吉林省科委基金(2005045)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：吴江孙欣杨宇吴昊更多>>
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- 发文基金：吉林省科委基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- NT4-GFP-Ant重组腺相关病毒载体的构建及病毒包装、滴度测定被引量：2
- 2007年
- 目的为使基因治疗时,较大分子的功能蛋白能通过血脑屏障,构建NT4-GFP-Ant重组腺相关病毒载体,包装重组病毒,并测定滴度。为进一步动物实验研究该重组病毒液感染鼻粘膜细胞,在鼻粘膜内表达的大分子融合蛋白沿“鼻-脑”通路人脑的可行性奠定基础。方法将已构建成功的NT4-GFP-Ant融合基因插入病毒载体质粒PSSHG中,构建重组腺相关病毒载体质粒,酶切电泳鉴定。用腺病毒辅助质粒PFG140、包装质粒pAAV/Ad及已构建的重组腺伴随病毒载体质粒,三质粒磷酸钙共沉淀法转染80％融合的293细胞系,包装重组腺病毒（rAAV）。回收病毒、斑点杂交方法测定重组病毒滴度。结果成功构建了重组腺相关病毒质粒PSSHG/NT4-GFP- Ant。包装、回收病毒后斑点杂交方法测定重组病毒滴度为3．36×10^9 PFU/ml。结论成功构建了PSSHG/NT4- GFP-Ant重组腺相关病毒载体,并成功包装了较高浓度的重组病毒。
- 吴昊吴江杨宇孙欣杨广笑王全颖
- 关键词：绿色荧光蛋白基因穿膜肽
