,筛选出GG、GT、TT三个基因型的细胞株,实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测COLⅠA1 mRNA表达量;ELISA法测其合成Ⅰ型胶原的量;并测成骨细胞增殖率、骨碱性磷酸酶(BALP)的活性、细胞基质钙含量以及钙结节数量。结果成功筛选出GG、GT、TT三个基因型的成骨细胞株。TT型成骨细胞的COLⅠA1 mRNA表达量、Ⅰ型胶原含量、细胞基质钙含量以及钙结节数量均低于GG、GT型(P<0.01),GT型与GG型之间差异无统计学意义(P>0.05)。而年龄、细胞增殖率、BALP活性三个基因型的成骨细胞之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 COLⅠA1基因-1997G→T突变可减少成骨细胞COLⅠA1 mRNA表达量、Ⅰ型胶原的含量、细胞基质钙含量以及钙结节数量。TT型成骨细胞Ⅰ型胶原合成的减少导致细胞外基质减少,钙质沉着部位不足可能是-1997G/T患者BMD降低的原因。; 曹飞沈彬李勇黄强杨静周宗科康鹏德彭文珍夏庆杰裴福兴; 关键词：基因多态性成骨细胞

Ⅰ型胶原基因启动子区-1997G/T位点多态性和成都地区汉族绝经后妇女骨密度的相关性研究被引量：4: 2010年; 目的研究Ⅰ型胶原α1链(COLⅠA1)基因启动子区-1997G/T位点多态性与成都地区汉族绝经后妇女腰椎骨密度的相互关系。方法根据双能X线吸收法测定第2～4腰椎(L2～4)部位的骨密度值的结果,纳入受试者318例,均为成都地区汉族绝经后妇女,其中骨质疏松症组212例,正常对照组106例;抽取受试者外周静脉血2 mL,提取白细胞基因组DNA;采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的基因所在的DNA片段;应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测外周血白细胞基因组COL1A1基因启动子区-1997G/T位点多态性。结果骨质疏松症组中COLⅠA1基因启动子区-1997G/T位点GG、GT、TT基因型分别有82例、99例和31例,对照组中GG、GT、TT基因型分别有51例、45例和10例;骨质疏松症组的COLⅠA1基因启动子区-1997G/T位点等位基因T的频率较正常对照组高(P<0.05);对骨质疏松症组按基因型分组进一步分析发现,TT纯合子组个体的腰椎骨密度比GG纯合子组和GT杂合子组低(P<0.05)。结论COLⅠA1基因启动子区-1997G/T位点多态性与成都地区汉族绝经后妇女腰椎骨密度相关,携带TT基因型的个体更易导致低骨矿密度和患骨质疏松症。; 李勇沈彬黄强曹飞夏庆杰杨静裴福兴; 关键词：骨矿密度启动子遗传多态性

-1997G/T位点多态性对COL/A1基因表达的影响及与骨生物力学的相关性研究被引量：2: 2009年; 目的研究绝经后骨质疏松症患者中COLIA1基因启动子区-1997G/T位点多态性对该基因mRNA表达量的影响以及与骨生物力学的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restrictionfragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测COLIA1基因启动子区-1997G/T位点多态性;半定量逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)分析COLIA1基因启动子区-1997G/T位点多态性对COLIA1基因mRNA的表达量的影响,并检测股骨头负重区松质骨的最大载荷、极限应力、极限应变和弹性模量。结果GG、GT、TT基因型组的COLIA1基因mRNA相对表达量分别为3.4±1.2、3.2±1.2和1.7±0.2;GG、GT、TT基因型组的股骨头负重区松质骨的生物力学测试结果分别为:最大载荷(218.88±79.02)N、(240.47±76.27)N、(204.51±69.58)N,极限应力(5.34±1.70)Mpa、(5.88±1.86)Mpa、(5.00±1.93)Mpa,极限应变10.65%±4.01%、10.27%±4.67%、11.23%±5.67%,弹性模量(53.35±26.15)Mpa、(61.26±31.47)Mpa、(47.69±28.64)Mpa。股骨头负重区松质骨COLIA1基因mRNA表达量与该部位松质骨最大载荷、极限应力和极限应变的相关系数分别为0.425、0.425和-0.343(P<0.05)。结论COLIA1基因启动子区-1997G/T位点多态性与该基因mRNA表达量相关,突变的TT纯合子表达量下调;股骨头负重区松质骨COLIA1基因mRNA表达量与该部位松质骨抗压缩力学性能相关。; 李勇沈彬杨静曹飞周宗科康鹏德裴福兴; 关键词：生物力学遗传多态性

骨质疏松性骨折愈合过程中骨痂微结构与生物力学性能的相关研究被引量：3: 2010年; 目的研究骨质疏松性骨折愈合过程中骨痂生物力学性能与显微三维结构、Ⅰ型胶原面积、骨密度的改变规律及相关性。方法采用双侧卵巢切除术(ovariectomy,OVX)建立大鼠骨质疏松模型(OVX组),假手术组(Sham组)作为对照。两组均于术后10周通过大鼠右后肢胫骨中段截骨建立骨折内固定模型;骨折内固定模型建立后4、6、8、12周进行大鼠右后肢胫骨中段骨密度测定,术后6周及12周进行骨痂生物力学强度、Ⅰ型胶原面积及显微三维结构测定。结果两组中骨密度测量值在骨折内固定术后6周高于术后12周(P<0.05),而生物力学强度、Ⅰ型胶原面积和结构模型参数(structure model index,SMI)值在骨折内固定术后第12周时高于术后6周(P<0.05)。组间比较显示,骨折内固定术后6周与12周时OVX组的SMI值均明显低于Sham组(P<0.05)。结论在骨折愈合过程中,骨矿含量峰值出现时间早于胶原量与生物力学强度峰值出现时间,胶原的累积程度可独立于骨的矿盐沉积程度作为预测骨生物力学强度的一个指标。; 牟健雄沈彬杨静李勇周宗科康鹏德裴福兴; 关键词：骨质疏松骨折生物力学

成都地区骨质疏松症患者骨密度与Ⅰ型胶原α_1链基因Sp1结合位点多态性的相关性研究被引量：4: 2008年; 目的探讨Ⅰ型胶原α1链（COLIA1）基因Sp1结合位点的多态性与成都地区骨质疏松症患者骨密度的相互关系。方法（1）选取四川大学华西医院门诊骨质疏松症患者中合格的自愿受试者237例，应用双能X线吸收法测定其第2-4腰椎（L2-L4）部位的骨密度值；（2）抽取受试者外周静脉血2ml，提取白细胞基因组DNA；（3）采用聚合酶链反应（PCR）扩增目的基因所在的DNA片段（第1112-1328核苷酸之间的片段，扩增产物长度为217 bp）；（4）应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测外周血白细胞基因组COLIA1基因Sp1结合位点多态性，扩增产物经限制性内切酶Van91I（pflMI）酶切，琼脂糖凝胶电泳观察，有酶切位点用S基因表示，无酶切位点用S基因表示。结果237例受试对象中，所有标本的扩增片段都能被限制性酶识别并切开，未能观察到Ⅰ型胶原α．链Sp1结合位点G→T突变，COLIA1基因型均为野生纯合子SS型，未发现SS基因型和SS基因型。结论在成都地区部分汉族骨质疏松症患者中，未发现COLIA1基因Sp1结合位点的多态性，其腰椎骨密度可能与Ⅰ型胶原α，链基因Sp1结合位点多态性无关。; 李勇沈彬牟健雄王燎裴福兴; 关键词：骨质疏松多态性骨密度

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国家自然科学基金(30600622)

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